摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
文献综述 | 第12-25页 |
第一章 小鼠精原干细胞与支持细胞研究进展 | 第12-25页 |
·小鼠精原干细胞的研究进展 | 第12-21页 |
·小鼠精原干细胞的发生 | 第12-13页 |
·小鼠精原细胞的类型 | 第13页 |
·小鼠精原干细胞的生物学特性 | 第13-14页 |
·小鼠精原干细胞的生理学特性 | 第14页 |
·小鼠精原干细胞的形态学特征 | 第14-15页 |
·小鼠精原干细胞的分离与纯化 | 第15-17页 |
·小鼠精原干细胞的鉴定、培养、诱导与冷冻保存 | 第17-21页 |
·饲养层支持细胞的研究进展 | 第21-23页 |
·小鼠睾丸支持细胞的生物学特性 | 第21页 |
·小鼠饲养层支持细胞的功能 | 第21-22页 |
·小鼠睾丸支持细胞与精原干细胞的关系 | 第22页 |
·小鼠睾丸支持细胞的分离 | 第22页 |
·小鼠睾丸支持细胞的鉴定 | 第22-23页 |
·小鼠睾丸支持细胞的体外培养 | 第23页 |
·促生长因子对精原干细胞增殖作用的影响 | 第23-24页 |
·LIF 对精原干细胞体外增殖作用的影响 | 第23页 |
·GDNF 对小鼠精原干细胞体外增殖作用的影响 | 第23-24页 |
·小鼠精原干细胞体外培养研究的目的与意义 | 第24-25页 |
试验研究 | 第25-58页 |
第二章 小鼠精原干细胞的分离与纯化研究 | 第25-31页 |
·试验材料 | 第25-26页 |
·试验动物及处理 | 第25页 |
·试验试剂 | 第25页 |
·设备与器械 | 第25-26页 |
·试剂配制 | 第26页 |
·试验方法 | 第26-28页 |
·小鼠睾丸单细胞悬液的制备 | 第26-27页 |
·台盼蓝拒染法检测细胞活率 | 第27页 |
·四次反复差速贴壁法分离纯化精原干细胞 | 第27-28页 |
·试验结果与分析 | 第28-29页 |
·形态学观察 | 第28页 |
·台盼蓝染色 | 第28页 |
·碱性磷酸酶(AKP)染色 | 第28-29页 |
·讨论 | 第29-30页 |
·两步酶消化法获取睾丸单细胞悬液 | 第29页 |
·精原干细胞常用的分离纯化方法 | 第29-30页 |
·小结 | 第30-31页 |
第三章 小鼠精原干细胞的鉴定研究 | 第31-36页 |
·试验材料 | 第31-32页 |
·试验动物及处理 | 第31页 |
·试验试剂 | 第31页 |
·设备与器械 | 第31页 |
·试剂配制 | 第31-32页 |
·试验方法 | 第32-34页 |
·小鼠睾丸单细胞悬液的制备 | 第32页 |
·小鼠睾丸支持细胞的制备 | 第32页 |
·四次反复差速贴壁分离纯化小鼠精原干细胞 | 第32页 |
·小鼠精原干细胞(SSCs)的形态学鉴定 | 第32页 |
·碱性磷酸酶(AKP)染色 | 第32页 |
·Beta-actin 和 N9113 基因RNA 分离提取和RT-PCR | 第32-33页 |
·引物设计 | 第33-34页 |
·PCR 扩增 | 第34页 |
·试验结果与分析 | 第34-35页 |
·形态学鉴定 | 第34页 |
·碱性磷酸酶(AKP)染色结果 | 第34-35页 |
·讨论 | 第35页 |
·小结 | 第35-36页 |
第四章 小鼠精原干细胞体外培养研究 | 第36-46页 |
·试验材料 | 第36-38页 |
·试验动物及处理 | 第36页 |
·试验试剂 | 第36页 |
·设备与器械 | 第36-37页 |
·试剂配制 | 第37页 |
·小鼠睾丸液的制备 | 第37-38页 |
·试验方法 | 第38-39页 |
·基础培养液 | 第38页 |
·培养液Ⅰ | 第38页 |
·培养液Ⅱ | 第38页 |
·试验处理方式 | 第38-39页 |
·统计分析 | 第39页 |
·试验结果与分析 | 第39-43页 |
·单因子培养对精原干细胞的增殖作用 | 第39页 |
·双因子配伍培养对精原干细胞的增殖作用 | 第39-40页 |
·三因子配伍培养对精原干细胞的增殖作用 | 第40-42页 |
·睾丸液对小鼠精原干细胞增殖的影响 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-45页 |
·小结 | 第45-46页 |
第五章 小鼠精原干细胞冷冻研究 | 第46-58页 |
·试验材料 | 第46-47页 |
·试验动物及处理 | 第46页 |
·试验试剂 | 第46页 |
·设备与器械 | 第46页 |
·试剂配制 | 第46页 |
·LDL 的制备 | 第46-47页 |
·LDL 溶液的配制 | 第47页 |
·卵磷脂溶液的配制 | 第47页 |
·海藻糖溶液的配制 | 第47页 |
·试验方法 | 第47-48页 |
·冷冻保护剂 | 第47-48页 |
·精原干细胞的冷冻方法 | 第48页 |
·统计分析 | 第48-49页 |
·试验结果与分析 | 第49-55页 |
·不同冷冻保护剂对小鼠精原干细胞冷冻复苏率的影响 | 第49-51页 |
·不同冷冻保护剂配伍对小鼠精原干细胞冷冻复苏率的影响 | 第51-55页 |
·讨论 | 第55-57页 |
·小结 | 第57-58页 |
结论与创新点 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
作者简介 | 第70页 |