乙醇发酵相关基因在芽孢杆菌中的表达及分析
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 第1章 绪论 | 第8-24页 |
| ·研究背景 | 第8-9页 |
| ·国内外研究现状 | 第9-23页 |
| ·运动发酵单胞菌 | 第9-12页 |
| ·芽孢杆菌 | 第12-17页 |
| ·芽孢杆菌的转化方法概述 | 第17-19页 |
| ·细菌的乙醇发酵 | 第19-20页 |
| ·酒精生产菌类别 | 第20页 |
| ·乙醇脱氢酶的国内外研究现状 | 第20-23页 |
| ·课题来源及主要研究内容 | 第23-24页 |
| ·课题来源 | 第23页 |
| ·主要研究内容 | 第23-24页 |
| 第2章 材料与方法 | 第24-40页 |
| ·实验材料 | 第24-28页 |
| ·菌株和质粒 | 第24-25页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| ·酶与试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·常用试剂和缓冲液 | 第26-27页 |
| ·引物设计及相关软件 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-40页 |
| ·乙醇脱氢酶基因的PCR扩增 | 第28-32页 |
| ·重组质粒的构建及验证 | 第32-35页 |
| ·重组质粒转化芽孢杆菌 | 第35-37页 |
| ·质粒稳定性 | 第37-38页 |
| ·重组乙醇脱氢酶的酶学特性的研究 | 第38-40页 |
| 第3章 乙醇脱氢酶基因的获得及重组质粒的构建 | 第40-47页 |
| ·乙醇脱氢酶基因的PCR扩增 | 第40-41页 |
| ·运动发酵单胞菌基因组的提取 | 第40页 |
| ·乙醇脱氢酶基因的PCR扩增 | 第40-41页 |
| ·连接克隆载体、测序结果及分析 | 第41-44页 |
| ·重组质粒pMA5-adh的构建 | 第44-46页 |
| ·枯草芽孢杆菌B.168 质粒pMA5 的提取 | 第44页 |
| ·adh基因和pMA5 的双酶切及连接 | 第44-45页 |
| ·重组质粒pMA5-adh的验证 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46页 |
| ·本章小结 | 第46-47页 |
| 第4章 芽孢杆菌的转化及转化子酶活特性分析 | 第47-54页 |
| ·枯草芽孢杆菌的转化 | 第47-49页 |
| ·枯草芽孢杆菌对卡那霉素的敏感性分析 | 第47页 |
| ·枯草芽孢杆菌生长曲线的测定 | 第47-48页 |
| ·枯草芽孢杆菌的转化方法 | 第48-49页 |
| ·质粒稳定性 | 第49页 |
| ·乙醇脱氢酶酶学特性的研究 | 第49-52页 |
| ·培养时间对转化子产乙醇脱氢酶的影响 | 第49-50页 |
| ·重组乙醇脱氢酶的最适作用pH | 第50页 |
| ·重组乙醇脱氢酶的最适作用温度 | 第50-51页 |
| ·金属离子对重组乙醇脱氢酶的影响 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| ·质粒的稳定性 | 第52页 |
| ·转化方法 | 第52-53页 |
| ·本章小结 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第60-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
