摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
英文缩略语表 | 第5-8页 |
第一章 绪论 | 第8-21页 |
·药物基因组学 | 第8-9页 |
·肿瘤的个体化用药 | 第9-10页 |
·基因mRNA表达水平与药物疗效 | 第10-16页 |
·铂类药物与ERCC1、BRCA1 | 第10-14页 |
·氟尿嘧啶与TYMS | 第14-16页 |
·基因mRNA表达检测方法 | 第16-19页 |
·立题背景及意义 | 第19-21页 |
第二章 实验方法的建立及优化 | 第21-46页 |
·实验方法与原理 | 第21页 |
·实验材料 | 第21-23页 |
·主要实验仪器 | 第21-22页 |
·实验试剂及材料 | 第22页 |
·主要溶液及培养基配制 | 第22-23页 |
·实验方法的建立及优化 | 第23-36页 |
·引物探针设计 | 第23-24页 |
·新鲜组织中总RNA的提取 | 第24-26页 |
·石蜡组织切片中总RNA的提取 | 第26-28页 |
·反转录合成cDNA第一链 | 第28-30页 |
·Real time-PCR | 第30-36页 |
·数据分析 | 第36页 |
·阳性质控品的构建 | 第36-46页 |
·PCR扩增待克隆片段 | 第37-38页 |
·重组子构建与转化 | 第38-39页 |
·挑选阳性克隆并鉴定 | 第39-40页 |
·体外转录 | 第40-42页 |
·将体外转录的RNA反转录为cDNA | 第42页 |
·Real Time-PCR及质控品浓度的优化 | 第42-46页 |
第三章 肿瘤样本mRNA表达的检测及结果分析 | 第46-54页 |
·实验方法的验证 | 第46-47页 |
·精密度实验及结果分析 | 第46-47页 |
·稳定性实验及结果分析 | 第47页 |
·肿瘤样本中ERCC1、BRCA1、TYMS mRNA表达检测 | 第47-54页 |
·ERCC1、BRCA1、TYMS mRNA表达与样本情况关系 | 第48-49页 |
·mRNA表达与样本类型 | 第49-50页 |
·ERCC1、BRCA1、TYMS mRNA表达在不同肿瘤之间的差异 | 第50-52页 |
·ERCC1、BRCA1、TYMS mRNA表达相关性分析 | 第52-54页 |
第四章 讨论 | 第54-62页 |
·内参基因的选择 | 第54页 |
·mRNA表达检测的外源质控品 | 第54-55页 |
·组织样本处理方式对检测结果的影响 | 第55-56页 |
·基因mRNA表达水平在不同组织中的差异 | 第56-59页 |
·癌旁组织与瘤变组织中基因表达的差异 | 第56-57页 |
·不同肿瘤组织之间表达的差异 | 第57-59页 |
·real time-PCR一步法与两步法比较 | 第59-60页 |
·结论 | 第60-62页 |
全文总结 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-70页 |
攻读硕士学位期间参与的科研项目 | 第70-71页 |
致谢 | 第71页 |