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草鱼干扰素调节因子IRF-5和IRF-10以及趋化因子受体CXCR5克隆与表达

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-14页
第一章 文献综述第14-45页
 第一节 干扰素调节因子(IRF)功能及鱼类IRF研究进展第14-38页
  1 干扰素调节因子的结构特征及分类第14-16页
  2 干扰素调节因子在宿主免疫反应的作用第16-32页
   ·IRFs在细胞模式识别受体信号通路中调节Ⅰ型干扰素产生第17-20页
     ·IRF-1和IRF-2调节Ⅰ型干扰素的产生第17页
     ·IRF-3和IRF-7调节Ⅰ型干扰素的产生第17-19页
     ·IRF-5调节Ⅰ型干扰素的产生第19页
     ·IRF-8调节Ⅰ型干扰素的产生第19-20页
   ·IRFs在Toll样受体(TLR)信号通路中作用第20-24页
     ·IRF-3和IRF-7在MyD88和TRIF依赖型信号通路中作用第21-22页
     ·IRF-5在MyD88依赖型和TRIF依赖型信号通路中作用第22-23页
     ·IRF-1在TLR信号通路中作用第23页
     ·IRF-4和IRF-8在TLR信号通路中作用第23-24页
   ·IRFs对免疫细胞发育的调控第24-32页
     ·IRF-1、IRF-2、IRF-4、IRF-8调节DC细胞亚类的分化第24-26页
     ·IRFs调节骨髓巨噬细胞和骨髓粒细胞的发育和分化第26页
     ·IRF-1和IRF-2调节自然杀伤细胞发育第26-27页
     ·IRF-4和IRF-8调节B细胞和浆细胞发育第27-28页
     ·IRF调控T淋巴细胞的发育第28-30页
     ·IRF调节Th1/Th2的分化第30-32页
     ·IRF-6调节角质细胞的发育第32页
  3 干扰素调节因子抗肿瘤作用第32-35页
   ·IRF-1功能的缺失或IRF-2过度表达都可能导致肿瘤发生第33页
   ·IRF-3和1RF-7抗肿瘤作用第33-34页
   ·IRF-4和IRF-8的抗肿瘤作用第34页
   ·IRF-5的抗肿瘤作用第34-35页
   ·IRF-9抗肿瘤作用第35页
  4 鱼类干扰素调节因子研究进展第35-38页
   ·鱼类IRF-1的研究进展第35-36页
   ·鱼类IRF-2的研究进展第36-37页
   ·鱼类IRF-3的研究第37页
   ·鱼类IRF-6的研究进展第37页
   ·鱼类IRF-7的研究进展第37-38页
 第二节 CXC趋化因子及其受体研究概况第38-45页
  1 趋化因子及其受体特征第38-39页
   ·趋化因子第38页
   ·趋化因子受体第38-39页
  2 趋化因子及其受体生物学功能第39-43页
   ·调节淋巴细胞的生成、游走和归巢第39页
   ·调节抗原提呈与T、B细胞活化第39-40页
   ·调节T细胞极化第40-41页
   ·介导炎症反应第41页
   ·促进血管生成第41-42页
   ·对病毒感染的影响第42页
   ·肿瘤生长与转移第42页
   ·在中枢神经系统中作用第42-43页
  3 鱼类趋化因子受体研究进展第43-45页
第二章 干扰素调节因子10基因的克隆、表达第45-87页
 1 前言第45-46页
 2 材料与方法第46-65页
   ·试验材料第46-48页
     ·主要仪器第46-47页
     ·试剂盒与主要试剂第47-48页
     ·载体和菌株第48页
     ·试验鱼第48页
   ·RNA的提取第48-49页
   ·cDNA第一链的合成第49-50页
   ·RACE-PCR克隆IRF-10 cDNA全长第50-51页
   ·IRF-10基因全长cDNA的分析及系统进化树的构建第51-52页
   ·IRF-10基因组DNA全长的克隆第52-54页
   ·IRF-10启动子区域的获得第54-56页
   ·草鱼不同组织IRF-10的表达第56-57页
     ·RNA的提取第56页
     ·RNA样品中DNA的处理第56-57页
     ·cDNA模板的准备第57页
     ·β-actin基因和IRF-10基因的扩增第57页
