中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
中文目录 | 第6-8页 |
英文目录 | 第8-10页 |
1 前言 | 第10-21页 |
·Argonaute蛋白家族 | 第10-14页 |
·Argonaute蛋白家族简介 | 第10-11页 |
·Ago2的发现 | 第11页 |
·Ago蛋白的结构 | 第11-14页 |
·Ago2与RNA干扰 | 第14-17页 |
·Ago2与siRNA | 第14-15页 |
·Ago2与miRNA(microRNA) | 第15-17页 |
·P-Body | 第17-21页 |
·P-Body的发现 | 第17页 |
·P-Body主要含有三种组分 | 第17-18页 |
·P-Body与mRNA降解 | 第18-21页 |
2 材料和方法 | 第21-34页 |
·常用药品和试剂 | 第21页 |
·DNA相关实验方法 | 第21-30页 |
·质粒载体 | 第21-22页 |
·大肠杆菌(Escherichia coli)感受态细胞的制备和DNA转化 | 第22-23页 |
·质粒DNA的提取 | 第23-25页 |
·质粒DNA的工具酶处理 | 第25页 |
·纯化DNA片段 | 第25-26页 |
·DNA连接反应 | 第26-27页 |
·PCR相关实验 | 第27页 |
·哺乳动物细胞表达质粒的构建 | 第27-30页 |
·细胞培养及转染 | 第30-32页 |
·细胞培养 | 第30页 |
·瞬时转染 | 第30-31页 |
·细胞免疫荧光染色 | 第31-32页 |
·蛋白质的SDS-PAGE电泳与Western blot分析 | 第32-34页 |
3 结果与讨论 | 第34-54页 |
·结果与分析 | 第34-52页 |
·GFP-DCP1拼接质粒的构建 | 第34-35页 |
·Ago2点突变体的构建 | 第35-40页 |
·Ago2单点突变子不影响Ago2定位于P-Body | 第40-45页 |
·不含752Ser的多点突变不影响Ago2在P-Body中的定位 | 第45-47页 |
·Aog2第725位Ser的突变对Ago2在P-Body的定位有明显影晌 | 第47-49页 |
·32Gly、128Phe、458Pro、752Ser的协同作用决定了Ago2的定位 | 第49-52页 |
·总结 | 第52-54页 |
附录:图表索引 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-58页 |
致谢 | 第58页 |