| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1. 前言 | 第11-22页 |
| 1.1. 内质网应激概述 | 第11-14页 |
| 1.1.1. 内质网的生理功能 | 第11-12页 |
| 1.1.2. 内质网应激与未折叠蛋白 | 第12-14页 |
| 1.2. ER stress与葡萄糖平衡和胰岛素抵抗 | 第14-15页 |
| 1.3. ER stress与肥胖 | 第15-16页 |
| 1.4. FGF21概述 | 第16-21页 |
| 1.4.1. FGF21基因结构 | 第16-17页 |
| 1.4.2. FGF21的生理功能 | 第17-19页 |
| 1.4.3. FGF21与葡萄糖代谢 | 第19页 |
| 1.4.4. FGF21与能量代谢 | 第19-20页 |
| 1.4.5. FGF21与糖尿病相关的肥胖 | 第20-21页 |
| 1.4.6. FGF21与动脉粥样硬化 | 第21页 |
| 1.5. 研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 2. 材料与方法 | 第22-35页 |
| 2.1. 实验材料 | 第22页 |
| 2.1.1. 实验细胞 | 第22页 |
| 2.1.2. 菌株和质粒 | 第22页 |
| 2.2. 主要仪器、试剂和溶液配方 | 第22-25页 |
| 2.2.1. 主要仪器 | 第22-23页 |
| 2.2.2. 主要试剂 | 第23页 |
| 2.2.3. 主要溶液配制 | 第23-25页 |
| 2.2.4. 相关生物学软件 | 第25页 |
| 2.3. 实验方法 | 第25-34页 |
| 2.3.1. 细胞培养及瞬时转染 | 第25-26页 |
| 2.3.1.1. 细胞培养 | 第25页 |
| 2.3.1.2. 细胞瞬时转染 | 第25-26页 |
| 2.3.1.3. 重组蛋白FGF21处理细胞 | 第26页 |
| 2.3.2. 总RNA提取和鉴定及cDNA的合成 | 第26-27页 |
| 2.3.2.1 细胞总RNA的提取 | 第26页 |
| 2.3.2.2 总RNA的鉴定 | 第26页 |
| 2.3.2.3 cDNA的合成 | 第26-27页 |
| 2.3.3. 目的片段的扩增与检测 | 第27-28页 |
| 2.3.3.1 目的片段引物设计 | 第27页 |
| 2.3.3.2 目的片段的扩增 | 第27页 |
| 2.3.3.3 目的片段的检测 | 第27-28页 |
| 2.3.4. 实时荧光定量PCR | 第28-29页 |
| 2.3.4.1. 定量PCR引物设计 | 第28-29页 |
| 2.3.4.2. 定量PCR程序 | 第29页 |
| 2.3.5. 质粒的大量提取及纯度鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3.6. 细胞总蛋白质提取、BCA法蛋白浓度测定及Western Blotting | 第30-32页 |
| 2.3.6.1 细胞总蛋白质提取 | 第30页 |
| 2.3.6.2 BCA法测蛋白浓度(试剂盒) | 第30-31页 |
| 2.3.6.3 Western Blotting | 第31-32页 |
| 2.3.7. MTT试验测细胞活力 | 第32-33页 |
| 2.3.8. 内质网形态染色 | 第33-34页 |
| 2.4. 数据统计与分析 | 第34-35页 |
| 3. 结果与分析 | 第35-47页 |
| 3.1. PA对3T3-L1细胞活力的影响 | 第35-36页 |
| 3.2. PA影响内质网形态 | 第36-39页 |
| 3.3. PA诱导ER stress | 第39-42页 |
| 3.3.1. PA激活XBP1剪切和CHOP基因表达 | 第39-41页 |
| 3.3.2. PA激活FGF21基因表达 | 第41-42页 |
| 3.4. FGF21对PA引起的ER stress的调控作用 | 第42-47页 |
| 3.4.1. 超表达FGF21对ER stress标志基因的影响 | 第43-44页 |
| 3.4.2. 重组蛋白FGF21对内质网形态和功能的影响 | 第44-47页 |
| 4. 讨论 | 第47-50页 |
| 5. 结论,创新点和不足之处 | 第50-51页 |
| 5.1. 结论 | 第50页 |
| 5.2. 创新点 | 第50页 |
| 5.3. 不足之处 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
