| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 文献综述 | 第13-27页 |
| 第一章 乳腺上皮细胞及转基因动物的研究进展 | 第13-27页 |
| ·乳腺上皮细胞体外培养研究进展 | 第13-15页 |
| ·乳腺上皮细胞系的建立 | 第13页 |
| ·乳腺上皮细胞分离培养 | 第13-14页 |
| ·乳腺上皮细胞纯化 | 第14-15页 |
| ·人-Β防御素3 研究进展 | 第15-17页 |
| ·防御素概述 | 第15-16页 |
| ·人β-防御素3 的分子生物学特征 | 第16-17页 |
| ·人β-防御素3 的应用前景 | 第17页 |
| ·转基因动物研究进展 | 第17-27页 |
| ·转基因动物研究 | 第17-18页 |
| ·转基因动物生产方法 | 第18-24页 |
| ·转基因动物的应用 | 第24-26页 |
| ·转基因动物面临的问题 | 第26-27页 |
| 试验研究 | 第27-52页 |
| 第二章 奶山羊乳腺上皮细胞的培养及鉴定 | 第27-35页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·组织来源 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27-28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·方法 | 第28-30页 |
| ·乳腺上皮细胞原代培养 | 第28页 |
| ·乳腺上皮细胞纯化 | 第28-29页 |
| ·乳腺上皮细胞传代培养 | 第29页 |
| ·乳腺上皮细胞冻存与复苏培养 | 第29页 |
| ·乳腺上皮细胞鉴定 | 第29-30页 |
| ·乳腺上皮细胞生长曲线测定 | 第30页 |
| ·结果 | 第30-33页 |
| ·乳腺上皮细胞形态学观察 | 第30-31页 |
| ·山羊乳腺上皮细胞角蛋白染色 | 第31-32页 |
| ·山羊乳腺上皮细胞生长曲线测定 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33页 |
| ·乳腺上皮细胞分离和纯化 | 第33页 |
| ·乳腺上皮细胞的鉴定 | 第33页 |
| ·小结 | 第33-35页 |
| 第三章 山羊乳腺上皮细胞基因转染条件的优化 | 第35-44页 |
| ·材料 | 第35-37页 |
| ·材料来源 | 第35-36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-38页 |
| ·质粒pEGFP-C1 及重组质粒pEBB 的纯化 | 第37页 |
| ·pEGFP-C1 质粒与重组质粒pEBB 浓度测定 | 第37页 |
| ·细胞抗性实验 | 第37页 |
| ·脂质体介导的外源基因转染山羊乳腺上皮细胞 | 第37-38页 |
| ·乳腺上皮细胞电转染 | 第38页 |
| ·山羊乳腺上皮细胞转人β-防御素3 基因的转染及筛选 | 第38页 |
| ·数据处理和统计学分析 | 第38页 |
| ·结果 | 第38-42页 |
| ·质粒pEGFP-C1 及重组质粒pEBB 的纯化 | 第38-39页 |
| ·乳腺上皮细胞抗性筛选结果 | 第39页 |
| ·脂质体介导山羊乳腺上皮细胞转染条件优化 | 第39-40页 |
| ·山羊乳腺上皮细胞电穿孔转染条件优化 | 第40-41页 |
| ·山羊乳腺上皮细胞转人β-防御素3 基因的转染及筛选 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 第四章 转人Β-防御素3 基因乳腺上皮细胞的鉴定 | 第44-52页 |
| ·实验材料 | 第44页 |
| ·阳性细胞株 | 第44页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| ·主要仪器 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-48页 |
| ·转人β-防御素3 基因山羊乳腺上皮细胞的PCR 鉴定 | 第44-45页 |
| ·奶山羊阳性细胞株的整合鉴定 | 第45-46页 |
| ·奶山羊乳腺上皮细胞阳性细胞株的体外诱导表达及鉴定 | 第46-48页 |
| ·实验结果 | 第48-50页 |
| ·阳性细胞株PCR 检测 | 第48页 |
| ·阳性细胞株southern blot 杂交检测 | 第48-49页 |
| ·阳性细胞株的体外诱导表达western blot 鉴定结果 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-62页 |
| 附录 | 第62-67页 |
| 缩略词 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 个人简介 | 第69页 |