   ·草鱼早期发育阶段IRF-10的表达第57-60页
     ·cDNA模板的制备第57-58页
     ·荧光定量PCR引物的检测第58页
     ·质粒标准样品的制备第58-59页
     ·稀释质粒第59页
     ·荧光定量PCR检测第59页
     ·数据分析第59-60页
   ·实时荧光定量PCR检测IRF-10的诱导表达变化第60页
   ·IRF-10原核表达第60-64页
     ·原核表达载体的构建第60-62页
     ·重组蛋白的诱导表达第62页
     ·变性条件下纯化目的蛋白第62-63页
     ·IRF-10蛋白兔多克隆抗体的制备第63-64页
   ·Western blot检测IRF-10蛋白水平的表达第64-65页
     ·组织蛋白的提取第64-65页
     ·免疫印迹分析第65页
 3 结果第65-82页
   ·IRF-10核酸序列及推导的氨基酸序列特征第65页
   ·IRF-10的系统进化分析第65-72页
   ·IRF-10的基因组结构和启动子分析第72-75页
   ·IRF-10在健康草鱼组织转录水平的表达第75-76页
   ·早期发育阶段IRF-10的表达第76-78页
   ·实时荧光定量PCR检测gcIRF10的诱导变化第78-80页
   ·IRF-10的原核表达第80-82页
   ·免疫印迹第82页
 4 讨论第82-87页
   ·IRF-10的分布第82-83页
   ·IRF-10的结构第83-85页
   ·IRF-10的表达第85-87页
第三章 干扰素调节因子5基因的克隆与表达第87-108页
 1 前言第87页
 2 材料与方法第87-89页
   ·试验材料第87页
   ·cDNA第一链的合成第87页
   ·RACE-PCR克隆IRF-5基因cDNA全长第87-88页
   ·IRF-5基因全长cDNA的分析及系统进化树的构建第88-89页
   ·基因组DNA全长的克隆第89页
   ·IRF-5基因在草鱼不同组织mRNA水平上的表达第89页
   ·草鱼早期发育阶段IRF-5转录水平的表达第89页
   ·实时荧光定量PCR检测IRF-5的诱导表达变化第89页
 3 结果第89-104页
   ·gcIRF5 cDNA全长及推导的氨基酸序列特征分析第89-90页
   ·gcIRF5的系统进化分析第90-98页
   ·IRF-5的基因组结构和启动子分析第98-100页
   ·gcIRF5在健康草鱼组织转录水平的表达第100-101页
   ·早期发育阶段IRF-5的表达第101-102页
   ·实时荧光定量PCR检测gclRF5的诱导表达变化第102-104页
 4 讨论第104-108页
   ·IRF-5结构及保守域第104-106页
   ·IR5的表达第106-108页
第四章 趋化因子受体CXCR5克隆以及表达研究第108-130页
 1 前言第108-109页
 2 材料与方法第109-115页
   ·试验材料第109页
   ·RNA的提取第109-110页
   ·cDNA第一链的合成第110-112页
   ·RACE-PCR克隆CXCR5基因全长cDNA第112-113页
   ·CXCR基因全长cDNA的分析及系统进化树的构建第113页
   ·CXCR5基因组DNA全长的克隆第113页
   ·健康草鱼不同组织CXCR5的表达第113页
   ·草鱼早期发育阶段CXCR5转录水平的表达第113-114页
   ·不同刺激物诱导草鱼后不同组织CXCR5的表达第114-115页
 3 结果第115-128页
   ·CXCR5核酸序列及推断的氨基酸特征第115-118页
   ·CXCR5的系统进化分析第118-122页
   ·CXCR5的基因组结构第122-123页
   ·早期发育阶段CXCR5的表达第123-125页
   ·CXCR5在健康草鱼组织转录水平的表达第125-126页
   ·实时荧光定量PCR检测CXCR5的诱导变化第126-128页
 4 讨论第128-130页
   ·CXCR5结构特征第128-129页
   ·CXCR5的表达第129-130页
参考文献第130-153页
附录第153-154页
致谢第154-156页

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