| 致谢 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-12页 |
| 1 丝孢类生防真菌的抗逆生物学与海藻糖抗逆功能的研究现状 | 第12-31页 |
| ·生防真菌的抗逆生物学 | 第12-17页 |
| ·影响生防真菌制剂防效的环境因素 | 第12-15页 |
| ·提高真菌制剂田间防效的策略 | 第15-17页 |
| ·生真菌毒力基因工程的研究 | 第17-20页 |
| ·生防真菌的遗传转化 | 第17页 |
| ·丝状真菌基因功能分析 | 第17-20页 |
| ·海藻糖代谢途径及其抗逆生物学功能 | 第20-30页 |
| ·海藻糖的来源分布及其理化性质 | 第21-22页 |
| ·生物体中海藻糖的合成途径及其相关基因 | 第22-24页 |
| ·海藻糖的分解代谢途径及其相关基因 | 第24-26页 |
| ·海藻糖抗逆的生物学功能 | 第26-29页 |
| ·海藻糖保护生物分子可能的作用机制 | 第29-30页 |
| ·展望 | 第30-31页 |
| 2 球孢白僵菌胞内海藻糖和甘露醇在热胁迫下的生理响应 | 第31-40页 |
| ·材料与方法 | 第31-33页 |
| ·菌株及其生长培养和高温胁迫 | 第31页 |
| ·热胁迫后胞内蛋白提取物的制备 | 第31-32页 |
| ·热胁迫后胞内海藻糖水解酶,MPD和MTD酶活力的测定 | 第32页 |
| ·热胁迫后胞内海藻糖和甘露醇含量的测定 | 第32页 |
| ·热胁迫后的培养恢复 | 第32-33页 |
| ·热激后恢复生长中海藻糖、甘露醇、海藻糖水解酶、MPD和MTD的测定 | 第33页 |
| ·热胁迫后菌落对极限高温耐受力的测定 | 第33页 |
| ·数据分析 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-38页 |
| ·热胁迫中胞内海藻糖、甘露醇、海藻糖水解酶、MPD和MTD的变化 | 第33-35页 |
| ·胞内海藻糖、海藻糖水解酶、甘露醇、MPD和MTD的相关分析 | 第35-36页 |
| ·热胁迫后菌落的活力比较 | 第36-37页 |
| ·热激后恢复中海藻糖、甘露醇、海藻糖水解酶、MPD和MTD的变化 | 第37页 |
| ·热胁迫后菌落对更高温度的耐受力 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 3 球孢白僵菌中性海藻糖水解酶基因克隆、表达纯化及酶学特征 | 第40-48页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·菌株和载体 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40-41页 |
| ·试剂配置 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-44页 |
| ·BbNTH1基因的克隆和原核表达 | 第41-43页 |
| ·BbNTH1的原核表达与纯化 | 第43-44页 |
| ·BbNTH1的酶特性分析 | 第44页 |
| ·结果 | 第44-46页 |
| ·BbNTH1的基因克隆与序列分析 | 第44-45页 |
| ·BbNTH1的纯化和酶特性分析 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 4 各种压力胁迫下调控BBNTH1基因表达的应激元件识别 | 第48-58页 |
| ·材料 | 第48-49页 |
| ·菌株 | 第48页 |
| ·载体 | 第48-49页 |
| ·方法 | 第49-52页 |
| ·报告基因eGFP与目标基因启动子上游截头序列片段的融合 | 第49-51页 |
| ·融合基因表达载体的构建和转化表达 | 第51页 |
| ·BbNTH1对各种压力胁迫的转录表达效应 | 第51-52页 |
| ·结果与分析 | 第52-55页 |
| ·压力胁迫下调控BbNTH1转录表达的启动子区域 | 第52-54页 |
| ·NthP4中2个胁迫响应元件调控BbNTH1在胁迫下表达的作用 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-58页 |
| 5 球孢白僵菌6-磷酸海藻糖合成酶基因结构与功能解析 | 第58-72页 |
| ·材料 | 第58-59页 |
| ·菌株和载体 | 第58页 |
| ·试剂 | 第58-59页 |
| ·方法 | 第59-64页 |
| ·球孢白僵菌6-磷酸海藻糖合成酶BbTPS1基因的克隆 | 第59-60页 |
| ·构建BbTPS1基因的干扰载体 | 第60-61页 |
| ·BbTPS1基因的干扰载体转化 | 第61-62页 |
| ·转化子鉴定 | 第62页 |
| ·Real time RT-PCR检测BbTPS1基因的表达 | 第62页 |
| ·分子孢子萌发的耐热力测定 | 第62-63页 |
| ·热胁迫后转化子胞内海藻糖的含量测定 | 第63页 |
| ·氧化和渗透压胁迫 | 第63-64页 |
| ·热胁迫后菌落对极限高温的耐受力测定 | 第64页 |
| ·结果与分析 | 第64-70页 |
| ·基因BbTPS1的克隆与序列分析 | 第64页 |
| ·干扰载体的构建及其转化子鉴定 | 第64-66页 |
| ·BbTPS1基因的表达 | 第66-67页 |
| ·孢子的萌发和耐热力 | 第67-68页 |
| ·热胁迫后转化子胞内海藻糖的含量 变化 | 第68页 |
| ·转化子对氧化和渗透压的胁迫响应 | 第68-69页 |
| ·热胁迫后转化子对极限高温的耐受力 | 第69-70页 |
| ·讨论 | 第70-72页 |
| 6 结语 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-86页 |
| SUMMARY | 第86-90页 |
| 附录:攻读学位期间的主要成果 | 第90页 |
