| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-31页 |
| ·植物抗寒研究 | 第10-20页 |
| ·抗寒机理 | 第10-12页 |
| ·低温引起植物寒害的原因 | 第10-11页 |
| ·生物膜系统 | 第11页 |
| ·低温胁迫下植物的生理生化变化 | 第11-12页 |
| ·抗寒相关基因 | 第12-18页 |
| ·调控性抗寒相关基因 | 第13-15页 |
| ·功能性抗寒相关基因 | 第15-18页 |
| ·橡胶树抗寒性研究现状 | 第18-20页 |
| ·橡胶低温胁迫下生理生化变化 | 第19-20页 |
| ·橡胶抗寒相关基因的克隆 | 第20页 |
| ·基因差异表达 | 第20-25页 |
| ·基因差异表达 | 第20-21页 |
| ·基因差异表达的高通量分析技术 | 第21-25页 |
| ·基因表达序列标签(ExPressedSequeneeTag,EST) | 第21-22页 |
| ·基因芯片(Gene chip) | 第22-23页 |
| ·基因表达系列分析(Serial Analysis of Gene Expression,SAGE) | 第23页 |
| ·mRNA差异显示技术 | 第23-24页 |
| ·消减克隆(subtractive cloning) | 第24-25页 |
| ·基因芯片在植物上的应用 | 第25-29页 |
| ·寻找特异性相关基因并推测一些已知基因的功能 | 第25-26页 |
| ·基因差异表达的研究及新基因发现 | 第26-27页 |
| ·研究与抗逆基因表达调控有关的顺式作用元件和反式作用因子,推测可能的植物抗性机理 | 第27-28页 |
| ·突变性和多态性检测 | 第28页 |
| ·功能基因组研究 | 第28-29页 |
| ·转基因农产品检测和植物检疫 | 第29页 |
| ·本研究的目的意义 | 第29-30页 |
| ·技术路线 | 第30-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-38页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·cDNA文库 | 第31页 |
| ·植物材料及处理 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-38页 |
| ·cDNA阵列的制备 | 第31-32页 |
| ·挑克隆摇菌 | 第31页 |
| ·点膜形成cDNA阵列培养 | 第31页 |
| ·膜上裂解提取DNA | 第31-32页 |
| ·紫外交联固定 | 第32页 |
| ·橡胶叶总RNA提取和质量检测 | 第32-33页 |
| ·RNA提取前准备工作 | 第32页 |
| ·橡胶树叶片总RNA的提取方法 | 第32-33页 |
| ·用紫外分光光度法检测RNA纯度和浓度 | 第33页 |
| ·甲醛变性胶电泳检测RNA完整性 | 第33页 |
| ·探针制备 | 第33-35页 |
| ·RNA反转录 | 第33-34页 |
| ·反转录后cDNA纯化及DIG标记 | 第34页 |
| ·cDNA探针检测 | 第34-35页 |
| ·杂交洗涤 | 第35-36页 |
| ·预杂交 | 第35页 |
| ·杂交 | 第35-36页 |
| ·洗膜 | 第36页 |
| ·检测 | 第36页 |
| ·图片扫描及数据获取 | 第36-37页 |
| ·研究中比较方式 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-46页 |
| ·橡胶树叶片总RNA的检测 | 第38页 |
| ·探针质量检测 | 第38-39页 |
| ·芯片的质量监控 | 第39页 |
| ·芯片杂交结果 | 第39页 |
| ·不同偏差取值条件和比较方式下差异基因条数 | 第39-40页 |
| ·通过cDNA阵列获得橡胶树低温胁迫下基因表达谱 | 第40-43页 |
| ·低温胁迫和常温条件的基因表达差异分析 | 第40页 |
| ·抗寒性与不抗寒橡胶品种差异表达分析 | 第40-43页 |
| ·通过cDNA阵列获得的橡胶树低温胁迫下基因表达谱 | 第43页 |
| ·通过cDNA阵列筛选橡胶树低温胁迫下抗寒相关基因 | 第43-46页 |
| ·温度A、B、C三种比较方式比较结果 | 第43-44页 |
| ·品种A、B、C三种比较方式比较结果 | 第44-45页 |
| ·温度和品种A、B、C三种比较方式下差异表达基因 | 第45页 |
| ·通过cDNA阵列筛选获得的橡胶树低温胁迫下抗寒相关基因 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-52页 |
| ·cDNA阵列的高通量性 | 第46页 |
| ·关于总RNA反转录对检测低丰度表达基因的问题 | 第46页 |
| ·杂交过程中背景高的问题 | 第46页 |
| ·通过cDNA阵列获得的橡胶树低温胁迫下基因表达谱 | 第46-48页 |
| ·通过cDNA阵列筛选获得的橡胶树低温胁迫下抗寒相关基因 | 第48-51页 |
| ·橡胶树低温胁迫下可能的抗寒相关基因 | 第48-51页 |
| ·转录因子基因锌指蛋白、MYB | 第48-50页 |
| ·蛋白质合成和降解的泛素/26s蛋白酶体途径 | 第50-51页 |
| ·能量代谢相关的过氧化物酶体腺苷酸载体基因、半乳糖-1-磷酸尿苷转移酶 | 第51页 |
| ·低温诱导、抗寒品种抗寒基因表达的不同 | 第51页 |
| ·后续工作 | 第51-52页 |
| 5 研究总结 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
