摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
缩略词(ABBREVIATION) | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-20页 |
1 副猪嗜血杆菌研究进展 | 第10-14页 |
2 体内诱导抗原技术(IVIAT)的原理与应用进展 | 第14-20页 |
·体内诱导抗原技术(IVIAT)的基本原理 | 第15-16页 |
·血清探针的制备 | 第16页 |
·病原体基因组表达文库的构建 | 第16-17页 |
·表达文库免疫筛选 | 第17页 |
·IVIAT的应用 | 第17-18页 |
·IVIAT的优点与不足 | 第18-19页 |
·展望 | 第19-20页 |
第二章 研究目的和意义 | 第20-21页 |
第三章 原核表达文库的构建和体内表达抗原的筛选 | 第21-46页 |
1 材料 | 第21-26页 |
·实验材料 | 第21页 |
·主要试剂和材料 | 第21-22页 |
·主要溶液 | 第22-26页 |
2 实验仪器设备 | 第26页 |
3 方法 | 第26-35页 |
·细菌染色体DNA的大量制备 | 第26-27页 |
·副猪嗜血杆菌基因组DNA的酶切和纯化 | 第27-28页 |
·表达载体的大量提取 | 第28页 |
·表达载体的酶切和回收 | 第28-29页 |
·质粒构建 | 第29页 |
·转化实验 | 第29-30页 |
·质粒的小量提取 | 第30-31页 |
·文库的大量提取 | 第31-32页 |
·收集康复血清 | 第32页 |
·处理血清 | 第32-33页 |
·ELISA检测血清吸附效果 | 第33-34页 |
·初筛 | 第34页 |
·复筛 | 第34-35页 |
·阳性克隆重组质粒的测序和分析 | 第35页 |
4 结果与分析 | 第35-43页 |
·基因组酶切结果 | 第35-36页 |
·文库载体的制备 | 第36-37页 |
·质粒的酶切鉴定 | 第37-38页 |
·文库的大量制备 | 第38页 |
·攻毒猪抗体水平的测定 | 第38-39页 |
·血清吸附效果检测 | 第39-40页 |
·文库的筛选及鉴定 | 第40-41页 |
·阳性克隆的测序和分析 | 第41-43页 |
5 讨论 | 第43-46页 |
第四章 副猪嗜血杆菌真核表达文库的构建 | 第46-50页 |
1 材料 | 第46页 |
2 方法 | 第46-47页 |
3 结果与分析 | 第47-49页 |
·真核表达载体酶切回收 | 第47页 |
·基因组酶切回收 | 第47页 |
·真核文库质粒提取 | 第47-49页 |
4 讨论 | 第49-50页 |
第五章 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
致谢 | 第57页 |