| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 文献综述 | 第9-20页 |
| 第一章 动物转基因技术及在畜牧业中的应用 | 第9-13页 |
| ·动物转基因技术 | 第9页 |
| ·动物转基因技术在畜牧业中的应用 | 第9-13页 |
| ·改善动物健康 | 第9-11页 |
| ·生产利于人类健康的功能食物 | 第11页 |
| ·改变动物肉质组成 | 第11-13页 |
| 第二章 基因打靶技术的研究 | 第13-20页 |
| ·基因打靶的研究概况 | 第13-14页 |
| ·影响基因打靶效率的因素 | 第14-17页 |
| ·打靶载体的同源臂 | 第14-15页 |
| ·转染方法 | 第15页 |
| ·筛选策略 | 第15-16页 |
| ·靶基因位置 | 第16页 |
| ·原代细胞及其培养条件 | 第16-17页 |
| ·提高基因打靶效率的策略 | 第17-18页 |
| ·等位基因纯合敲除 | 第18-20页 |
| 试验研究 | 第20-56页 |
| 第三章 基因双敲除打靶载体的构建及其验证 | 第20-33页 |
| ·材料与方法 | 第21-27页 |
| ·材料 | 第21-23页 |
| ·方法 | 第23-27页 |
| ·结果 | 第27-31页 |
| ·构建中间载体 | 第27-30页 |
| ·构建打靶载体 | 第30-31页 |
| ·讨论与结论 | 第31-33页 |
| 第四章 细胞水平对打靶载体进行功能验证 | 第33-44页 |
| ·材料与方法 | 第33-36页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·方法 | 第34-36页 |
| ·结果 | 第36-42页 |
| ·电转染参数优化 | 第36-37页 |
| ·受体细胞抗药性条件探索 | 第37页 |
| ·打靶载体功能元件的验证 | 第37-42页 |
| ·讨论与结论 | 第42-44页 |
| 第五章 构建小鼠MSTN 基因双敲除载体 | 第44-56页 |
| ·材料与方法 | 第45-50页 |
| ·材料 | 第45-46页 |
| ·方法 | 第46-50页 |
| ·结果 | 第50-54页 |
| ·分子克隆小鼠MSTN 基因同源臂 | 第50页 |
| ·构建MSTN 打靶载体pGTV1-SA-LA 和pGTV2-SA-LA | 第50-52页 |
| ·MSTN 基因敲除实验初探 | 第52-54页 |
| ·检测打靶克隆 | 第54页 |
| ·讨论与结论 | 第54-56页 |
| 总结 | 第56-57页 |
| 创新点 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文 | 第63页 |