| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-28页 |
| ·牛结核病的危害 | 第11-13页 |
| ·牛结核病的病原学 | 第13-14页 |
| ·牛结核病的流行病学 | 第14-15页 |
| ·牛分枝杆菌免疫与致病机理 | 第15-16页 |
| ·机体抗牛分枝杆菌感染的防御机理 | 第16-17页 |
| ·牛结核病的诊断 | 第17-24页 |
| ·牛结核病诊断抗原的研究 | 第17-19页 |
| ·牛结核病诊断方法的研究 | 第19-24页 |
| ·结核杆菌体内表达基因的筛选 | 第24-28页 |
| ·原理 | 第25-28页 |
| ·体内诱导抗原的优点和缺点 | 第28页 |
| ·展望 | 第28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-47页 |
| ·样本采集与牛结核病病原学调查 | 第28-30页 |
| ·ELISA抗体检测 | 第29页 |
| ·IFN-γ体外释放实验 | 第29页 |
| ·细菌培养 | 第29-30页 |
| ·试验材料 | 第30-36页 |
| ·文库及菌株 | 第30页 |
| ·血清 | 第30页 |
| ·主要试剂及材料 | 第30-35页 |
| ·质粒抽提与鉴定试剂的配制 | 第30-31页 |
| ·筛选所用试剂及配制 | 第31-35页 |
| ·寡核苷酸引物 | 第35-36页 |
| ·结核分枝杆菌的临床分离及分型鉴定 | 第36-38页 |
| ·标本采集 | 第36页 |
| ·标本的前处理 | 第36-37页 |
| ·接种方法及结果判定 | 第37页 |
| ·结核分枝杆菌的纯化培养 | 第37页 |
| ·结核分枝杆菌的保存 | 第37页 |
| ·分枝杆菌菌种的生化鉴定 | 第37-38页 |
| ·PCR菌株分型 | 第38页 |
| ·结核分枝杆菌基因组表达文库的构建 | 第38-44页 |
| ·结核分枝杆菌H37Rv的培养及基因组DNA的提取 | 第39页 |
| ·结核杆菌DNA的酶切及纯化 | 第39-40页 |
| ·质粒的制备 | 第40-42页 |
| ·表达载体pET30a、pET30b和pET30c的酶切及去磷酸化 | 第42-43页 |
| ·目的基因与表达载体的连接 | 第43页 |
| ·感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第43页 |
| ·质粒的转化 | 第43-44页 |
| ·文库鉴定与保存 | 第44页 |
| ·表达文库的筛选 | 第44-47页 |
| ·制备用于筛选的血清 | 第44-45页 |
| ·文库的筛选 | 第45-47页 |
| ·阳性克隆重组质粒的测序及分析 | 第47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-52页 |
| ·结核分枝杆菌的临床分离及分型鉴定结果 | 第47-51页 |
| ·结核分枝杆菌的临床分离 | 第47-48页 |
| ·牛分离菌株的分型鉴定 | 第48-49页 |
| ·牛源人型结核菌牛群的流行病学调查 | 第49页 |
| ·阳性牛扑杀结果 | 第49-51页 |
| ·医院临床分离菌株的分型鉴定结果 | 第51页 |
| ·结核分枝杆菌体内诱导抗原筛选结果 | 第51-52页 |
| ·血清吸附效果检测 | 第51-52页 |
| ·H37Rv基因组表达文库筛选及鉴定 | 第52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| ·结核分枝杆菌的临床分离及分型鉴定结果 | 第52-53页 |
| ·结核分枝杆菌的临床分离 | 第52页 |
| ·牛分离菌株的分型鉴定 | 第52-53页 |
| ·医院临床分离菌株的分型鉴定结果 | 第53页 |
| ·H37Rv基因组表达文库筛选 | 第53-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 附录 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |