| 中文摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 目录 | 第10-13页 |
| 符号说明 | 第13-16页 |
| 第一部分 文献综述 | 第16-34页 |
| 第一章 镉毒性机理研究进展 | 第16-29页 |
| 1. 镉及其污染现状 | 第16-17页 |
| 2. 镉的毒性危害 | 第17-18页 |
| 3. 镉的毒性机理 | 第18-27页 |
| ·镉与氧化应激 | 第18-20页 |
| ·镉与DNA损伤 | 第20-21页 |
| ·镉与细胞凋亡 | 第21-26页 |
| ·镉与细胞周期 | 第26-27页 |
| 4. 总结 | 第27-29页 |
| 第二章 N-乙酰半胱氨酸的研究进展 | 第29-34页 |
| 1. NAC的药理特性 | 第29页 |
| 2. NAC的作用机制 | 第29-32页 |
| ·抗氧化作用 | 第29-30页 |
| ·对肿瘤的作用 | 第30-31页 |
| ·对NF-κB的影响 | 第31页 |
| ·对凋亡的影响 | 第31-32页 |
| ·其它作用 | 第32页 |
| 3. NAC对肝脏的保护作用 | 第32-33页 |
| 4. 结语 | 第33-34页 |
| 第二部分 研究内容 | 第34-87页 |
| 第一章 镉致BRL 3A细胞毒性损伤及NAC的保护作用 | 第34-41页 |
| 1. 材料和方法 | 第34-36页 |
| ·细胞系 | 第34页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第34页 |
| ·主要溶液的配制 | 第34-35页 |
| ·细胞培养与分组 | 第35页 |
| ·细胞处理后形态学观察 | 第35页 |
| ·BRL 3A细胞存活率检测 | 第35页 |
| ·BRL 3A细胞上清中LDH活性测定 | 第35页 |
| ·统计学分析 | 第35-36页 |
| 2. 结果 | 第36-39页 |
| ·镉对细胞形态学的影响及NAC的保护作用 | 第36-38页 |
| ·镉对细胞存活率的影响及NAC的保护作用 | 第38页 |
| ·镉对细胞培养上清液中LDH活性的影响及NAC的保护作用 | 第38-39页 |
| 3. 讨论 | 第39-41页 |
| 第二章 镉致BRL 3A细胞的凋亡及NAC的保护作用 | 第41-46页 |
| 1. 材料与方法 | 第41-42页 |
| ·细胞培养与分组 | 第41页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第41页 |
| ·主要溶液的配制 | 第41页 |
| ·BRL 3A细胞凋亡形态学观察 | 第41页 |
| ·流式细胞仪检测BRL 3A细胞凋亡率 | 第41-42页 |
| ·统计学分析 | 第42页 |
| 2. 结果 | 第42-45页 |
| ·镉对细胞核形态学的影响及NAC的作用 | 第42-44页 |
| ·镉对细胞凋亡率的影响及NAC的作用 | 第44-45页 |
| 3. 讨论 | 第45-46页 |
| 第三章 镉致BRL 3A细胞DNA损伤的研究 | 第46-51页 |
| 1.材料与方法 | 第46-47页 |
| ·细胞培养与分组 | 第46页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第46页 |
| ·主要溶液的配制 | 第46页 |
| ·彗星实验 | 第46-47页 |
| ·统计学分析 | 第47页 |
| 2. 结果 | 第47-49页 |
| ·彗星图像的观察 | 第47-48页 |
| ·细胞彗星率的检测 | 第48-49页 |
| ·拖尾细胞尾长和尾部DNA含量 | 第49页 |
| 3. 讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 镉致BRL 3A细胞氧化损伤及NAC的保护作用 | 第51-61页 |
| 1. 材料与方法 | 第51-55页 |
| ·细胞培养与分组 | 第51页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第51页 |
| ·主要溶液的配制 | 第51页 |
| ·细胞内ROS含量的测定 | 第51-52页 |
