符号说明 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-15页 |
Abstract | 第15-22页 |
前言 | 第22-27页 |
参考文献 | 第24-27页 |
第一部分 南蛇藤素对LPS诱导的RA-FLS侵袭的影响 | 第27-40页 |
1 材料 | 第27-29页 |
·滑膜组织来源 | 第27页 |
·主要试剂 | 第27-28页 |
·主要仪器设备 | 第28页 |
·主要试剂的配置 | 第28-29页 |
2 方法 | 第29-31页 |
·RA-FLS的分离和培养 | 第29页 |
·FACS鉴定人RA-FLS表面标志 | 第29-30页 |
·MTT法检测RA-FLS活力 | 第30页 |
·细胞迁徙实验 | 第30页 |
·细胞侵袭实验 | 第30-31页 |
·统计学处理 | 第31页 |
3 结果 | 第31-36页 |
·RA-FLS体外培养的形态学观察及鉴定 | 第31-32页 |
·Cel对RA-FLS活力的影响 | 第32-33页 |
·Cel对LPS诱导的RA-FLS迁徙与侵袭力的影响 | 第33-36页 |
4 讨论 | 第36-38页 |
参考文献 | 第38-40页 |
第二部分 南蛇藤素抑制MMP-9介导的RA-FLS侵袭的研究 | 第40-60页 |
1 材料 | 第40-42页 |
·主要材料及试剂 | 第40-41页 |
·主要仪器设备 | 第41页 |
·主要试剂的配置 | 第41-42页 |
2 方法 | 第42-47页 |
·RA-FLS的分离和培养 | 第42页 |
·细胞迁徙与侵袭实验 | 第42页 |
·qRT-PCR检测 | 第42-44页 |
·Western blot检测 | 第44-46页 |
·脂质体转染MMP-9 siRNA | 第46页 |
·ELISA | 第46-47页 |
·明胶酶谱实验 | 第47页 |
·统计学处理 | 第47页 |
3 结果 | 第47-56页 |
·qRT-PCR检测Cel对MMPs表达的影响 | 第47-48页 |
·Western blot检测Cel对MMP-2及MMP-9蛋白表达的影响 | 第48-51页 |
·明胶酶谱检测Cel对MMP-2及MMP-9活性的影响 | 第51-52页 |
·ELISA检测Cel对RA-FLS上清中MMP-9表达水平的影响 | 第52-53页 |
·MMP-9 siRNA转染对RA-FLS迁徙的影响 | 第53页 |
·MMP-9 siRNA转染对RA-FLS侵袭的影响 | 第53-56页 |
4 讨论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-60页 |
第三部分 南蛇藤素抑制TLR4/NF-κB通路活化下调MMP-9转录的研究 | 第60-84页 |
1 材料 | 第60-62页 |
·主要材料及试剂 | 第60-61页 |
·主要仪器设备 | 第61页 |
·主要试剂的配置 | 第61-62页 |
2 方法 | 第62-68页 |
·RA-FLS的分离和培养 | 第62页 |
·Western blot检测 | 第62-63页 |
·双荧光素酶报告基因分析 | 第63-65页 |
·EMSA检测体外条件下NF-κB DNA结合活性 | 第65-66页 |
·ChIP检测体内条件下NF-κB与MMP-9启动子的结合 | 第66-68页 |
3 结果 | 第68-79页 |
·双荧光素酶报告基因检测Cel对MMP-9启动子活性的影响 | 第68-73页 |
·EMSA检测Cel对NF-κB与MMP-9启动子结合活性的影响 | 第73-74页 |
·ChIP检测Cel对NF-κB与MMP-9启动子结合活性的影响 | 第74页 |
·Cel对TLR4/NF-κB信号通路分子表达的影响 | 第74-77页 |
·TLR4信号通路对MMP-9表达的调控作用 | 第77-79页 |
4 讨论 | 第79-81页 |
参考文献 | 第81-84页 |
第四部分 南蛇藤素抑制CIA大鼠滑膜炎症及关节破坏的研究 | 第84-99页 |
1 材料 | 第84-85页 |
·主要试剂 | 第84页 |
·主要仪器设备 | 第84-85页 |
·主要试剂的配置 | 第85页 |
2 方法 | 第85-87页 |
·CIA大鼠模型的建立及实验分组 | 第85-86页 |
·CIA模型的评估 | 第86-87页 |
·Western blot检测大鼠血清MMP-2、MMP-9 | 第87页 |
·统计学处理 | 第87页 |
3 结果 | 第87-96页 |
·CIA大鼠一般情况 | 第87-88页 |
·AI评分 | 第88-89页 |
·关节X-线评估 | 第89-91页 |
·滑膜组织病理学评分 | 第91页 |
·Western blot检测MMP-2、MMP-9 | 第91-96页 |
4 讨论 | 第96-98页 |
参考文献 | 第98-99页 |
全文小结 | 第99-100页 |
文献综述 | 第100-116页 |
参考文献 | 第110-116页 |
致谢 | 第116-117页 |
研究成果 | 第117-121页 |