| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1.引言 | 第12-45页 |
| 1.1.木薯的生物学特性和经济价值 | 第12页 |
| 1.2.植物叶片同化物装载 | 第12-21页 |
| 1.2.1.植物叶片同化物装载的几种模式 | 第12-14页 |
| 1.2.2.不同装载模式影响植物对植食性动物啃食的响应 | 第14-15页 |
| 1.2.3.同位素饲喂法研究同化物装载模式 | 第15-17页 |
| 1.2.4.小叶脉中各细胞间的胞间连丝数量分析同化物装载模式 | 第17-18页 |
| 1.2.5.细胞质和韧皮部汁液间的糖浓度比例判断同化物装载模式 | 第18页 |
| 1.2.6.通过对转运蛋白的研究探讨装载模式 | 第18-19页 |
| 1.2.7.研究同化物装载途径基本方法选择 | 第19-20页 |
| 1.2.8.木薯叶片蔗糖装载模式的研究现状 | 第20页 |
| 1.2.9.植物叶片蔗糖主动装载完整模型 | 第20-21页 |
| 1.3.植物蔗糖转运蛋白SUT | 第21-36页 |
| 1.3.1.植物SUT的发现历史 | 第21-22页 |
| 1.3.2.单子叶植物和双子叶植物的SUT的分类 | 第22-26页 |
| 1.3.3.植物SUT的蛋白结构 | 第26-27页 |
| 1.3.4.植物SUT亚细胞定位 | 第27-28页 |
| 1.3.5.植物SUT的蔗糖转运活力 | 第28-29页 |
| 1.3.6.植物SUT转运多种物质 | 第29页 |
| 1.3.7.植物SUT之间以及与其他蛋白的互作 | 第29-30页 |
| 1.3.8.植物SUT与蔗糖装载 | 第30-31页 |
| 1.3.9.植物SUT的调控方式 | 第31-32页 |
| 1.3.10.植物SUT与生物胁迫 | 第32页 |
| 1.3.11.植物SUT与环境 | 第32-33页 |
| 1.3.12.被子植物和裸子植物的SUT家族进化历程 | 第33-36页 |
| 1.3.13.木薯SUT的研究现状和意义 | 第36页 |
| 1.4.植物SWEET蛋白家族研究进展 | 第36-42页 |
| 1.4.1.植物SWEET及其发现历史 | 第36-37页 |
| 1.4.2.植物SWEET的分类 | 第37-38页 |
| 1.4.3.植物SWEET的蛋白结构 | 第38-39页 |
| 1.4.4.SWEET的蛋白结构演化 | 第39页 |
| 1.4.5.植物SWEET的亚细胞定位 | 第39-40页 |
| 1.4.6.植物SWEET转运多种糖类 | 第40页 |
| 1.4.7.植物SWEET的蛋白互作 | 第40-41页 |
| 1.4.8.植物SWEET参与糖分配 | 第41页 |
| 1.4.9.植物SWEET对病原菌的响应 | 第41页 |
| 1.4.10.木薯SWEET的研究现状 | 第41-42页 |
| 1.5.内参基因影响荧光定量PCR结果的准确性 | 第42-44页 |
| 1.5.1.qPCR与制约因素 | 第42页 |
| 1.5.2.传统内参基因表达的不稳定性 | 第42-43页 |
| 1.5.3.基于大数据筛选的新型内参基因 | 第43页 |
| 1.5.4.基于SYBR green qPCR评估内参基因 | 第43页 |
| 1.5.5.木薯qPCR内参基因的筛选研究和应用 | 第43-44页 |
| 1.6.研究内容和目的意义 | 第44-45页 |
| 1.6.1.论文的研究内容 | 第44页 |
| 1.6.2.论文的目的意义 | 第44-45页 |
| 2.材料与方法 | 第45-58页 |
| 2.1.材料 | 第45-47页 |
| 2.1.1.木薯蔗糖装载模式研究所用材料 | 第45页 |
| 2.1.2.SUT及SWEET蛋白家族研究所用材料 | 第45页 |
| 2.1.3.内参基因筛选实验所用样本 | 第45-47页 |
| 2.2.方法 | 第47-57页 |
| 2.2.1.实验设计 | 第47页 |
| 2.2.2.木薯全叶片糖成分分析 | 第47页 |
| 2.2.3.RNA及DNA的提取 | 第47-48页 |
| 2.2.4.14-C sucrose饲喂木薯叶盘 | 第48页 |
| 2.2.5.~(14)CO_2饲喂木薯叶片 | 第48页 |
| 2.2.6.木薯小叶脉电镜切片及胞间连丝统计 | 第48页 |
| 2.2.7.MeSUTs的全长克隆 | 第48-49页 |
| 2.2.8.MeSUTs的转录水平分析 | 第49页 |
| 2.2.9.MeSUTs的糖转运功能鉴定 | 第49-50页 |
| 2.2.10.MeSUTs启动子克隆 | 第50页 |
| 2.2.11.pMeSUT::uidA的载体构建与烟草转化 | 第50-51页 |
| 2.2.12.GUS染色法分析 | 第51页 |
