摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一部分:文献综述 | 第10-21页 |
1 骨关节炎的概述 | 第10-13页 |
·骨关节炎的病因 | 第10-11页 |
·骨关节炎的治疗方法及研究进展 | 第11-13页 |
2 软骨细胞的特征 | 第13-18页 |
·软骨细胞与骨关节炎间研究的联系 | 第13-15页 |
·骨关节炎病理状态下的软骨细胞 | 第15-17页 |
·软骨细胞的获取方法 | 第17-18页 |
·软骨细胞的体外培养方法 | 第18页 |
3 美洛昔康的研究进展 | 第18-20页 |
·美洛昔康的药理作用 | 第19-20页 |
·美洛昔康的临床应用 | 第20页 |
4 本课题的研究目的和意义 | 第20-21页 |
第二部分:试验研究 | 第21-53页 |
试验一 软骨细胞的原代培养及鉴定 | 第21-29页 |
引言 | 第21-22页 |
1 试验材料 | 第22页 |
·试验动物 | 第22页 |
·主要仪器 | 第22页 |
·主要试剂 | 第22页 |
2 试验方法 | 第22-24页 |
·犬关节软骨细胞的分离 | 第22-23页 |
·犬软骨细胞的冻存与复苏 | 第23页 |
·制备软骨细胞爬片 | 第23-24页 |
·甲苯胺蓝染色 | 第24页 |
·Ⅱ型胶原免疫鉴定 | 第24页 |
3 结果与分析 | 第24-26页 |
·软骨细胞的生长状态 | 第24-25页 |
·甲苯胺蓝鉴定染色 | 第25-26页 |
·Ⅱ型胶原鉴定染色 | 第26页 |
4 讨论与总结 | 第26-29页 |
·犬膝关节软骨细胞的原代培养 | 第26-28页 |
·犬关节软骨细胞的分离 | 第26-27页 |
·软骨细胞的生长特性 | 第27-28页 |
·软骨细胞的鉴定 | 第28-29页 |
试验二 美洛昔康对软骨细胞活力的影响 | 第29-53页 |
引言 | 第29页 |
1 试验材料 | 第29-30页 |
·主要仪器 | 第29-30页 |
·主要试剂 | 第30页 |
2 试验方法 | 第30-35页 |
·噻唑盐(MTT)比色试验 | 第30-31页 |
·流式检测凋亡 | 第31页 |
·流式检测细胞周期 | 第31页 |
·RT-PCR 检测 Bax、p53、Bcl-2 基因表达量 | 第31-35页 |
·提取犬软骨细胞的 mRNA | 第32页 |
·CDNA 的制备 | 第32-33页 |
·检测 Bax、Bcl-2、p53 的表达(Real-time PCR 检测) | 第33-35页 |
3 数据处理 | 第35页 |
4 结果与分析 | 第35-50页 |
·美洛昔康刺激软骨细胞的形态观察图 | 第35-37页 |
·美洛昔康对细胞增殖的影响 | 第37-38页 |
·美洛昔康对软骨细胞凋亡的影响 | 第38-40页 |
·美洛昔康对软骨细胞周期的影响 | 第40-47页 |
·美洛昔康对软骨细胞因子 Bax,Bcl-2,p53 基因表达的影响 | 第47-50页 |
5 分析与讨论 | 第50-53页 |
第三部分:结论、创新点和展望 | 第53-55页 |
一、结论 | 第53页 |
二、创新点 | 第53-54页 |
三、展望 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-59页 |
致谢 | 第59页 |