| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 1 引言 | 第9-19页 |
| ·植物端粒酶的研究进展 | 第9-14页 |
| ·端粒酶的发现 | 第9页 |
| ·端粒酶的作用机制 | 第9-10页 |
| ·端粒酶相关蛋白的研究 | 第10-13页 |
| ·端粒酶逆转录酶(TERT)的结构与功能 | 第13-14页 |
| ·端粒酶活性测定方法研究进展 | 第14-16页 |
| ·端粒重复序列延伸法 | 第14-15页 |
| ·TRAP法即端粒重复序列扩增法 | 第15-16页 |
| ·端粒酶对生长发育的调控作用 | 第16-17页 |
| ·端粒酶与DNA损伤修复关系 | 第17-18页 |
| ·本研究的目的意义 | 第18-19页 |
| 2 一种改进的TRAP法测定树木端粒酶活性 | 第19-28页 |
| ·实验材料 | 第19-20页 |
| ·仪器设备 | 第19页 |
| ·植物材料 | 第19-20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-22页 |
| ·端粒酶蛋白提取 | 第20页 |
| ·TRAP-PCR法测定端粒酶活性的参数优化 | 第20-21页 |
| ·TRAP-PCR扩增产物分析 | 第21-22页 |
| ·实验结果与分析 | 第22-26页 |
| ·改进的端粒酶提取方法的结果 | 第22页 |
| ·不同引物PCR的扩增结果 | 第22-23页 |
| ·不同PCR样品浓度的结果 | 第23-24页 |
| ·改进的凝胶染色结果 | 第24-26页 |
| ·讨论 | 第26-28页 |
| 3 不同树木的年龄与端粒酶活性的关系 | 第28-38页 |
| ·实验材料 | 第28-29页 |
| ·仪器设备 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28页 |
| ·植物材料 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-31页 |
| ·树木叶片端粒酶蛋白提取 | 第29页 |
| ·端粒酶蛋白提取液中蛋白含量的测定 | 第29-30页 |
| ·TRAP法测定不同年龄树木叶片端粒酶活性 | 第30-31页 |
| ·实验结果与分析 | 第31-36页 |
| ·标准曲线的制作 | 第31页 |
| ·油松树木年龄和端粒酶活性的关系 | 第31-32页 |
| ·银杏树木年龄和端粒酶活性的关系 | 第32-33页 |
| ·楸树树木年龄和端粒酶活性的关系 | 第33-34页 |
| ·国槐树木年龄和端粒酶活性的关系 | 第34-35页 |
| ·油松不同叶位和端粒酶活性的关系 | 第35页 |
| ·银杏不同叶位和端粒酶活性的关系 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-38页 |
| 4 非生物胁迫下树木不同组织端粒酶活性的变化 | 第38-54页 |
| ·实验材料 | 第38-39页 |
| ·仪器设备 | 第38页 |
| ·植物材料 | 第38页 |
| ·主要试剂 | 第38-39页 |
| ·实验方法 | 第39-43页 |
| ·胡杨愈伤组织在盐胁迫下检测端粒酶活性与PCD的关系 | 第39-41页 |
| ·沙冬青不同组织在盐胁迫下检测端粒酶活性与PCD的关系 | 第41-43页 |
| ·实验结果与分析 | 第43-53页 |
| ·胡杨愈伤组织在盐胁迫下检测端粒酶活性与PCD的关系 | 第43-48页 |
| ·沙冬青不同组织在盐胁迫下检测端粒酶活性与PCD的关系 | 第48-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| 5 沙冬青端粒酶逆转录酶基因(TERT)的克隆 | 第54-64页 |
| ·实验材料 | 第54-55页 |
| ·仪器设备 | 第54页 |
| ·植物材料、菌种及引物 | 第54-55页 |
| ·实验方法 | 第55-57页 |
| ·生物信息学分析 | 第55页 |
| ·沙冬青全基因组DNA提取 | 第55页 |
| ·目的基因PCR扩增参数的探索 | 第55-56页 |
| ·琼脂糖凝胶DNA回收 | 第56页 |
| ·目的基因再次PCR扩增 | 第56页 |
| ·扩增片段T-vector连接 | 第56-57页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第57页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第57页 |
| ·克隆载体的分子鉴定 | 第57页 |
| ·实验结果与分析 | 第57-63页 |
| ·生物信息学分析 | 第57-59页 |
| ·TERT目的条带扩增结果 | 第59-60页 |
| ·扩增所得片段与PMD-18T-vector连接转化结果 | 第60-61页 |
| ·克隆载体的分子鉴定 | 第61页 |
| ·克隆得到TERT部分片段的序列 | 第61-62页 |
| ·同源性分析 | 第62-63页 |
| ·讨论 | 第63-64页 |
| 6 总结与进一步研究设想 | 第64-65页 |
| ·总结 | 第64页 |
| ·进一步研究计划 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 个人简介 | 第71-73页 |
| 导师简介 | 第73-75页 |
| 致谢 | 第75页 |