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基于EST数据库和转录组测序的茶树DNA分子标记开发与应用研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
英文缩略表第13-14页
第一章 序言第14-32页
   ·表达序列标签(ESTs)概述第14-16页
     ·EST 序列的获取第14-15页
     ·Unigene 数据库第15页
     ·EST 序列的提交第15-16页
     ·ESTs 研究的存在的问题与展望第16页
   ·基于新一代高通量测序技术的转录组测序(RNA-seq)第16-20页
     ·新一代高通量测序技术第16-18页
     ·转录组测序(RNA-seq)第18-19页
     ·基因表达系列标签(Serial analysis of gene expression,SAGE)第19-20页
   ·SSR 分子标记研究进展第20-25页
     ·基于文库构建的 SSR 分子标记的开发第20-22页
     ·基于 EST 数据的 SSR 分子标记的开发第22-24页
     ·SSR 引物的可转移性第24-25页
     ·SSR 标记的应用第25页
   ·SNP 分子标记的研究进展第25-29页
     ·SNP 分子标记的概述第25-26页
     ·SNP 位点的发现第26页
     ·SNP 分型方法第26-29页
     ·SNP 标记在林木研究中的应用第29页
   ·茶树 SSR 和 SNP 分子标记开发研究进展第29-30页
   ·立题意义与技术路线第30-32页
     ·立题意义第30页
     ·研究内容第30-31页
     ·技术路线第31-32页
第二章 茶树 EST 聚类及 Unigene 数据库构建第32-39页
   ·材料与方法第32-34页
     ·序列来源及下载第32-33页
     ·序列格式转换第33页
     ·EST 序列预处理第33页
     ·茶树EST 聚类第33-34页
     ·茶树Unigene 数据库构建第34页
   ·结果与分析第34-37页
     ·茶树表达序列标签(ESTs)数据第34-36页
     ·EST 预处理结果第36页
     ·EST 聚类拼接第36-37页
     ·茶树 Unigene 数据库构建第37页
   ·讨论第37-39页
     ·公共茶树 EST 数据的冗余性第37-38页
     ·茶树 Unigene 数据库第38-39页
第三章 茶树 EST-SSRs 分布特征及标记开发第39-45页
   ·材料与方法第39-41页
     ·EST-SSRs 的搜索第39页
     ·EST-SSRs 的引物设计第39-40页
     ·试验材料第40页
     ·EST-SSR 引物的初步筛选第40页
     ·DNA 提取和检测第40页
     ·SSR 扩增和电泳第40-41页
     ·数据处理第41页
   ·结果和分析第41-44页
     ·软件 SSRIT 对茶树 Unigene 序列的 SSR 搜寻结果第41-42页
     ·茶树 EST-SSRs 的分布特征第42-43页
     ·茶树 EST-SSR 引物的筛选第43-44页
   ·讨论第44-45页
第四章 基于 SSR 分子标记的茶树地方品种遗传多样性取样策略研究第45-52页
   ·材料与方法第46-47页
     ·试验材料第46页
     ·DNA 的提取第46页
     ·SSR 引物的来源第46页
     ·PCR 扩增和产物检测第46页
     ·数据处理第46-47页
   ·结果与分析第47-50页
     ·样本量对茶树地方品种遗传多样性参数值估算的影响第47-48页
     ·SSR 引物的等位基因数差异对遗传多样性参数值估算的影响第48-49页
     ·遗传多样性参数和SSR 引物等位基因数对达到90%总体遗传多样性所需样本量的影响第49-50页
   ·讨论第50-52页
     ·样本量对茶树地方品种遗传多样性参数值估算的影响第50页
     ·SSR 引物的等位基因数差异对遗传多样性参数值估算的影响第50页
     ·遗传多样性参数和SSR 引物等位基因数对达到90%总体遗传多样性所需样本量的影响第50-52页
第五章 基于 SSR 分子标记的龙井群体种遗传多样性及遗传分化研究第52-61页
   ·材料与方法第52-56页
     ·材料第52-56页
     ·DNA 的提取第56页
     ·SSR 引物来源第56页
     ·PCR 扩增和产物检测第56页
     ·数据处理第56页
   ·结果与分析第56-60页
     ·遗传多样性分析第56-58页
     ·龙井群体种的哈迪-温伯格平衡检验第58页
     ·龙井群体种的遗传分化研究第58-60页
   ·讨论第60-61页
第六章 茶树 EST-SNP 分布特征及标记开发第61-68页
   ·材料与方法第61-63页
     ·材料第61页
     ·DNA 的提取第61页
     ·EST 序列来源及处理第61-62页
     ·EST-SNP 位点搜索第62页
     ·PCR 扩增及检测第62页
     ·PCR 产物的切胶纯化第62-63页
     ·EST-SNP 位点的分型检测第63页
     ·DNA 测序结果分析第63页
   ·结果和分析第63-66页
     ·茶树 EST-SNP 分布特征第63-64页
     ·EST-SNP 位点的PCR 引物设计第64-65页
     ·EST-SNP 引物的筛选第65页
     ·EST-SNP 位点的验证第65-66页
   ·讨论第66-68页
     ·茶树 EST-SNP 出现的频率及突变类型第66-67页
     ·茶树基因组DNA 的杂合率的推算第67页
     ·茶树EST-SNP 的分型第67-68页
第七章 茶树花的转录组测序及基于 Perl 语言的 SSR 引物开发第68-96页
   ·材料与方法第68-72页
     ·材料及处理第68页
     ·总RNA 提取及检测第68页
     ·mRNA 的分离第68-69页
     ·转录组测序第69页
     ·序列拼接第69-70页
     ·基因表达量计算方法第70页
     ·功能注释、分类和代谢途径分析第70-72页
     ·预测编码蛋白框第72页
     ·基于perl 语言的简单重复序列分析(SSR) 搜索第72页
     ·基于perl 的SSR 引物设计第72页
   ·结果和分析第72-93页
     ·RNA 提取及检测第72-73页
     ·转录组测序产量及组装第73-77页
     ·茶树花转录组的基因表达量分布第77-78页
     ·茶树花转录组的功能注释第78-80页
     ·茶树花转录组的 GO 分类第80-81页
     ·茶树花转录组的 COG 分类第81-82页
     ·茶树花转录组的代谢通路分析第82-88页
     ·预测编码蛋白框(Coding sequence, CDS)第88-90页
     ·茶树花转录组序列中SSR 分布特征第90-93页
     ·SSR 引物批量设计第93页
   ·讨论第93-96页
     ·茶树花转录组测序及功能注释第93-94页
     ·茶树花转录组中 SSR 位点的分布特征第94-95页
     ·基于 Perl 语言的 SSR 位点批量挖掘第95-96页
第八章 全文结论与展望第96-98页
参考文献第98-112页
致谢第112-113页
作者简历第113-114页
在读期间发表的主要学术论文第114页

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