| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第13-20页 |
| 1.1 雷公藤研究进展概况 | 第13-14页 |
| 1.2 雷公藤甲素研究进展 | 第14页 |
| 1.3 固定化细胞技术研究进展 | 第14-16页 |
| 1.4 诱导子 | 第16-17页 |
| 1.5 前体 | 第17-18页 |
| 1.6 抑制剂 | 第18-19页 |
| 1.7 本文研究意义及主要研究内容 | 第19-20页 |
| 2 雷公藤细胞固定化细胞的建立 | 第20-29页 |
| 2.1 试验材料及仪器 | 第20页 |
| 2.1.1 实验材料与培养基 | 第20页 |
| 2.1.2 主要仪器、药品 | 第20页 |
| 2.2 试验方法 | 第20-22页 |
| 2.2.1 悬浮细胞系建立 | 第20-21页 |
| 2.2.2 雷公藤细胞固定化体系的建立 | 第21页 |
| 2.2.3 雷公藤固定化细胞的释放 | 第21页 |
| 2.2.4 雷公藤固定化细胞生物量的测定 | 第21页 |
| 2.2.5 雷公藤固定化细胞活力、总糖含量、苯丙氨酸解氨酶(PAL)的测定 | 第21页 |
| 2.2.6 雷公藤固定化细胞可溶性蛋白、丙二醛(MDA)、过氧化物酶(Peroxidase,POD)和超氧化物歧化酶(SOD)的测定 | 第21-22页 |
| 2.2.7 高效液相仪(HLPC)测定条件设定 | 第22页 |
| 2.2.8 细胞固定化后胞内外雷公藤甲素的测定 | 第22页 |
| 2.3 结果与分析 | 第22-29页 |
| 2.3.1 雷公藤细胞固定化对生物量的影响 | 第22-23页 |
| 2.3.2 雷公藤细胞固定化对总糖含量的影响 | 第23-24页 |
| 2.3.3 雷公藤细胞固定化对培养液PH的影响 | 第24页 |
| 2.3.4 细胞固定化对雷公藤细胞活力的影响 | 第24-25页 |
| 2.3.5 细胞固定化对雷公藤可溶性蛋白的影响 | 第25页 |
| 2.3.6 雷公藤细胞固定化对丙二醛的影响 | 第25-26页 |
| 2.3.7 雷公藤细胞固定化对过氧化物酶(POD)酶活性的影响 | 第26-27页 |
| 2.3.8 雷公藤细胞固定化对超氧化物歧化酶(SOD)酶活性的影响 | 第27页 |
| 2.3.9 雷公藤细胞固定化对苯丙氨酸解氨酶(PAL)酶活性的影响 | 第27-28页 |
| 2.3.10 雷公藤固定化细胞内外甲素含量变化特征 | 第28-29页 |
| 2.4 小结 | 第29页 |
| 3 生物诱导子对雷公藤固定化细胞合成甲素的影响 | 第29-38页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第29-30页 |
| 3.1.1 生物材料 | 第29-30页 |
| 3.1.2 培养基 | 第30页 |
| 3.1.3 仪器及试剂 | 第30页 |
| 3.2 试验方法 | 第30-31页 |
| 3.2.1 内生真菌菌丝体及菌液诱导子制备 | 第30页 |
| 3.2.2 雷公藤固定化细胞及其内生真菌的培养及处理 | 第30-31页 |
| 3.2.3 细胞生物量的测定 | 第31页 |
| 3.2.4 固定化细胞的培养液的总糖含量测定 | 第31页 |
| 3.2.5 细胞内、胞外雷公藤甲素测定 | 第31页 |
| 3.3 结果与分析 | 第31-36页 |
| 3.3.1 内生真菌诱导子调控下对雷公藤固定化细胞生物量的影响 | 第31-33页 |
| 3.3.2 内生真菌诱导子调控下对雷公藤固定化细胞总糖含量的影响 | 第33-34页 |
| 3.3.3 内生真菌诱导子调控下对雷公藤固定化细胞pH的影响 | 第34-35页 |
| 3.3.4 内生真菌诱导子调控下对雷公藤固定化细胞内甲素含量的影响 | 第35页 |
| 3.3.5 内生真菌诱导子调控下对雷公藤固定化细胞外甲素含量变化 | 第35-36页 |
| 3.4 小结 | 第36-38页 |
| 4 前体伺喂对雷公藤固定化细胞生成甲素的影响 | 第38-55页 |
| 4.1 试验材料与仪器 | 第38页 |
| 4.2 试验方法 | 第38-39页 |
| 4.2.1 前体物柠檬酸、SA和Phe浓度控制及添加 | 第38页 |
| 4.2.2 固定化细胞与悬浮细胞的生物量测定 | 第38页 |
| 4.2.3 固定化细胞与悬浮细胞的培养液的总糖含量测定 | 第38-39页 |
| 4.2.4 细胞内、胞外雷公藤甲素测定 | 第39页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第39-52页 |
| 4.3.1 不同浓度柠檬酸、SA和Phe对固定化细胞与悬浮细胞生物量的影响 | 第39-41页 |
| 4.3.2 不同浓度柠檬酸、SA和Phe对固定化细胞与悬浮细胞培养液总糖含量影响 | 第41-44页 |
| 4.3.3 不同浓度柠檬酸、SA和Phe对固定化细胞与悬浮细胞培养液PH的影响 | 第44-46页 |
| 4.3.4 不同浓度柠檬酸、SA和Phe对固定化细胞与悬浮细胞外甲素的影响 | 第46-49页 |
| 4.3.5 不同浓度柠檬酸、SA和Phe对固定化细胞与悬浮细胞内甲素的影响 | 第49-52页 |
| 4.4 小结 | 第52-55页 |
| 5 代谢抑制剂对雷公藤固定化细胞合成甲素的影响 | 第55-72页 |
| 5.1 试验材料与仪器 | 第55-56页 |
| 5.2 试验方法 | 第56页 |
| 5.2.1 抑制剂α-蒎稀、松油醇和樟脑浓度控制及添加 | 第56页 |
| 5.2.2 固定化细胞与悬浮细胞的生物量测定 | 第56页 |
| 5.2.3 固定化细胞与悬浮细胞的培养液的总糖含量测定 | 第56页 |
| 5.2.4 细胞内、胞外雷公藤甲素测定 | 第56页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第56-69页 |
| 5.3.1 不同浓度α-蒎稀、松油醇和樟脑对固定化细胞与悬浮细胞生物量的影响 | 第56-59页 |
| 5.3.2 不同浓度α-蒎稀、松油醇和樟脑对固定化细胞与悬浮细胞培养液pH的影响 | 第59-62页 |
| 5.3.3 不同浓度α-蒎稀、松油醇和樟脑对固定化细胞与悬浮细胞培养液总糖含量的影响 | 第62-64页 |
| 5.3.4 不同浓度α-蒎稀、松油醇和樟脑对固定化细胞与悬浮细胞内甲素的影响 | 第64-67页 |
| 5.3.5 不同浓度α-蒎稀、松油醇和樟脑对固定化细胞与悬浮细胞外甲素的影响 | 第67-69页 |
| 5.4 小结 | 第69-72页 |
| 6 结论与讨论 | 第72-77页 |
| 6.1 研究主要结论 | 第72-75页 |
| 6.2 研究创新 | 第75页 |
| 6.3 研究展望 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-82页 |
| 研究生期间参加科研及发表论文情况 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
