| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 第一部分 转高赖氨酸蛋白质基因(SB401)水稻T4后代分析 | 第12-45页 |
| Ⅰ 文献综述 | 第12-31页 |
| 1 稻米营养品质及其遗传改良现状概述 | 第12-14页 |
| ·稻米营养品质性状的组成 | 第12页 |
| ·蛋白质的种类及其含量 | 第12页 |
| ·蛋白质的氨基酸组成及其营养价值 | 第12-14页 |
| ·其它营养成分 | 第14页 |
| 2 传统育种方法对水稻营养品质改良的局限 | 第14-15页 |
| 3 基因工程对稻米品质的改良进展 | 第15-18页 |
| ·增加稻米中赖氨酸和蛋白质的含量 | 第15-17页 |
| ·增加稻米中维生素的含量和种类 | 第17页 |
| ·增加稻米中微量矿质营养元素铁的含量 | 第17页 |
| ·淀粉合成的调节 | 第17-18页 |
| 4 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第18-20页 |
| ·根瘤农杆菌简介 | 第18-19页 |
| ·T-DNA区(transferred-DNA regions) | 第19页 |
| ·Vir区(virulence region) | 第19页 |
| ·Con区(regions encoding conjugations) | 第19页 |
| ·Ori区(regions of replication) | 第19页 |
| ·农杆菌转化植物细胞的机理 | 第19-20页 |
| 5 T-DNA整合的机理及特征 | 第20-21页 |
| ·T-DNA的整合机理 | 第20-21页 |
| ·T-DNA整合位点及其特性 | 第21页 |
| ·T-DNA整合的复杂结构 | 第21页 |
| 6 外源目的基因的遗传学行为 | 第21-23页 |
| ·质粒DNA在转基因植株中的存在形式 | 第22页 |
| ·外源基因在转基因后代中的遗传行为 | 第22-23页 |
| 7 基因沉默与失活 | 第23-25页 |
| ·转录水平的基因沉默(Transcriptional Gene Silencing,TGS) | 第23-25页 |
| ·DNA甲基化修饰 | 第23-24页 |
| ·插入拷贝数 | 第24页 |
| ·反式失活 | 第24页 |
| ·插入位点效应 | 第24-25页 |
| ·后成修饰 | 第25页 |
| ·转录后水平的基因沉默(Post Transcriptional Gene Silencing,PTGS) | 第25页 |
| 8 获得基因侧翼序列位点信息的几种扩增方法 | 第25-29页 |
| ·质粒拯救(plasmid rescue)法 | 第26页 |
| ·反向PCR(inverse or invertedPCR,IPCR)法 | 第26-27页 |
| ·热不对称交错PCR(Thermal Asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR) | 第27-28页 |
| ·PCR-walking | 第28页 |
| ·Sequence-based分离法 | 第28页 |
| ·突变位点扩增法(Amplification of insertion mutagenised sites,AIMS) | 第28-29页 |
| ·连接介导PCR(Ligation—mediated PCR,LMPCR) | 第29页 |
| 9 立题思想 | 第29-31页 |
| Ⅱ 材料与方法 | 第31-39页 |
| 1 水稻及转化载体 | 第31页 |
| ·水稻转基因株系 | 第31页 |
| ·转化载体 | 第31页 |
| 2 实验方法 | 第31-39页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第31-32页 |
| ·水稻DNA的提取 | 第31-32页 |
| ·潮霉素抗性基因的检测 | 第32页 |
| ·转基因T4后代的Southern blotting分析 | 第32-35页 |
| ·大量法提取水稻基因组DNA | 第32-33页 |
| ·DNA限制性酶解 | 第33页 |
| ·凝胶电泳 | 第33页 |
| ·对电泳后凝胶的处理 | 第33页 |
| ·毛细管印迹 | 第33-34页 |
| ·预杂交 | 第34页 |
| ·标记探针 | 第34页 |
| ·杂交 | 第34-35页 |
| ·洗膜 | 第35页 |
| ·显影 | 第35页 |
| ·转基因植株T-DNA侧翼序列的TAIL-PCR分析 | 第35-38页 |
| ·扩增的特异引物与简并引物 | 第35-36页 |
| ·TAIL-PCR的反应体系及循环 | 第36-37页 |
| ·PCR产物的纯化回收 | 第37页 |
| ·PCR产物的克隆测序 | 第37-38页 |
| ·转基因植株各株系成熟种子总蛋白、氨基酸总量、赖氨酸含量的测定 | 第38-39页 |
| Ⅲ 结果与分析 | 第39-43页 |
| 1 各转基因株系的PCR检测 | 第39-40页 |
| 2 各转基因株系的SOUTHERN BLOTTING分析 | 第40页 |
| 3 转基因株系T-DNA侧翼序列分析 | 第40-41页 |
| 4 SB401基因在转基因株系成熟种子中的表达 | 第41-43页 |
| Ⅳ 讨论 | 第43-45页 |
| 第二部分 水稻极度分蘖基因EXT-M1B的遗传定位 | 第45-55页 |
| Ⅰ 文献综述 | 第45-49页 |
| 1 植物分枝的研究 | 第45-46页 |
| 2 水稻分蘖及其遗传研究进展 | 第46-48页 |
| ·水稻分蘖 | 第46-47页 |
| ·分蘖的遗传研究进展 | 第47-48页 |
| 3 立题思想 | 第48-49页 |
| Ⅱ 材料与方法 | 第49-51页 |
| 1 遗传学分析及定位群体材料 | 第49页 |
| 2 实验方法 | 第49-51页 |
| ·遗传学分析 | 第49页 |
| ·水稻叶片总DNA的提取(参见第一部分实验方法2.1.1) | 第49页 |
| ·连锁分析 | 第49-50页 |
| ·反应体系和反应程序 | 第49-50页 |
| ·琼脂糖电泳检测 | 第50页 |
| ·数据处理 | 第50-51页 |
| Ⅲ 结果与分析 | 第51-54页 |
| 1 突变体的来源及表型分析 | 第51页 |
| 2 EXT-M1B基因的遗传定位 | 第51-54页 |
| ·遗传分析 | 第51-52页 |
| ·连锁分析 | 第52-54页 |
| Ⅳ 讨论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 攻读学位期间发表的论文目录 | 第65页 |
