甘蓝型油菜水苏糖合成酶基因克隆及表达分析
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 引言 | 第8-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-22页 |
| ·种子的脱水耐性 | 第10页 |
| ·种子发育与脱水耐性的关系 | 第10-11页 |
| ·脱水胁迫下的保护机制 | 第11-15页 |
| ·脱水对细胞的伤害 | 第11页 |
| ·保护系统 | 第11-15页 |
| ·棉子糖系列寡糖及水苏糖合成酶研究进展 | 第15-20页 |
| ·种子中棉子糖系列寡糖的研究进展 | 第15-17页 |
| ·水苏糖合成酶的研究现状 | 第17-20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| ·技术路线 | 第21-22页 |
| 2 油菜水苏糖合成酶基因的克隆 | 第22-37页 |
| ·实验材料 | 第22-24页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·菌株和载体 | 第22页 |
| ·培养基和抗生素 | 第22-23页 |
| ·酶、分子量标准、试剂及试剂盒 | 第23页 |
| ·其它溶液配制 | 第23页 |
| ·仪器设备 | 第23页 |
| ·引物及测序服务 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-31页 |
| ·发育过程中的油菜种子总RNA提取 | 第24页 |
| ·油菜STS基因cDNA全长序列的克隆 | 第24-31页 |
| ·利用生物信息学软件进行相关分析 | 第31页 |
| ·结果与分析 | 第31-36页 |
| ·发育过程中的油菜种子总RNA提取 | 第31页 |
| ·油菜STS部分cDNA片段的获得 | 第31-32页 |
| ·油菜STS cDNA全长序列的克隆 | 第32-33页 |
| ·生物信息学分析 | 第33-36页 |
| ·小结 | 第36-37页 |
| 3 BnSTS基因的表达分析 | 第37-49页 |
| ·实验材料 | 第37-38页 |
| ·植物材料 | 第37页 |
| ·菌株和载体 | 第37页 |
| ·培养基和抗生素 | 第37页 |
| ·酶、分子量标准、试剂及试剂盒 | 第37页 |
| ·其它溶液配制 | 第37-38页 |
| ·仪器设备及耗材 | 第38页 |
| ·引物及测序服务 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-41页 |
| ·原核表达载体的构建及表达 | 第38-40页 |
| ·BnSTS基因在油菜种子发育过程中的表达量分析 | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-47页 |
| ·原核表达载体鉴定及表达 | 第41-43页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第43-44页 |
| ·BnSTS基因在油菜种子发育过程中的差异表达 | 第44-46页 |
| ·不同发育时期油菜种子中棉子糖系列寡糖含量 | 第46-47页 |
| ·小结 | 第47-49页 |
| 4 BnSTS真核表达载体的构建 | 第49-55页 |
| ·实验材料 | 第49-50页 |
| ·植物材料 | 第49页 |
| ·菌株和载体 | 第49页 |
| ·培养基和抗生素 | 第49-50页 |
| ·酶、分子量标准、试剂及试剂盒 | 第50页 |
| ·其它溶液配制 | 第50页 |
| ·仪器设备 | 第50页 |
| ·引物及测序服务 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-52页 |
| ·p-Napin-GUS质粒相关序列的验证 | 第50-51页 |
| ·BnSTS过表达及反义表达载体的构建 | 第51页 |
| ·转化农杆菌 | 第51-52页 |
| ·蘸花法侵染拟南芥 | 第52页 |
| ·结果与分析 | 第52-54页 |
| ·p-Napin-GUS质粒的验证 | 第52-53页 |
| ·BnSTS过表达及反义表达载体的构建 | 第53-54页 |
| ·转化农杆菌及蘸花法侵染拟南芥实验条件的初步探索 | 第54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 5 讨论 | 第55-60页 |
| ·BnSTS基因的克隆 | 第55-56页 |
| ·BnSTS基因的原核表达及目的蛋白的亲和纯化 | 第56-57页 |
| ·BnSTS基因在油菜种子发育过程中的差异表达 | 第57-58页 |
| ·BnSTS基因过表达及反义表达载体构建 | 第58-60页 |
| 6 结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 附录一 | 第67-70页 |
| 附录二 | 第70-71页 |
| 个人简介 | 第71-72页 |
| 导师简介 | 第72-73页 |
| 获得成果目录清单 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
