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铂类/氟尿嘧啶药物疗效相关基因表达水平检测方法的建立及其在个体化用药平台的初步应用

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-5页
英文缩略语表第5-8页
第一章 绪论第8-21页
   ·药物基因组学第8-9页
   ·肿瘤的个体化用药第9-10页
   ·基因mRNA表达水平与药物疗效第10-16页
     ·铂类药物与ERCC1、BRCA1第10-14页
     ·氟尿嘧啶与TYMS第14-16页
   ·基因mRNA表达检测方法第16-19页
   ·立题背景及意义第19-21页
第二章 实验方法的建立及优化第21-46页
   ·实验方法与原理第21页
   ·实验材料第21-23页
     ·主要实验仪器第21-22页
     ·实验试剂及材料第22页
     ·主要溶液及培养基配制第22-23页
   ·实验方法的建立及优化第23-36页
     ·引物探针设计第23-24页
     ·新鲜组织中总RNA的提取第24-26页
     ·石蜡组织切片中总RNA的提取第26-28页
     ·反转录合成cDNA第一链第28-30页
     ·Real time-PCR第30-36页
     ·数据分析第36页
   ·阳性质控品的构建第36-46页
     ·PCR扩增待克隆片段第37-38页
     ·重组子构建与转化第38-39页
     ·挑选阳性克隆并鉴定第39-40页
     ·体外转录第40-42页
     ·将体外转录的RNA反转录为cDNA第42页
     ·Real Time-PCR及质控品浓度的优化第42-46页
第三章 肿瘤样本mRNA表达的检测及结果分析第46-54页
   ·实验方法的验证第46-47页
     ·精密度实验及结果分析第46-47页
     ·稳定性实验及结果分析第47页
   ·肿瘤样本中ERCC1、BRCA1、TYMS mRNA表达检测第47-54页
     ·ERCC1、BRCA1、TYMS mRNA表达与样本情况关系第48-49页
     ·mRNA表达与样本类型第49-50页
     ·ERCC1、BRCA1、TYMS mRNA表达在不同肿瘤之间的差异第50-52页
     ·ERCC1、BRCA1、TYMS mRNA表达相关性分析第52-54页
第四章 讨论第54-62页
   ·内参基因的选择第54页
   ·mRNA表达检测的外源质控品第54-55页
   ·组织样本处理方式对检测结果的影响第55-56页
   ·基因mRNA表达水平在不同组织中的差异第56-59页
     ·癌旁组织与瘤变组织中基因表达的差异第56-57页
     ·不同肿瘤组织之间表达的差异第57-59页
   ·real time-PCR一步法与两步法比较第59-60页
   ·结论第60-62页
全文总结第62-63页
参考文献第63-70页
攻读硕士学位期间参与的科研项目第70-71页
致谢第71页

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