摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略语表 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-24页 |
1 红曲菌的分子生物学研究 | 第12-16页 |
·DNA分子标记方法在红曲菌分类中应用 | 第12-13页 |
·红曲菌基因文库的构建 | 第13页 |
·红曲菌遗传转化方法 | 第13-14页 |
·红曲菌功能基因的研究 | 第14-16页 |
2 TAIL-PCR与 SON-PCR | 第16-18页 |
·TAIL-PCR | 第16-17页 |
·SON-PCR | 第17-18页 |
3 基因敲除技术在丝状真菌中的应用 | 第18-20页 |
·敲除载体的构建 | 第18-19页 |
·根癌农杆菌介导的丝状真菌转化系统 | 第19-20页 |
4 双组分系统中的应答调节蛋白 | 第20-23页 |
·细菌中的应答调节蛋白 | 第20-22页 |
·植物中的反应调控因子 | 第22页 |
·丝状真菌中的应答调节蛋白 | 第22-23页 |
5 本研究目的、内容和意义 | 第23-24页 |
第二章 红色红曲菌突变子 T-DNA侧翼序列的克隆 | 第24-37页 |
1 材料 | 第24-25页 |
·菌株 | 第24页 |
·酶与主要生化试剂 | 第24页 |
·培养基 | 第24页 |
·主要仪器设备 | 第24-25页 |
2 方法 | 第25-28页 |
·菌株筛选 | 第25页 |
·菌株显微观察 | 第25页 |
·TAIL-PCR扩增 T-DNA插入位点侧翼序列 | 第25-27页 |
·SON-PCR延伸已知序列 | 第27-28页 |
·序列的拼接及分析 | 第28页 |
3 结果与分析 | 第28-34页 |
·菌株的筛选 | 第28-29页 |
·菌株的显微观察 | 第29-30页 |
·TAIL-PCR扩增结果 | 第30-31页 |
·SON-PCR引物设计及扩增结果 | 第31-33页 |
·序列的拼接及分析 | 第33-34页 |
4 小结与讨论 | 第34-37页 |
·小结 | 第34-35页 |
·讨论 | 第35-37页 |
第三章 红色红曲菌mrr基因的敲除 | 第37-48页 |
1 材料 | 第37-38页 |
·菌株与质粒 | 第37页 |
·酶与主要试剂 | 第37页 |
·农杆菌介导转化所需试剂和培养基 | 第37-38页 |
·主要仪器设备 | 第38页 |
2 方法 | 第38-42页 |
·引物设计 | 第38-39页 |
·敲除载体的构建 | 第39-41页 |
·农杆菌介导的红曲菌转化 | 第41页 |
·△mrr突变子的筛选 | 第41-42页 |
3 结果与分析 | 第42-46页 |
·引物设计 | 第42页 |
·重组片段的获得 | 第42-43页 |
·含pCMRR的农杆菌 EHA105的鉴定 | 第43-44页 |
·红色红曲菌 M-7 mrr基因敲除突变子的PCR验证 | 第44-46页 |
4 小结与讨论 | 第46-48页 |
·小结 | 第46页 |
·讨论 | 第46-48页 |
第四章 红色红曲菌mrr功能的初步研究 | 第48-57页 |
1 材料 | 第48页 |
·菌株 | 第48页 |
·培养基 | 第48页 |
2 方法 | 第48-50页 |
·△mrr突变子的菌落形态观察 | 第48-49页 |
·△mrr突变子的显微特征观察 | 第49页 |
·△mrr突变子耐渗透压特性研究 | 第49页 |
·△mrr突变子耐 H_2O_2特性研究 | 第49-50页 |
3 结果与分析 | 第50-54页 |
·△mrr突变子与 M-7菌落形态比较 | 第50-52页 |
·△mrr突变子与 M-7显微形态比较 | 第52-53页 |
·△mrr突变子耐渗透压特性研究 | 第53-54页 |
·△mrr突变子耐 H_2O_2特性研究 | 第54页 |
4 小结与讨论 | 第54-57页 |
·小结 | 第54-55页 |
·讨论 | 第55-57页 |
第五章 结论与展望 | 第57-59页 |
1 结论 | 第57页 |
2 展望 | 第57-58页 |
3 论文创新点 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
致谢 | 第66页 |