硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
英文縮略表 | 第12-13页 |
第一章 引言 | 第13-21页 |
1.1 自然史 | 第13页 |
1.2 病原学 | 第13-14页 |
1.2.1 RHDV基因组 | 第13-14页 |
1.2.2 RHDV结构蛋白 | 第14页 |
1.3 流行病学 | 第14页 |
1.4 临床症状和病理变化 | 第14-15页 |
1.5 RHDV的变异与进化 | 第15页 |
1.6 RHDV生活周期 | 第15-16页 |
1.7 宿主对RHDV的抵抗 | 第16页 |
1.8 蛋白质组学 | 第16-18页 |
1.8.1 蛋白质组学概述 | 第16-17页 |
1.8.2 蛋白质组学相关技术 | 第17-18页 |
1.9 酵母双杂交体系 | 第18-19页 |
1.9.1 酵母双杂交体系的基本原理 | 第18页 |
1.9.2 酵母双杂交体系的优势及局限性 | 第18-19页 |
1.9.3 酵母双杂交体系的应用 | 第19页 |
1.10 本研究的目的及意义 | 第19-21页 |
第二章 幼年兔与成年兔肝脏的蛋白质组学分析 | 第21-32页 |
2.1 材料与方法 | 第21-24页 |
2.1.1 实验动物 | 第21页 |
2.1.2 主要仪器 | 第21页 |
2.1.3 主要试剂 | 第21页 |
2.1.4 蛋白样品制备 | 第21页 |
2.1.5 双向差异凝胶电泳 | 第21-22页 |
2.1.6 图像扫描和分析 | 第22页 |
2.1.7 胶内酶解及质谱分析 | 第22页 |
2.1.8 生物信息学分析 | 第22-23页 |
2.1.9 荧光定量PCR验证试验 | 第23-24页 |
2.2 实验结果 | 第24-29页 |
2.2.1 2-D DIGE凝胶图谱 | 第24-25页 |
2.2.2 MALDI-TOF/TOF质谱鉴定 | 第25-26页 |
2.2.3 生物信息学分析 | 第26-28页 |
2.2.4 部分差异表达蛋白质的REAL-TIME PCR验证 | 第28-29页 |
2.3 讨论 | 第29-32页 |
第三章 酵母双杂交筛选与RHDV互作的差异蛋白 | 第32-45页 |
3.1 材料与方法 | 第32-38页 |
3.1.1 毒株、菌株 | 第32页 |
3.1.2 主要试剂 | 第32页 |
3.1.3 RHDV病毒蛋白诱饵载体的构建及鉴定 | 第32-33页 |
3.1.4 AH109酵母感受态细胞的制备 | 第33页 |
3.1.5 小规模转化方法 | 第33-34页 |
3.1.6 诱饵载体PGBKT7-X的毒性检测和自激活活性检测 | 第34页 |
3.1.7 差异蛋白捕获载体的构建及鉴定 | 第34-38页 |
3.1.8 捕获载体PGADT7-Y的自激活检测和毒性检测 | 第38页 |
3.1.9 PGBKT7-X与PGADT7-Y共转化酵母菌AH109 | 第38页 |
3.2 结果 | 第38-43页 |
3.2.1 RHDV病毒蛋白基因的扩增 | 第38-39页 |
3.2.2 诱饵载体PGBKT7-X的构建及鉴定 | 第39页 |
3.2.3 诱饵载体PGBKT7-X的毒性检测分析 | 第39-40页 |
3.2.4 诱饵载体PGBKT7-X的自激活检测分析 | 第40-41页 |
3.2.5 捕获载体PGADT7-Y的构建及鉴定 | 第41-42页 |
3.2.6 捕获载体PGADT7-Y的自激活和毒性检测 | 第42页 |
3.2.7 酵母双杂交验证结果 | 第42-43页 |
3.3. 讨论 | 第43-45页 |
第四章 全文结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
作者简历 | 第53页 |