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南蛇藤素抑制TLR4/MMP-9通路抗类风湿关节炎滑膜细胞侵袭的研究

符号说明第1-9页
中文摘要第9-15页
Abstract第15-22页
前言第22-27页
 参考文献第24-27页
第一部分 南蛇藤素对LPS诱导的RA-FLS侵袭的影响第27-40页
 1 材料第27-29页
   ·滑膜组织来源第27页
   ·主要试剂第27-28页
   ·主要仪器设备第28页
   ·主要试剂的配置第28-29页
 2 方法第29-31页
   ·RA-FLS的分离和培养第29页
   ·FACS鉴定人RA-FLS表面标志第29-30页
   ·MTT法检测RA-FLS活力第30页
   ·细胞迁徙实验第30页
   ·细胞侵袭实验第30-31页
   ·统计学处理第31页
 3 结果第31-36页
   ·RA-FLS体外培养的形态学观察及鉴定第31-32页
   ·Cel对RA-FLS活力的影响第32-33页
   ·Cel对LPS诱导的RA-FLS迁徙与侵袭力的影响第33-36页
 4 讨论第36-38页
 参考文献第38-40页
第二部分 南蛇藤素抑制MMP-9介导的RA-FLS侵袭的研究第40-60页
 1 材料第40-42页
   ·主要材料及试剂第40-41页
   ·主要仪器设备第41页
   ·主要试剂的配置第41-42页
 2 方法第42-47页
   ·RA-FLS的分离和培养第42页
   ·细胞迁徙与侵袭实验第42页
   ·qRT-PCR检测第42-44页
   ·Western blot检测第44-46页
   ·脂质体转染MMP-9 siRNA第46页
   ·ELISA第46-47页
   ·明胶酶谱实验第47页
   ·统计学处理第47页
 3 结果第47-56页
   ·qRT-PCR检测Cel对MMPs表达的影响第47-48页
   ·Western blot检测Cel对MMP-2及MMP-9蛋白表达的影响第48-51页
   ·明胶酶谱检测Cel对MMP-2及MMP-9活性的影响第51-52页
   ·ELISA检测Cel对RA-FLS上清中MMP-9表达水平的影响第52-53页
   ·MMP-9 siRNA转染对RA-FLS迁徙的影响第53页
   ·MMP-9 siRNA转染对RA-FLS侵袭的影响第53-56页
 4 讨论第56-57页
 参考文献第57-60页
第三部分 南蛇藤素抑制TLR4/NF-κB通路活化下调MMP-9转录的研究第60-84页
 1 材料第60-62页
   ·主要材料及试剂第60-61页
   ·主要仪器设备第61页
   ·主要试剂的配置第61-62页
 2 方法第62-68页
   ·RA-FLS的分离和培养第62页
   ·Western blot检测第62-63页
   ·双荧光素酶报告基因分析第63-65页
   ·EMSA检测体外条件下NF-κB DNA结合活性第65-66页
   ·ChIP检测体内条件下NF-κB与MMP-9启动子的结合第66-68页
 3 结果第68-79页
   ·双荧光素酶报告基因检测Cel对MMP-9启动子活性的影响第68-73页
   ·EMSA检测Cel对NF-κB与MMP-9启动子结合活性的影响第73-74页
   ·ChIP检测Cel对NF-κB与MMP-9启动子结合活性的影响第74页
   ·Cel对TLR4/NF-κB信号通路分子表达的影响第74-77页
   ·TLR4信号通路对MMP-9表达的调控作用第77-79页
 4 讨论第79-81页
 参考文献第81-84页
第四部分 南蛇藤素抑制CIA大鼠滑膜炎症及关节破坏的研究第84-99页
 1 材料第84-85页
   ·主要试剂第84页
   ·主要仪器设备第84-85页
   ·主要试剂的配置第85页
 2 方法第85-87页
   ·CIA大鼠模型的建立及实验分组第85-86页
   ·CIA模型的评估第86-87页
   ·Western blot检测大鼠血清MMP-2、MMP-9第87页
   ·统计学处理第87页
 3 结果第87-96页
   ·CIA大鼠一般情况第87-88页
   ·AI评分第88-89页
   ·关节X-线评估第89-91页
   ·滑膜组织病理学评分第91页
   ·Western blot检测MMP-2、MMP-9第91-96页
 4 讨论第96-98页
 参考文献第98-99页
全文小结第99-100页
文献综述第100-116页
 参考文献第110-116页
致谢第116-117页
研究成果第117-121页

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