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猪瘟细胞苗生产工艺的优化及ELISA法在抗原定量测定中的应用

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
符号说明第11-12页
第1章 绪论第12-24页
   ·猪瘟及病毒概述第12-13页
   ·CSFV 与宿主细胞的相互作用及其致病机制第13-14页
   ·猪瘟病毒、体外细胞的相互关系第14-15页
     ·猪瘟病毒在体外细胞培养物中的增殖方式第14-15页
     ·CSFV 弱毒株在犊牛睾丸细胞的增殖第15页
   ·猪瘟诊断方法的研究现状第15-19页
     ·病原学检测第15-18页
     ·抗体诊断方法第18页
     ·国内外抗原抗体兼用的检测方法第18-19页
   ·猪瘟疫苗的研究进展第19-21页
     ·传统疫苗第19-20页
     ·新型疫苗第20-21页
   ·我国传统疫苗以及现行工艺存在的问题第21-23页
     ·猪瘟兔化弱毒疫苗第21-22页
     ·我国的猪瘟免化弱毒疫苗的生产工艺在不断改进和提高第22页
     ·我现阶段猪瘟疫苗的质量及使免疫过程中存在的主要问题第22-23页
   ·本研究的目的和意义第23-24页
第2章 CSFV 在犊牛睾丸细胞中增殖规律的研究第24-36页
   ·材料第24-27页
     ·菌种第24页
     ·细胞、血清第24页
     ·7.5 % NaHC0_3 溶液第24页
     ·0.01mol/LpH7.4 的PBS 缓冲液的配制第24-25页
     ·3%谷氨酰胺第25页
     ·1%酚红溶液第25页
     ·常用细胞营养液第25-26页
     ·猪瘟细胞苗生产中0.5%乳汉液的配制第26页
     ·仪器:磁力搅拌器:型号HS-2 富华仪器有限公司第26-27页
   ·方法第27-29页
     ·特定环境下犊牛睾丸细胞的增殖培养第27页
     ·带毒的犊牛睾丸细胞的增殖培养第27-28页
     ·不同细胞密度下,最佳接毒量的筛选第28页
     ·最佳接毒方式的筛选第28-29页
     ·正常CSFV 病毒的增殖培养第29页
   ·结果第29-34页
     ·犊牛睾丸细胞增殖曲线的建立第29-30页
     ·带毒睾丸细胞增殖曲线的建立第30-31页
     ·不同细胞密度下,最优化接毒量的筛选结果第31-32页
     ·最佳接毒方式的确定第32-33页
     ·正常病毒增殖曲线的建立第33-34页
   ·分析与讨论第34-36页
第3章 猪瘟兔化弱毒细胞苗生产工艺的优化第36-49页
   ·材料(同第二章)第36页
     ·菌种第36页
     ·细胞第36页
     ·试剂及仪器(同第二章)第36页
   ·方法第36-40页
     ·种毒的繁殖第36-37页
     ·制苗用原代细胞的制备第37页
     ·次代细胞制备第37-38页
     ·犊牛睾丸细胞的CSFV 感染第38-39页
     ·病毒液的收获第39页
     ·调节病毒增殖的维持液第39页
     ·犊牛睾丸细胞的带毒传代第39页
     ·半成品检验第39-40页
   ·结果第40-46页
     ·种毒的繁殖及检验第40-42页
       ·生产种毒的繁殖第40-41页
       ·生产种毒热型判断记录第41页
       ·家兔的感染性、外源病毒检验、免疫原性、安全性、特异性检验、无菌 检验、支原体检验第41-42页
     ·原代细胞制备的计数第42-43页
     ·外源病毒检测第43页
     ·不同接毒方法对睾丸细胞及病毒的影响第43-44页
     ·改变细胞培养维持液液量和收获时间对病毒含量的影响第44-45页
     ·原代犊牛睾丸细胞带毒传代后的产毒结果第45-46页
   ·分析与讨论第46-47页
   ·小结与展望第47-49页
第4章 ELISA 法在 CSFV 抗原定量测定中的应用第49-61页
   ·材料第49-52页
     ·抗原检测试剂盒第49页
     ·待检CSFV 抗原第49-51页
     ·特异性检验牛病毒性腹泻病毒(BVDV)标准种毒第51页
     ·主要试验仪器第51-52页
   ·方法第52-53页
     ·CSFV 抗原传统检验方法(兔体定型热反应检测)第52页
     ·CSFV 抗原检测试剂盒方法第52-53页
   ·结果第53-59页
     ·试剂盒应用于HCLV 半成品细胞苗的检测第53-56页
     ·试剂盒在成品 HCLV 疫苗的检测中的应用第56-58页
     ·CSFV 抗原检测试剂盒的特异性检验第58-59页
   ·分析与讨论第59-61页
参考文献第61-66页
致谢第66-67页
在学期间主要科研成果第67页

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