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SERPINA3K对内源性氧化物质4-HNE引起的氧化损伤的保护作用和机制研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 前言第14-34页
    1.1 SERPINA3K的简介第14-21页
        1.1.1 SERPINA3K的发现与鉴定第14-15页
        1.1.2 SERPINA3K的生理活性第15-18页
        1.1.3 SERPINA3K在疾病研究中的药理活性作用第18-20页
        1.1.4 SERPINA3K的总结第20-21页
    1.2 4-HNE在氧化应激中的作用第21-27页
        1.2.1 4-HNE的产生与降解第21-22页
        1.2.2 4-HNE的生物学功能第22-23页
        1.2.3 4-HNE参与氧化应激的机制第23-26页
        1.2.4 4-HNE的氧化应激作用与疾病研究第26-27页
        1.2.5 总结第27页
    1.3 氧化应激在角膜疾病中的研究进展第27-34页
        1.3.1 氧化应激的简介第27-30页
        1.3.2 氧化应激在角膜疾病中的研究进展第30-34页
第二章 实验材料第34-40页
    2.1 实验材料与仪器第34-37页
        2.1.1 细胞系和实验动物第34页
        2.1.2 实验试剂第34-36页
        2.1.3 实验仪器第36-37页
    2.2 主要溶液配制第37-40页
        2.2.1 细胞培养相关溶液第37-38页
        2.2.2 细胞裂解液第38页
        2.2.3 Western Blot实验溶液第38-39页
        2.2.4 免疫荧光实验溶液第39-40页
第三章 实验方法第40-53页
    3.1 SERPINA3K的纯化第40页
    3.2 细胞培养第40-42页
        3.2.1 细胞的复苏第40页
        3.2.2 细胞的传代第40-41页
        3.2.3 细胞的冻存第41页
        3.2.4 细胞的计数与种板第41-42页
        3.2.5 细胞爬片的制作第42页
        3.2.6 HCE细胞的4-HNE处理及SERPINA3K给药处理第42页
    3.3 动物实验第42-43页
    3.4 CCK-8法测定细胞活性第43页
    3.5 冰冻切片的制备第43-44页
        3.5.1 载玻片处理第43-44页
        3.5.2 冰冻切片制备第44页
    3.6 H&E染色第44-45页
    3.7 TUNEL染色第45页
    3.8 免疫荧光染色第45-46页
    3.9 免疫印迹实验第46-49页
        3.9.1 蛋白样品制备第46-47页
        3.9.2 电泳分离第47-48页
        3.9.3 蛋白膜转移第48-49页
        3.9.4 抗体杂交与显色第49页
        3.9.5 膜再生第49页
    3.10 实时荧光定量PCR第49-52页
        3.10.1 RNA提取第49-50页
        3.10.2 逆转录第50-51页
        3.10.3 PCR第51-52页
    3.11 统计学分析第52-53页
第四章 实验结果第53-75页
    4.1 SERPINA3K抑制4-HNE诱导的人角膜上皮细胞的氧化应激第53-68页
        4.1.1 SERPINA3K对HCE细胞活性的影响第53-56页
        4.1.2 SERPINA3K抑制4-HNE诱导的氧化应激标记物3-NT表达增强第56-57页
        4.1.3 SERPINA3K拮抗4-HNE诱导的氧化应激作用的机制研究第57-68页
    4.2 SERPINA3K抑制4-HNE诱导的大鼠角膜上皮的氧化应激第68-75页
        4.2.1 SERPINA3K对大鼠角膜上皮形态的影响第68-69页
        4.2.2 SERPINA3K对4-HNE引起的大鼠角膜上皮细胞损伤的保护作用第69页
        4.2.3 SERPINA3K抑制4-HNE诱导的大鼠角膜上皮中的氧化应激产物表达第69-71页
        4.2.4 SERPINA3K抑制4-HNE诱导的大鼠角膜上皮氧化应激的机制研究第71-75页
第五章 讨论第75-79页
第六章 总结第79-80页
参考文献第80-93页
附录第93-97页
致谢第97-98页

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