| ·细胞SOD,GSH-Px活力和MDA含量的测定 | 第52-55页 |
| 2. 结果 | 第55-58页 |
| ·BRL 3A细胞内ROS含量变化 | 第55-56页 |
| ·细胞内SOD和GSH-Px活性的变化 | 第56页 |
| ·细胞内MDA含量的变化 | 第56-58页 |
| 3. 讨论 | 第58-61页 |
| ·镉对细胞ROS的影响及NAC的保护作用 | 第58页 |
| ·镉对细胞SOD、GSH-Px活性和MDA含量的影响及NAC的保护作用 | 第58-61页 |
| 第五章 镉致BRL 3A细胞线粒体损伤及NAC的保护作用 | 第61-78页 |
| 1. 材料与方法 | 第61-67页 |
| ·细胞培养与分组 | 第61页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第61页 |
| ·细胞线粒体超微结构观察 | 第61-62页 |
| ·流式细胞仪检测细胞膜电位 | 第62页 |
| ·免疫荧光检测AIF、Endo G的表达 | 第62页 |
| ·Caspase 3和Caspase 9活性的测定 | 第62页 |
| ·实时荧光定量PCR检测Bax、Bcl-2 mRNA的表达 | 第62-65页 |
| ·免疫印迹检测Bax、Bcl-2、Caspase 3、Caspase 9和PARP蛋白表达 | 第65-67页 |
| 2. 结果 | 第67-74页 |
| ·细胞线粒体膜电位的变化 | 第67-68页 |
| ·细胞线粒体超微结构的变化 | 第68-70页 |
| ·细胞AIF、EndoG荧光测定 | 第70-71页 |
| ·细胞Caspase 3、9活性测定 | 第71-72页 |
| ·细胞Bax、Bcl-2蛋白表达水平的检测 | 第72页 |
| ·细胞Caspase 3、Caspase 9和PARP蛋白表达水平检测 | 第72-73页 |
| ·BRL 3A细胞mRNA提取结果 | 第73页 |
| ·BRL 3A细胞Bax、Bcl-2 mRNA表达水平检测 | 第73-74页 |
| 3. 讨论 | 第74-78页 |
| ·镉对BRL 3A细胞线粒体的影响及NAC的保护作用 | 第74-75页 |
| ·镉对BRL 3A细胞AIF、EndoG蛋白的影响 | 第75-76页 |
| ·镉对BRL 3A细胞凋亡的线粒体途径的影响及NAC的保护作用 | 第76-78页 |
| 第六章 镉对BRL 3A细胞MAPK信号通路的影响及NAC的保护作用 | 第78-83页 |
| 1. 材料与方法 | 第78-79页 |
| ·细胞培养与分组 | 第78页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第78页 |
| ·流式细胞仪检测细胞凋亡率 | 第78页 |
| ·免疫印迹检测JNK、ERK、p38、P-JNK、P-ERK和P-p38蛋白表达 | 第78-79页 |
| 2. 结果 | 第79-81页 |
| ·抑制剂对细胞凋亡率的影响 | 第79-80页 |
| ·镉对BRL 3A细胞MAPK蛋白表达的变化 | 第80-81页 |
| 3. 讨论 | 第81-83页 |
| 第七章 镉对BRL 3A细胞Fas/FasL途径的影响及NAC的保护作用 | 第83-87页 |
| 1. 材料与方法 | 第83-84页 |
| ·细胞培养与分组 | 第83页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第83页 |
| ·Caspase 8活性测定 | 第83页 |
| ·免疫印迹检测Caspase 8、FasL蛋白表达 | 第83-84页 |
| ·实时荧光定量PCR检测Fas、FasL mRNA的表达 | 第84页 |
| 2. 结果 | 第84-86页 |
| ·镉对BRL 3A细胞Caspase 8活性的影响 | 第84-85页 |
| ·BRL 3A细胞Caspase 8、FasL蛋白表达水平的变化 | 第85页 |
| ·BRL 3A细胞Fas、FasL mRNA表达的变化 | 第85-86页 |
| 3. 讨论 | 第86-87页 |
| 全文结论 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-109页 |
| 致谢 | 第109-110页 |
| 攻读博士期间发表的学术论文 | 第110-111页 |