| 2.2.13.构建MeSUT的native启动子表达载体转化木薯 | 第51-52页 |
| 2.2.14.MeSWEET基因的电子克隆 | 第52页 |
| 2.2.15.MeSWEETs的转录水平预测 | 第52-53页 |
| 2.2.16.部分MeSWEETs的cDNA克隆 | 第53-54页 |
| 2.2.17.MeSWEET的糖转运功能 | 第54页 |
| 2.2.18.MeSWEET对干旱的响应 | 第54页 |
| 2.2.19.候选内参基因的选择 | 第54-56页 |
| 2.2.20.候选内参基因的引物设计 | 第56页 |
| 2.2.21.候选内参基因引物的鉴定与扩增效率鉴定 | 第56页 |
| 2.2.22.内参基因的SYBR green方法评估 | 第56-57页 |
| 2.3.药品试剂 | 第57-58页 |
| 3.结果与分析 | 第58-97页 |
| 3.1.木薯叶片蔗糖装载模式研究 | 第58-63页 |
| 3.1.1.木薯全叶片糖成分分析 | 第58-59页 |
| 3.1.2.~(14)C-sucrose饲喂木薯叶盘 | 第59-60页 |
| 3.1.3.~(14)CO_2饲喂木薯叶片 | 第60页 |
| 3.1.4.木薯小叶脉细胞间的胞间连丝频率 | 第60-63页 |
| 3.1.5.木薯叶片蔗糖主动装载模式小结 | 第63页 |
| 3.2.木薯SUT家族的研究 | 第63-75页 |
| 3.2.1.RACE方法扩增MeSUT1a序列 | 第63-64页 |
| 3.2.2.MeSUTs的可变剪切及全长克隆 | 第64-65页 |
| 3.2.3.MeSUTs的进化分类 | 第65-66页 |
| 3.2.4.MeSUT的转录水平 | 第66-68页 |
| 3.2.5.MeSUT的糖转运功能 | 第68-69页 |
| 3.2.6.MeSUT基因启动子的顺式作用元件 | 第69-70页 |
| 3.2.7.pMeSUT::uidA表达检测启动子 | 第70-72页 |
| 3.2.8.构建MeSUT的native启动子表达载体转化木薯实验 | 第72-74页 |
| 3.2.9.MeSUT研究小结 | 第74-75页 |
| 3.3.木薯SWEET蛋白家族的研究 | 第75-86页 |
| 3.3.1.MeSWEET基因的电子克隆和分类 | 第75-77页 |
| 3.3.2.MeSWEET的转录水平初步考察 | 第77-81页 |
| 3.3.3.若干MeSWEET的cDNA克隆 | 第81-82页 |
| 3.3.4.若干MeSWEET启动子的顺式作用元件预测 | 第82-83页 |
| 3.3.5.MeSWEET的糖转运功能 | 第83-84页 |
| 3.3.6.MeSWEET响应干旱 | 第84-86页 |
| 3.3.7.MeSWEET研究小结 | 第86页 |
| 3.4.木薯qPCR新型内参基因的筛选 | 第86-97页 |
| 3.4.1.RNA及DNA的提取 | 第87页 |
| 3.4.2.候选内参基因信息 | 第87-88页 |
| 3.4.3.候选内参基因的引物设计 | 第88-89页 |
| 3.4.4.候选内参基因的引物鉴定 | 第89-90页 |
| 3.4.5.候选内参基因表达的Ct值统计 | 第90页 |
| 3.4.6.geNorm分析候选内参基因的稳定性 | 第90-93页 |
| 3.4.7.NormFinder分析候选内参基因的稳定性 | 第93-95页 |
| 3.4.8.新型内参基因筛选小结 | 第95-97页 |
| 4.讨论 | 第97-102页 |
| 4.1.木薯叶片蔗糖的主动装载模式 | 第97页 |
| 4.2.MeSUT蛋白家族 | 第97-99页 |
| 4.2.1.MeSUTs基因的拷贝数和可变剪切 | 第97-98页 |
| 4.2.2.MeSUTs的转录水平 | 第98页 |
| 4.2.3.MeSUTs的糖转运功能 | 第98页 |
| 4.2.4.MeSUTs的组织定位 | 第98-99页 |
| 4.2.5.MeSUT1a的木薯过表达 | 第99页 |
| 4.2.6.MeSUTs蛋白家族小结 | 第99页 |
| 4.3.MeSWEET蛋白家族 | 第99-101页 |
| 4.3.1.MeSWEET的电子克隆及转录水平分析 | 第99-100页 |
| 4.3.2.部分MeSWEET的糖转运功能 | 第100页 |
| 4.3.3.MeSWEET响应干旱 | 第100页 |
| 4.3.4.MeSWEET家族研究小结 | 第100-101页 |
| 4.4.木薯qPCR新型内参基因的筛选 | 第101-102页 |
| 5.结论 | 第102-104页 |
| 参考文献 | 第104-116页 |
| 缩略语表 | 第116-117页 |
| 附录 | 第117-122页 |
| 已发表文章 | 第122-123页 |
| 致谢 | 第123页 |
