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新型cry2基因克隆、表达及活性分析

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第一章 绪论第10-29页
   ·苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白第11-18页
     ·杀虫晶体蛋白的命名第11-16页
     ·杀虫晶体蛋白的结构第16-18页
   ·杀虫蛋白基因的鉴定方法第18-20页
   ·cry2 类杀虫蛋白基因介绍第20-21页
   ·Bt杀虫蛋白基因的应用第21-23页
   ·杀虫晶体蛋白的作用机制第23-24页
   ·昆虫对Bt抗性现状第24-25页
   ·目前Bt作物害虫抗性治理策略第25-28页
   ·本研究的立题依据和目的意义第28-29页
第二章 材料与方法第29-42页
   ·实验材料第29-32页
     ·菌株与质粒第29-30页
     ·试剂第30-31页
     ·仪器设备第31页
     ·供试昆虫第31-32页
   ·研究方法第32-42页
     ·菌株分离第32页
     ·菌株形态观察第32页
     ·Bt质粒提取第32-33页
     ·PCR-RFLP鉴定cry基因型第33-36页
     ·菌株中cry2 基因PCR-RFLP片段克隆第36页
     ·DNA回收第36页
     ·E. coli质粒提取第36-37页
     ·DNA片段常规连接体系第37页
     ·E. coli化学感受态细胞制备第37页
     ·E. coli的热激转化第37页
     ·SBT2 菌株中cry2Ad全长基因的扩增,克隆及序列测定第37-38页
     ·SC6H8 菌株中cry2Ax全长基因的扩增,克隆及序列测定第38页
     ·cry2Ax三维结构分析第38页
     ·利用重叠PCR获得cry2Ax突变体第38-39页
     ·新基因在大肠杆菌中表达第39-40页
     ·蛋白电泳检测第40页
     ·杀虫活性测定第40-42页
第三章 结果与讨论第42-58页
   ·结果与分析第42-56页
     ·SBT2 菌株生物学特性第42-43页
     ·SBT2 菌株中cry2Ad 全长基因的克隆和序列分析第43-44页
     ·SBT2 菌株中cry2Ad基因的异源表达第44-45页
     ·Cry2Ad杀虫生物活性测定第45页
     ·SC6H8 菌株生物学特性第45-47页
     ·SC6H8 菌株中新型cry2 类杀虫晶体蛋白基因的克隆与分析第47-50页
     ·cry2Axv354-sp和cry2Axv354-vp基因的克隆与分析第50页
     ·cry2Ax,cry2Axv354-sp和cry2Axv354-vp基因异源表达第50-52页
     ·cry2Ax,cry2Axv354-sp和cry2Axv354-vp表达产物杀虫活性的研究第52-56页
   ·讨论第56-58页
     ·野生菌株分析第56页
     ·新型cry2A基因克隆,表达及活性分析第56-57页
     ·Cry2Axv354-sp和Cry2Axv354-vp新基因克隆与表达第57-58页
第四章 全文主要结论第58-59页
参考文献第59-67页
致谢第67-68页
作者简历第68页

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