| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-13页 |
| 第一章 血管内皮的体外培养及其特征 | 第13-22页 |
| ·血管内皮细胞的结构与功能 | 第13-15页 |
| ·血管内皮细胞的结构 | 第13页 |
| ·内皮细胞的表面抗原 | 第13页 |
| ·血管内皮细胞的功能 | 第13-15页 |
| ·血管内皮的培养 | 第15-22页 |
| ·血管内皮细胞培养的发展简况 | 第15-16页 |
| ·血管内皮细胞体外培养的应用 | 第16页 |
| ·体外培养内皮细胞的来源 | 第16页 |
| ·血管内皮细胞培养的特性 | 第16-19页 |
| ·体外培养内皮细胞的培养条件 | 第19-22页 |
| 第二章 端粒、端粒酶与细胞永生化 | 第22-40页 |
| ·端粒与细胞的衰老和危机 | 第22-25页 |
| ·衰老 | 第22页 |
| ·危机 | 第22页 |
| ·端粒 | 第22-25页 |
| ·细胞的永生化 | 第25-31页 |
| ·促使细胞永生化的方法 | 第25-27页 |
| ·永生化的分子学机制 | 第27-30页 |
| ·应用前景 | 第30页 |
| ·基因转染 | 第30-31页 |
| ·局限性 | 第31页 |
| ·端粒酶与细胞永生化 | 第31-38页 |
| ·端粒酶的发现和组成 | 第31页 |
| ·端粒酶的结构和功能 | 第31-36页 |
| ·端粒酶在细胞用生化中的应用 | 第36-38页 |
| ·展望 | 第38-40页 |
| 第三章 猪脐静脉血管内皮细胞的培养及生长特性的鉴定 | 第40-50页 |
| ·材料 | 第40-42页 |
| ·新鲜猪脐带 | 第40页 |
| ·培养基 | 第40页 |
| ·血清 | 第40页 |
| ·羊下丘脑粗提物的制备 | 第40-41页 |
| ·肝素 | 第41页 |
| ·3%谷氨酰胺 | 第41页 |
| ·抗生素 | 第41页 |
| ·缓冲液 | 第41页 |
| ·消化液 | 第41-42页 |
| ·间接免疫荧光试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器设备 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-44页 |
| ·培养液的准备 | 第42-43页 |
| ·猪脐静脉血管内皮细胞的分离 | 第43页 |
| ·脐静脉血管内皮细胞的原代培养 | 第43页 |
| ·血管内皮细胞的传代培养 | 第43页 |
| ·血管内皮细胞的纯化 | 第43页 |
| ·血管内皮细胞生长曲线的测定 | 第43-44页 |
| ·血管内皮细胞的鉴定 | 第44页 |
| ·结果 | 第44-46页 |
| ·细胞形态和特征 | 第44页 |
| ·细胞生长曲线 | 第44页 |
| ·血管内皮细胞的鉴定结果 | 第44-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| ·小结 | 第48-50页 |
| 第四章 hTERT 基因转染猪血管内皮细胞 | 第50-63页 |
| ·材料 | 第50-51页 |
| ·菌株、细胞与质粒 | 第50页 |
| ·工具酶和试剂 | 第50-51页 |
| ·主要仪器与设备 | 第51页 |
| ·方法与步骤 | 第51-57页 |
| ·溶液配制 | 第51页 |
| ·质粒pCI-neo-hTERT 转化、扩增与鉴定 | 第51-53页 |
| ·pCI-neo-hTERT 质粒转染血管内皮细胞 | 第53-54页 |
| ·RT-PCR 检测转染细胞中外源性hTERT 的表达 | 第54-56页 |
| ·PCR-ELISA 法分析细胞端粒酶活性 | 第56-57页 |
| ·结果 | 第57-60页 |
| ·pCI-neo-hTERT 质粒扩增和酶切鉴定 | 第57页 |
| ·pCI-neo-hTERT 质粒纯度和浓度 | 第57页 |
| ·G418 对猪脐静脉血管内皮细胞最佳筛选浓度的确定 | 第57-58页 |
| ·转染后阳性细胞的获得 | 第58页 |
| ·转染细胞的hTERT 基因的RT-PCR 检测 | 第58-59页 |
| ·端粒酶活性检测 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| ·小结 | 第62-63页 |
| 第五章 转染后的血管内皮细胞生物学特征 | 第63-76页 |
| ·材料 | 第63页 |
| ·细胞株 | 第63页 |
| ·工具酶和试剂 | 第63页 |
| ·主要仪器与设备 | 第63页 |
| ·方法与步骤 | 第63-66页 |
| ·转染细胞的鉴定 | 第63-64页 |
| ·hTERT-SUVECs 细胞生长特性的检测 | 第64页 |
| ·细胞的转化特征 | 第64-66页 |
| ·结果 | 第66-72页 |
| ·形态学观察 | 第66-67页 |
| ·内皮细胞第Ⅷ因子相关抗原(F-ⅧRAg) 和CD34 因子鉴定 | 第67页 |
| ·生长曲线和群体倍增时间 | 第67-69页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第69-70页 |
| ·克隆形成能力 | 第70页 |
| ·细胞核型 | 第70页 |
| ·悬浮生长能力 | 第70-71页 |
| ·致瘤性 | 第71页 |
| ·血清依赖性 | 第71-72页 |
| ·接触抑制性 | 第72页 |
| ·讨论 | 第72-74页 |
| ·小结 | 第74-76页 |
| 第六章 永生化猪血管内皮细胞系的功能学特征 | 第76-82页 |
| ·材料 | 第76页 |
| ·主要试剂 | 第76页 |
| ·主要仪器设备 | 第76页 |
| ·方法与步骤 | 第76-78页 |
| ·ET-1 含量的测定 | 第76-77页 |
| ·PG12 含量的测定 | 第77页 |
| ·NO 含量的测定 | 第77页 |
| ·统计学处理 | 第77-78页 |
| ·结果 | 第78-79页 |
| ·ET-1 分泌量 | 第78页 |
| ·PG12 分泌量 | 第78页 |
| ·NO 分泌量 | 第78-79页 |
| ·讨论 | 第79-81页 |
| ·小结 | 第81-82页 |
| 结论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-97页 |
| 缩略词 | 第97-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 个人简介 | 第101页 |
