| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第10-20页 |
| 1.1 无脊椎动物免疫系统概述 | 第10-11页 |
| 1.1.1 体液免疫 | 第10页 |
| 1.1.2 细胞免疫 | 第10-11页 |
| 1.2 细胞凋亡概述 | 第11-12页 |
| 1.2.1 细胞凋亡的发现 | 第11页 |
| 1.2.2 细胞凋亡的特征 | 第11-12页 |
| 1.2.3 细胞凋亡的功能 | 第12页 |
| 1.3 凋亡相关基因的发现及研究 | 第12-18页 |
| 1.3.1 Caspase家族蛋白介导的细胞凋亡 | 第12-15页 |
| 1.3.2 Bcl-2家族蛋白对细胞凋亡的调控作用 | 第15-16页 |
| 1.3.3 其他家族蛋白对细胞凋亡的调节作用 | 第16-18页 |
| 1.4 甲壳动物中凋亡相关基因的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第19-20页 |
| 2 实验材料和方法 | 第20-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 实验动物、菌株及细胞系 | 第20页 |
| 2.1.2 试剂耗材及仪器设备 | 第20-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-32页 |
| 2.2.1 中华绒螯蟹总RNA的提取及cDNA的合成 | 第22-23页 |
| 2.2.2 基因克隆 | 第23-24页 |
| 2.2.3 PCR产物胶回收、连接和转化 | 第24页 |
| 2.2.4 序列分析 | 第24-25页 |
| 2.2.5 重组蛋白原核表达及纯化 | 第25页 |
| 2.2.6 重组蛋白的表达 | 第25页 |
| 2.2.7 重组蛋白的纯化 | 第25-27页 |
| 2.2.8 多克隆抗体制备 | 第27-28页 |
| 2.2.9 Western Blot | 第28页 |
| 2.2.10 实时荧光定量PCR | 第28页 |
| 2.2.11 中华绒螯蟹血细胞原代培养 | 第28页 |
| 2.2.12 免疫荧光组化 | 第28-29页 |
| 2.2.13 重组蛋白rEsCaspase-3/7-1蛋白酶活性鉴定 | 第29页 |
| 2.2.14 dsRNA干扰 | 第29-30页 |
| 2.2.15 dsRNA注射及样品采集 | 第30页 |
| 2.2.16 中华绒螯蟹免疫刺激实验 | 第30页 |
| 2.2.17 蛋白结合实验 | 第30-31页 |
| 2.2.18 基于ELISA的重组蛋白和LPS结合实验 | 第31页 |
| 2.2.19 实验数据处理 | 第31-32页 |
| 3 实验结果 | 第32-52页 |
| 3.1 EsCaspase-3/7-1分子特征及其介导的细胞凋亡调控机制 | 第32-38页 |
| 3.1.1 EsCaspase-3/7-1基因的分子特征 | 第32-34页 |
| 3.1.2 EsCaspase-3/7-1基因的组织分布 | 第34页 |
| 3.1.3 EsCaspase-3/7-1重组蛋白及多克隆抗体制备 | 第34-35页 |
| 3.1.4 EsCaspase-3/7-1在血细胞中的定位 | 第35页 |
| 3.1.5 EsCaspase-3/7-1对免疫刺激的响应情况 | 第35-36页 |
| 3.1.6 EsCaspase-3/7-1重组蛋白活性 | 第36-37页 |
| 3.1.7 EsCaspase-3/7-1与LPS相互作用 | 第37-38页 |
| 3.2 EsIAP1分子特征及其介导的细胞凋亡调控机制 | 第38-46页 |
| 3.2.1 EsIAP1基因的分子特征 | 第38-40页 |
| 3.2.2 EsIAP1基因的组织分布 | 第40-41页 |
| 3.2.3 EsIAP1重组蛋白及多克隆抗体制备 | 第41-42页 |
| 3.2.4 EsIAP1在血细胞中的定位 | 第42页 |
| 3.2.5 EsIAP1对免疫刺激的响应情况 | 第42-43页 |
| 3.2.6 EsIAP1与EsCaspase-3/7-1之间的关系 | 第43-46页 |
| 3.3 EsSOCS6分子特征及其对细胞凋亡调节作用 | 第46-52页 |
| 3.3.1 EsSOCS6基因的分子特征 | 第46-48页 |
| 3.3.2 EsSOCS6基因的组织分布 | 第48-49页 |
| 3.3.3 EsSOCS6对免疫刺激的响应情况 | 第49-50页 |
| 3.3.4 EsSOCS6基因被干扰后凋亡相关的变化 | 第50-52页 |
| 4 分析与讨论 | 第52-56页 |
| 4.1 EsCaspase-3/7-1分子特征及其介导的细胞凋亡 | 第52-54页 |
| 4.1.1 EsCaspase-3/7-1的分子特征 | 第52页 |
| 4.1.2 EsCaspase-3/7-1的组织分布及在血细胞中的定位 | 第52页 |
| 4.1.3 EsCaspase-3/7-1对免疫刺激的响应情况 | 第52-53页 |
| 4.1.4 EsCaspase-3/7-1重组蛋白活性 | 第53页 |
| 4.1.5 EsCaspase-3/7-1与LPS的相互作用 | 第53-54页 |
| 4.2 EsIAP1的分子特征及其对细胞凋亡的调控 | 第54-55页 |
| 4.2.1 EsIAP1的分子特征 | 第54页 |
| 4.2.2 EsIAP1的组织分布及在血细胞中的定位 | 第54页 |
| 4.2.3 EsIAP1对免疫刺激的响应情况 | 第54页 |
| 4.2.4 EsIAP1对凋亡的调控作用 | 第54-55页 |
| 4.3 EsSOCS6的分子特征及其对细胞凋亡的影响 | 第55-56页 |
| 4.3.1 EsSOCS6的基本特征 | 第55页 |
| 4.3.2 EsSOCS6的组织分布 | 第55页 |
| 4.3.3 EsSOCS6对免疫刺激的响应情况 | 第55页 |
| 4.3.4 EsSOCS6对细胞凋亡的调节作用 | 第55-56页 |
| 5 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 硕士期间完成和发表的论文 | 第62-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
