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转抗辐射总体调控基因irrE大肠杆菌的耐盐性及转录谱分析

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 绪论第13-34页
   ·耐辐射异常球菌研究进展第13-19页
     ·耐辐射异常球菌的分离和分类第13-16页
     ·耐辐射异常球菌的特性研究第16-18页
     ·耐辐射异常球菌的应用第18-19页
   ·耐辐射异常球菌全局性调控蛋白IRRE 的研究进展第19-25页
     ·IrrE 蛋白的晶体结构研究第19-21页
     ·耐辐射异常球菌irrE 是组成型表达第21-22页
     ·IrrE 对耐辐射异常球菌极端辐射抗性的贡献第22-25页
   ·细菌耐盐性的研究进展第25-32页
     ·功能蛋白在细菌耐盐性中的作用第25-29页
     ·转录因子在细菌耐盐性中的作用第29-30页
     ·利用转录谱研究细菌耐盐性第30-31页
     ·细菌耐盐基因在植物耐盐转基因的应用第31-32页
   ·立题依据第32-34页
第二章 IRRE 提高大肠杆菌的非生物胁迫抗性第34-54页
   ·材料与方法第34-43页
     ·试验菌株来源第34页
     ·培养基、酶类及主要生化试剂第34-35页
     ·菌株的培养条件第35页
     ·主要仪器第35页
     ·细胞的电镜观察第35页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化第35-36页
     ·基因组DNA、质粒DNA 的提取第36-37页
     ·PCR 及引物设计第37页
     ·PCR 反应体系及反应条件第37-39页
     ·DNA 片段的回收与纯化第39页
     ·DNA 片段的酶切反应第39页
     ·DNA 片段的连接第39-40页
     ·大肠杆菌对非生物胁迫的抗性分析第40-41页
     ·高盐胁迫下细胞的生长第41页
     ·盐胁迫下大肠杆菌细胞的电镜观察第41-42页
     ·M9 限制性培养基中细胞的生长第42页
     ·利用Biolog 平板分析菌体的代谢第42-43页
   ·结果第43-51页
     ·IrrE 表达载体的构建第43-44页
     ·IrrE 增强大肠杆菌对非生物逆境的耐受性第44-49页
     ·IrrE 促进大肠杆菌在限制性培养中生长第49页
     ·IrrE 对大肠杆菌代谢谱的影响第49-51页
   ·讨论第51-54页
     ·氧化胁迫和UV 辐射抗性第51页
     ·高温抗性第51页
     ·抗酸性第51-52页
     ·抗盐性第52-54页
第三章 转录谱研究IRRE 对大肠杆菌的全局调控作用第54-86页
   ·材料与方法第54-61页
     ·试验菌株来源第54页
     ·培养基及主要生化试剂第54-56页
     ·菌株的生长及处理第56页
     ·主要仪器第56页
     ·RNA 提取第56-57页
     ·RNA 的纯化第57-58页
     ·cDNA 的合成与纯化第58-59页
     ·cDNA 的片段化第59页
     ·cDNA 的末端标记第59-60页
     ·芯片杂交第60页
     ·洗脱芯片第60-61页
     ·扫描芯片第61页
   ·结果第61-81页
     ·菌体RNA 提取及纯化第61-62页
     ·反转录、片段化、探针标记第62页
     ·芯片杂交第62-63页
     ·芯片数据的收集第63页
     ·上调基因(包括小分子RNA)的功能及分类第63-73页
     ·下调基因(包括小分子RNA)的功能及分类第73-77页
     ·RpoS 依赖型基因的表达第77-80页
     ·海藻糖代谢途径相关基因的表达第80页
     ·谷氨酸型耐酸系统基因的表达第80-81页
   ·讨论第81-86页
     ·差异表达基因的功能分类第82页
     ·胁迫响应蛋白的转录表达第82-83页
     ·大肠杆菌海藻糖代谢途径第83页
     ·IrrE 对大肠杆菌耐酸性能的影响第83-84页
     ·IrrE 对大肠杆菌RpoS 依赖型基因的影响第84-86页
第四章 盐冲击下IRRE 对大肠杆菌全局调控的转录谱分析第86-126页
   ·材料与方法第86-87页
     ·试验菌株来源第86页
     ·培养基及主要生化试剂第86页
     ·菌株的生长及处理第86页
     ·主要仪器第86页
     ·RNA 提取第86页
     ·RNA 的纯化第86-87页
     ·DNA 的合成与纯化第87页
     ·cDNA 的片段化第87页
     ·cDNA 的末端标记第87页
     ·芯片杂交第87页
     ·洗脱芯片第87页
     ·扫描芯片第87页
   ·结果第87-122页
     ·菌体RNA 的纯化第87-88页
     ·反转录、片段化、探针标记第88页
     ·芯片杂交第88页
     ·芯片数据的收集及分析第88-89页
     ·盐冲击下差异表达上调基因及小分子RNA 的分类第89-111页
     ·盐冲击下差异表达下调基因及小分子RNA 的分类第111-119页
     ·高盐冲击对甘油有氧降解途径的抑制作用第119页
     ·IrrE 促进细胞积累海藻糖的作用第119-120页
     ·IrrE 对渗透保护物质转运系统的影响第120页
     ·IrrE 对甘氨酸甜菜碱合成的作用第120-121页
     ·IrrE 对嘌呤嘧啶合成基因的作用第121-122页
     ·IrrE 对鞭毛合成基因的作用第122页
   ·讨论第122-126页
     ·E. coli 的盐胁迫适应性反应第122-123页
     ·海藻糖降解相关基因表达的分析第123-124页
     ·甘油降解相关基因表达的分析第124页
     ·渗透保护物质转运及合成相关基因表达的分析第124-126页
第五章 结论第126-128页
参考文献第128-144页
致谢第144-145页

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