摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
第1章 绪论 | 第14-32页 |
1.1 番茄概述 | 第14页 |
1.2 逆境胁迫 | 第14页 |
1.3 植物响应干旱和高盐胁迫的作用机理 | 第14-18页 |
1.3.1 植物响应干旱胁迫的作用机理 | 第16-17页 |
1.3.2 植物响应高盐胁迫的作用机理 | 第17-18页 |
1.4 转录因子 | 第18-21页 |
1.4.1 转录因子结构研究进展 | 第18-20页 |
1.4.2 转录因子功能研究进展 | 第20-21页 |
1.4.3 逆境相关转录因子 | 第21页 |
1.5 bZIP家族转录因子研究进展 | 第21-24页 |
1.5.1 bZIP家族转录因子的分类 | 第21-22页 |
1.5.2 bZIP家族转录因子在逆境下的作用及响应 | 第22-24页 |
1.6 bZIP转录因子参与调控的ABA信号途径 | 第24-29页 |
1.6.1 脱落酸(ABA) | 第24-25页 |
1.6.2 植物中bZIP转录因子参与调控的ABA信号途径 | 第25-29页 |
1.7 研究目的和意义 | 第29-30页 |
1.8 研究的主要内容及技术路线 | 第30-32页 |
第2章 SlbZIP38基因的克隆及生物信息学分析 | 第32-46页 |
2.1 实验材料和试剂 | 第32-34页 |
2.1.1 实验材料 | 第32页 |
2.1.2 实验试剂及配制 | 第32-34页 |
2.2 仪器设备 | 第34-35页 |
2.3 实验方法 | 第35-39页 |
2.3.1 SlbZIP38基因的克隆 | 第35-37页 |
2.3.2 SlbZIP38蛋白结构分析 | 第37页 |
2.3.3 启动子区域分析 | 第37-38页 |
2.3.4 SlbZIP38蛋白与其他bZIP蛋白序列的系统进化分析 | 第38页 |
2.3.5 SlbZIP38蛋白与其他bZIP蛋白序列同源比对 | 第38页 |
2.3.6 SlbZIP38在番茄中的亚细胞定位 | 第38-39页 |
2.4 结果与分析 | 第39-45页 |
2.4.1 SlbZIP38基因的克隆 | 第39-41页 |
2.4.2 SlbZIP38蛋白结构分析 | 第41-43页 |
2.4.3 启动子区域分析 | 第43-44页 |
2.4.4 SlbZIP38在番茄中的亚细胞定位 | 第44-45页 |
2.5 小结 | 第45-46页 |
第3章 SlbZIP38基因的表达模式及诱导因素分析 | 第46-56页 |
3.1 实验材料和试剂 | 第46页 |
3.1.1 实验材料 | 第46页 |
3.1.2 实验试剂及配制 | 第46页 |
3.2 仪器设备 | 第46页 |
3.3 实验方法 | 第46-49页 |
3.3.1 番茄植株的激素处理及样品收集 | 第46页 |
3.3.2 番茄植株的非生物胁迫及样品收集 | 第46-47页 |
3.3.3 果实样品收集 | 第47-48页 |
3.3.4 各样品的总RNA提取及cDNA合成 | 第48页 |
3.3.5 SlbZIP38基因的qRT-PCR的引物设计及扩增条件摸索 | 第48-49页 |
3.3.6 SlbZIP38基因的表达模式 | 第49页 |
3.4 结果与分析 | 第49-54页 |
3.4.1 RNA提取质量检测 | 第49-50页 |
3.4.2 qRT-PCR引物扩增条件 | 第50-51页 |
3.4.3 SlbZIP38基因在激素处理中的表达分析 | 第51-52页 |
3.4.4 SlbZIP38基因在非生物胁迫处理中的表达分析 | 第52-53页 |
3.4.5 SlbZIP38基因在不同时期果实中的表达分析 | 第53-54页 |
3.5 小结 | 第54-56页 |
第4章 植物表达载体的构建及番茄遗传转化 | 第56-68页 |
4.1 实验材料和试剂 | 第56-57页 |
4.1.1 实验材料 | 第56-57页 |
4.1.2 实验试剂及配制 | 第57页 |
4.2 实验仪器设备 | 第57页 |
4.3 实验方法 | 第57-62页 |
4.3.1 pVCT2024-SlbZIP38超表达载体的构建 | 第57页 |
4.3.2 CRISPR/Cas9沉默表达载体的构建 | 第57-59页 |
4.3.3 pVCT2024-SlbZIP38超表达载体和CRISPR/Cas9沉默表达载体的遗传转化 | 第59-60页 |
4.3.4 转基因阳性植株的检测 | 第60-61页 |
4.3.5 超表达植株的筛选 | 第61-62页 |
4.3.6 沉默表达植株的筛选 | 第62页 |
4.4 实验结果与分析 | 第62-67页 |
4.4.1 pVCT2024-SlbZIP38超表达载体的构建 | 第62-63页 |
4.4.2 CRISPR/Cas9沉默表达载体的构建 | 第63页 |
4.4.3 pVCT2024-SlbZIP38超表达载体的遗传转化 | 第63-64页 |
4.4.4 转基因阳性植株的检测 | 第64-65页 |
4.4.5 超表达阳性植株的筛选 | 第65-66页 |
4.4.6 CRISPR/Cas9沉默表达植株的筛选 | 第66-67页 |
4.5 小结 | 第67-68页 |
第5章 SlbZIP38基因的功能研究 | 第68-102页 |
5.1 实验材料和试剂 | 第68-69页 |
5.1.1 实验材料 | 第68-69页 |
5.1.2 实验试剂及配制 | 第69页 |
5.2 实验仪器设备 | 第69页 |
5.3 实验方法 | 第69-80页 |
5.3.1 转基因植株对外源ABA敏感检测 | 第69-70页 |
5.3.2 SlbZIP38基因在干旱胁迫中的功能分析 | 第70-73页 |
5.3.3 SlbZIP38基因在高盐胁迫中的功能分析 | 第73-75页 |
5.3.4 SlbZIP38的互作蛋白筛选及分析 | 第75-80页 |
5.4 实验结果与分析 | 第80-100页 |
5.4.1 转基因植株对外源ABA敏感检测 | 第80-82页 |
5.4.2 SlbZIP38基因在干旱胁迫中的功能分析 | 第82-86页 |
5.4.3 SlbZIP38基因在高盐胁迫中的功能分析 | 第86-92页 |
5.4.4 SlbZIP38的互作蛋白筛选及分析 | 第92-100页 |
5.5 小结 | 第100-102页 |
第6章 讨论 | 第102-106页 |
6.1 CRISPR/Cas9沉默表达载体构建和功能研究 | 第102页 |
6.2 SlbZIP38基因可能参与调控番茄果实成熟 | 第102-103页 |
6.3 SlbZIP38基因在番茄干旱胁迫条件下可能的机制分析 | 第103页 |
6.4 SlbZIP38基因在番茄高盐胁迫条件下可能的机制分析 | 第103-104页 |
6.5 SlbZIP38蛋白的互作网络分析 | 第104-106页 |
第7章 结论与展望 | 第106-108页 |
7.1 结论 | 第106页 |
7.2 创新点 | 第106页 |
7.3 展望 | 第106-108页 |
参考文献 | 第108-130页 |
附录 | 第130-132页 |
致谢 | 第132-134页 |
在学期间发表文章及参加课题 | 第134-135页 |