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His标签蛋白定向固定化方法的建立、表征及应用

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-9页
第一章 绪论第9-17页
   ·引言第9页
   ·药物与蛋白质相互作用的研究方法第9-12页
     ·超滤法第9-10页
     ·亲和毛细管电泳法第10-11页
     ·表面离子束技术第11页
     ·亲和色谱第11-12页
   ·功能蛋白质的固定化方法第12-15页
     ·随意固定化方法第12-14页
     ·定向固定化方法第14-15页
   ·研究对象简介第15-16页
     ·绿色荧光蛋白GFP简介第15-16页
     ·β_2-肾上腺素受体简介第16页
   ·本论文的主要研究内容第16-17页
第二章 功能蛋白质定向固定化方法的建立及表征第17-32页
   ·仪器与材料第17页
     ·仪器第17页
     ·材料第17页
   ·定向固定化绿色荧光蛋白GFP固定相的制备第17-22页
     ·绿色荧光蛋白GFP的预处理第17-18页
     ·绿色荧光蛋白GFP的定向固定化第18-20页
     ·理论模型第20-21页
     ·定向固定化GFP色谱固定相的表征第21-22页
     ·定向固定化GFP构象表征第22页
   ·结果与讨论第22-31页
     ·绿色荧光蛋白GFP的预处理第22-23页
     ·绿色荧光蛋白GFP的定向固定化第23-24页
     ·定向固定化GFP色谱固定相的表征第24-31页
   ·小结第31-32页
第三章 功能蛋白质定向固定化方法的应用第32-53页
   ·仪器及材料第32页
     ·仪器第32页
     ·试剂第32页
   ·含His标签猪β_2-AR的原核表达载体的构建第32-36页
     ·引物设计第32-33页
     ·PCR扩增和产物的胶回收第33-34页
     ·酶切第34页
     ·连接和转化第34-35页
     ·菌落PCR检测第35页
     ·质料提取第35-36页
     ·测序比对第36页
   ·定向固定化β_2-肾上腺素受体色谱固定相的制备第36-40页
     ·β_2-肾上腺素受体的分离纯化第36-40页
     ·β_2-肾上腺素受体色谱固定相的制备及表征第40页
   ·固定化β_2-肾上腺素受体与小分子药物的相互作用第40-41页
     ·硫酸沙丁胺醇与定向固定化β_2-AR的相互作用第40页
     ·盐酸妥布特罗与定向固定化β_2-AR的相互作用第40页
     ·盐酸氯丙那林与定向固定化β_2-AR的相互作用第40-41页
     ·盐酸麻黄碱与定向固定化β_2-AR的相互作用第41页
     ·硫酸特布他林与定向固定化β_2-AR的相互作用第41页
   ·结果与讨论第41-52页
     ·PCR扩增结果鉴定第41-42页
     ·目的基因连接pET-32a载体的菌斑结果鉴定第42页
     ·β_2-肾上腺素受体的鉴定第42-43页
     ·定向固定化β_2-肾上腺素受体色谱柱的表征第43-45页
     ·固定化β_2-肾上腺素受体与小分子药物的相互作用第45-52页
   ·小结第52-53页
结论与展望第53-54页
 结论第53页
 展望第53-54页
参考文献第54-62页
附录第62-63页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第63-64页
致谢第64页

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