| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 文献综述 | 第12-25页 |
| 第一章 小鼠精原干细胞与支持细胞研究进展 | 第12-25页 |
| ·小鼠精原干细胞的研究进展 | 第12-21页 |
| ·小鼠精原干细胞的发生 | 第12-13页 |
| ·小鼠精原细胞的类型 | 第13页 |
| ·小鼠精原干细胞的生物学特性 | 第13-14页 |
| ·小鼠精原干细胞的生理学特性 | 第14页 |
| ·小鼠精原干细胞的形态学特征 | 第14-15页 |
| ·小鼠精原干细胞的分离与纯化 | 第15-17页 |
| ·小鼠精原干细胞的鉴定、培养、诱导与冷冻保存 | 第17-21页 |
| ·饲养层支持细胞的研究进展 | 第21-23页 |
| ·小鼠睾丸支持细胞的生物学特性 | 第21页 |
| ·小鼠饲养层支持细胞的功能 | 第21-22页 |
| ·小鼠睾丸支持细胞与精原干细胞的关系 | 第22页 |
| ·小鼠睾丸支持细胞的分离 | 第22页 |
| ·小鼠睾丸支持细胞的鉴定 | 第22-23页 |
| ·小鼠睾丸支持细胞的体外培养 | 第23页 |
| ·促生长因子对精原干细胞增殖作用的影响 | 第23-24页 |
| ·LIF 对精原干细胞体外增殖作用的影响 | 第23页 |
| ·GDNF 对小鼠精原干细胞体外增殖作用的影响 | 第23-24页 |
| ·小鼠精原干细胞体外培养研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| 试验研究 | 第25-58页 |
| 第二章 小鼠精原干细胞的分离与纯化研究 | 第25-31页 |
| ·试验材料 | 第25-26页 |
| ·试验动物及处理 | 第25页 |
| ·试验试剂 | 第25页 |
| ·设备与器械 | 第25-26页 |
| ·试剂配制 | 第26页 |
| ·试验方法 | 第26-28页 |
| ·小鼠睾丸单细胞悬液的制备 | 第26-27页 |
| ·台盼蓝拒染法检测细胞活率 | 第27页 |
| ·四次反复差速贴壁法分离纯化精原干细胞 | 第27-28页 |
| ·试验结果与分析 | 第28-29页 |
| ·形态学观察 | 第28页 |
| ·台盼蓝染色 | 第28页 |
| ·碱性磷酸酶(AKP)染色 | 第28-29页 |
| ·讨论 | 第29-30页 |
| ·两步酶消化法获取睾丸单细胞悬液 | 第29页 |
| ·精原干细胞常用的分离纯化方法 | 第29-30页 |
| ·小结 | 第30-31页 |
| 第三章 小鼠精原干细胞的鉴定研究 | 第31-36页 |
| ·试验材料 | 第31-32页 |
| ·试验动物及处理 | 第31页 |
| ·试验试剂 | 第31页 |
| ·设备与器械 | 第31页 |
| ·试剂配制 | 第31-32页 |
| ·试验方法 | 第32-34页 |
| ·小鼠睾丸单细胞悬液的制备 | 第32页 |
| ·小鼠睾丸支持细胞的制备 | 第32页 |
| ·四次反复差速贴壁分离纯化小鼠精原干细胞 | 第32页 |
| ·小鼠精原干细胞(SSCs)的形态学鉴定 | 第32页 |
| ·碱性磷酸酶(AKP)染色 | 第32页 |
| ·Beta-actin 和 N9113 基因RNA 分离提取和RT-PCR | 第32-33页 |
| ·引物设计 | 第33-34页 |
| ·PCR 扩增 | 第34页 |
| ·试验结果与分析 | 第34-35页 |
| ·形态学鉴定 | 第34页 |
| ·碱性磷酸酶(AKP)染色结果 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35页 |
| ·小结 | 第35-36页 |
| 第四章 小鼠精原干细胞体外培养研究 | 第36-46页 |
| ·试验材料 | 第36-38页 |
| ·试验动物及处理 | 第36页 |
| ·试验试剂 | 第36页 |
| ·设备与器械 | 第36-37页 |
| ·试剂配制 | 第37页 |
| ·小鼠睾丸液的制备 | 第37-38页 |
| ·试验方法 | 第38-39页 |
| ·基础培养液 | 第38页 |
| ·培养液Ⅰ | 第38页 |
| ·培养液Ⅱ | 第38页 |
| ·试验处理方式 | 第38-39页 |
| ·统计分析 | 第39页 |
| ·试验结果与分析 | 第39-43页 |
| ·单因子培养对精原干细胞的增殖作用 | 第39页 |
| ·双因子配伍培养对精原干细胞的增殖作用 | 第39-40页 |
| ·三因子配伍培养对精原干细胞的增殖作用 | 第40-42页 |
| ·睾丸液对小鼠精原干细胞增殖的影响 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 第五章 小鼠精原干细胞冷冻研究 | 第46-58页 |
| ·试验材料 | 第46-47页 |
| ·试验动物及处理 | 第46页 |
| ·试验试剂 | 第46页 |
| ·设备与器械 | 第46页 |
| ·试剂配制 | 第46页 |
| ·LDL 的制备 | 第46-47页 |
| ·LDL 溶液的配制 | 第47页 |
| ·卵磷脂溶液的配制 | 第47页 |
| ·海藻糖溶液的配制 | 第47页 |
| ·试验方法 | 第47-48页 |
| ·冷冻保护剂 | 第47-48页 |
| ·精原干细胞的冷冻方法 | 第48页 |
| ·统计分析 | 第48-49页 |
| ·试验结果与分析 | 第49-55页 |
| ·不同冷冻保护剂对小鼠精原干细胞冷冻复苏率的影响 | 第49-51页 |
| ·不同冷冻保护剂配伍对小鼠精原干细胞冷冻复苏率的影响 | 第51-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 结论与创新点 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 作者简介 | 第70页 |