| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-21页 |
| 1.1 小麦条锈菌 | 第12-15页 |
| 1.1.1 小麦条锈病的起源、流行分布与危害 | 第12-13页 |
| 1.1.2 小麦条锈菌的生物学特征 | 第13-14页 |
| 1.1.3 条锈菌代谢机理 | 第14-15页 |
| 1.2 小麦条锈菌致病的分子机制及研究概况 | 第15-16页 |
| 1.2.1 小麦条锈菌致病机制 | 第15页 |
| 1.2.2 小麦与条锈菌互作的分子生物学研究 | 第15-16页 |
| 1.3 技术研究进展 | 第16-20页 |
| 1.3.1 实时定量PCR技术 | 第16-17页 |
| 1.3.2 基因沉默技术 | 第17-18页 |
| 1.3.3 吸器分离技术 | 第18-19页 |
| 1.3.4 转录组测序 | 第19-20页 |
| 1.4 本论文的目的及意义 | 第20-21页 |
| 第二章 小麦条锈菌吸器转录组特异表达基因筛选 | 第21-36页 |
| 2.1 材料、试剂及仪器 | 第21页 |
| 2.1.1 材料 | 第21页 |
| 2.1.2 试剂 | 第21页 |
| 2.1.3 仪器 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-27页 |
| 2.2.1 实验材料的采集 | 第21-22页 |
| 2.2.2 琼脂糖凝胶柱的制备 | 第22-23页 |
| 2.2.3小麦条锈麵器的提取 | 第23-24页 |
| 2.2.4 检测提取的吸器质量 | 第24页 |
| 2.2.5 吸器、孢子、芽管的总RNA提取 | 第24-25页 |
| 2.2.6 cDNA第一链的合成 | 第25-26页 |
| 2.2.7 生物信息学分碰录组数据 | 第26页 |
| 2.2.8 特异表达基因的引物设计 | 第26-27页 |
| 2.2.9 对特异表达基因的Real-timePCR验证 | 第27页 |
| 2.3 实验结果 | 第27-34页 |
| 2.3.1 吸器分离结果 | 第27-28页 |
| 2.3.2 转录组数据质量分析结果 | 第28页 |
| 2.3.3 转录组数据预处理结果 | 第28-29页 |
| 2.3.4 Mapping结果 | 第29页 |
| 2.3.5 差异基因表达分析结果 | 第29页 |
| 2.3.6 GO注释及富集结果 | 第29-32页 |
| 2.3.7 特异表达基因的筛选 | 第32页 |
| 2.3.8 锈菌侵染各个时间点RNA提取 | 第32-33页 |
| 2.3.9 差异表达基因的定量分析 | 第33-34页 |
| 2.4 结论与讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 候选基因初步功能分析 | 第36-50页 |
| 3.1 实验材料 | 第36页 |
| 3.1.1 材料 | 第36页 |
| 3.1.2 试剂 | 第36页 |
| 3.1.3 仪器 | 第36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-41页 |
| 3.2.1 实验材料准备和取样 | 第36-37页 |
| 3.2.2 提取组织总RNA | 第37页 |
| 3.2.3 感受态细胞制备 | 第37页 |
| 3.2.4 基因的引物设计和PCR扩增 | 第37页 |
| 3.2.5 目的片段的回收、连接和转化 | 第37-39页 |
| 3.2.6 质粒的提取和测序 | 第39页 |
| 3.2.7 BSMV-HIGS介导的条锈菌基因沉默 | 第39-41页 |
| 3.2.8 样品的组织学处理 | 第41页 |
| 3.3 结果与分析 | 第41-49页 |
| 3.3.1 基因的克隆 | 第41-42页 |
| 3.3.2 基因的生物信息学分析 | 第42-43页 |
| 3.3.3 候选基因的在接种条锈菌后不同时间点的表达特征 | 第43-44页 |
| 3.3.4 HIGS载体的线性化和体外转录 | 第44-45页 |
| 3.3.5 基因沉默后的沉默效率分析 | 第45-46页 |
| 3.3.6 8个基因沉默后的表型观察 | 第46-47页 |
| 3.3.7 沉默基因后的组织学观察 | 第47-49页 |
| 3.4 结论与讨论 | 第49-50页 |
| 第四章 全文结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 附录 | 第55-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |
