| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 英文缩略表 | 第9-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-22页 |
| ·流感病毒病原学 | 第12-13页 |
| ·分类与命名 | 第12-13页 |
| ·形态结构 | 第13页 |
| ·基因组编码的蛋白及功能 | 第13-15页 |
| ·流行病学 | 第15-19页 |
| ·猪流感 | 第15-18页 |
| ·其他流感 | 第18-19页 |
| ·流感疫苗研究进展 | 第19-20页 |
| ·反向遗传学 | 第20页 |
| ·本研究目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二章 H3N2 亚型重组猪流感病毒拯救体系的建立 | 第22-43页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·毒株和血清 | 第22页 |
| ·载体 | 第22页 |
| ·菌种 | 第22页 |
| ·细胞株 | 第22页 |
| ·鸡胚和实验动物 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22-23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·分子生物学分析软件 | 第23页 |
| ·试验方法 | 第23-37页 |
| ·引物的设计与合成 | 第23页 |
| ·感受态细胞制备 | 第23-25页 |
| ·流感病毒反向遗传操作技术路线 | 第25-34页 |
| ·细胞转染与病毒的拯救 | 第34-35页 |
| ·病毒鸡胚扩增及血凝试验 | 第35页 |
| ·拯救病毒rgH3N2 的电镜观察 | 第35页 |
| ·拯救病毒的序列验证 | 第35-36页 |
| ·病毒的稳定性试验 | 第36页 |
| ·鸡胚半数感染剂量(EID_(50))和组织培养半数感染剂量(TCID_(50)) 的测定 | 第36页 |
| ·病毒在MDCK细胞中增殖试验 | 第36-37页 |
| ·小鼠的致病性试验 | 第37页 |
| ·结果 | 第37-41页 |
| ·基因片段的扩增 | 第37-38页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第38页 |
| ·细胞转染与病毒的拯救 | 第38-39页 |
| ·病毒鸡胚扩增及血凝性试验 | 第39页 |
| ·拯救病毒的电镜观察 | 第39-40页 |
| ·拯救病毒的序列验证 | 第40页 |
| ·病毒的稳定性试验 | 第40页 |
| ·鸡胚半数感染剂量(EID_(50))和组织培养半数感染剂量(TCID_(50))的测定 | 第40页 |
| ·病毒在MDCK细胞中增殖试验 | 第40页 |
| ·小鼠的致病性试验 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 多亚型重组流感病毒的拯救 | 第43-54页 |
| ·实验材料 | 第43页 |
| ·病毒、血清和阳性质粒 | 第43页 |
| ·鸡胚株和细胞株 | 第43页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第43页 |
| ·试验方法 | 第43-49页 |
| ·引物的设计与合成 | 第43-46页 |
| ·转染用重组质粒的准备 | 第46-47页 |
| ·重组病毒的拯救 | 第47页 |
| ·血凝、血凝抑制试验 | 第47-48页 |
| ·重组病毒的稳定性试验 | 第48页 |
| ·鸡胚半数感染剂量(EID_(50))和组织培养半数感染剂量(TCID_(50))的测定 | 第48页 |
| ·重组病毒在MDCK细胞中增殖试验 | 第48页 |
| ·rgH3N8 对小鼠的致病性试验 | 第48-49页 |
| ·结果 | 第49-52页 |
| ·H3N8 亚型马流感基因片段的扩增 | 第49页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第49-50页 |
| ·重组病毒的拯救 | 第50页 |
| ·血凝、血凝抑制试验 | 第50页 |
| ·重组病毒的稳定性试验 | 第50页 |
| ·鸡胚半数感染剂量(EID_(50))和组织培养半数感染剂量(TCID_(50))的测定 | 第50页 |
| ·重组病毒在MDCK细胞中增殖试验 | 第50-51页 |
| ·rgH3N8 对小鼠的致病性试验 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| 第四章 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 附录 | 第60-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者简历 | 第69页 |
