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西伯利亚蓼PsPGIP基因的克隆及功能分析

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
1 绪论第8-12页
   ·课题背景(或引言)第8页
   ·PGIP的结构特点第8-9页
   ·PGIP的含量、分布的差异与植物抗性强弱的关系第9页
   ·PGIP的生物学功能及作用机理第9-11页
   ·PGIP的研究进展第11页
   ·本项研究的意义第11-12页
2 PGIP基因的克隆及盐胁迫下基因的表达分析第12-26页
   ·材料第12-13页
     ·植物材料第12页
     ·菌株与质粒第12页
     ·实验仪器第12页
     ·主要试剂第12页
     ·主要培养基第12-13页
   ·方法第13-18页
     ·植物材料的准备第13页
     ·引物的设计与合成第13页
     ·西伯利亚蓼总RNA的提取第13页
     ·RNA的纯化和RACE第13-17页
     ·序列分析第17页
     ·克隆PsPGIP基因全长第17-18页
     ·PsPGIP基因全长的序列分析第18页
   ·PsPGIP基因在盐胁迫下的表达模式第18-19页
     ·总RNA的反转录第18页
     ·实时定量PCR第18-19页
   ·结果与分析第19-24页
     ·PsPGIP基因的扩增第19页
     ·PsPGIP基因的序列分析第19-20页
     ·西伯利亚蓼与其它植物的PGIP蛋白的同源性比较第20-23页
     ·PsPGIP基因的定量RT-PCR分析第23-24页
   ·讨论第24页
   ·本章小结第24-26页
3 PsPGIP基因对烟草的遗传转化及抗性分析第26-44页
   ·实验材料第26-28页
     ·植物材料第26页
     ·菌株与质粒第26页
     ·分子生物学试剂及生化试剂第26页
     ·主要仪器设备第26页
     ·功能验证试剂第26-27页
     ·主要培养基第27-28页
   ·方法第28-34页
     ·植物表达载体PROK Ⅱ-PsPGIP的构建第28-29页
     ·农杆菌感受态的制备及电击转化第29页
     ·烟草的遗传转化第29-30页
     ·转化烟草的PCR检测第30页
     ·转基因烟草植株的抗性分析第30-33页
     ·转基因烟草的抑菌分析第33-34页
   ·结果与分析第34-41页
     ·植物表达载体(PROK Ⅱ-PsPGIP)的获得第34-35页
     ·转PsPGIP基因烟草的获得第35页
     ·转PsPGIP基因烟草的分子鉴定第35-36页
     ·转PsPGIP基因烟草的耐盐性分析第36-40页
     ·转PsPGIP基因烟草的抑菌性分析第40-41页
   ·讨论第41-42页
   ·本章小结第42-44页
结论第44-46页
参考文献第46-52页
附录第52-54页
攻读学位期间发表的学术论文第54-56页
致谢第56-58页

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