摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5-6页 |
1 文献综述 | 第14-28页 |
1.1 circRNA的研究进展 | 第14-19页 |
1.1.1 circRNA的发现 | 第14页 |
1.1.2 circRNA的生物学特征 | 第14-15页 |
1.1.3 circRNA的生成过程及其作用机制 | 第15-17页 |
1.1.4 circRNA与miRNA | 第17-19页 |
1.2 乳蛋白合成及其信号通路 | 第19-24页 |
1.2.1 泌乳的准备 | 第19页 |
1.2.2 乳汁的生成 | 第19-20页 |
1.2.3 乳蛋白 | 第20-21页 |
1.2.4 乳蛋白的信号通路 | 第21-24页 |
1.3 泌乳相关激素对乳蛋白合成及其信号通路的作用 | 第24-25页 |
1.3.1 生长激素 | 第24-25页 |
1.3.2 胰岛素样生长因子 | 第25页 |
1.3.3 催乳素 | 第25页 |
1.4 研究的目的与意义 | 第25-28页 |
2 催乳素对奶牛乳腺上皮细胞系mac-T环状RNA表达的影响 | 第28-38页 |
2.1 实验材料与试剂 | 第28-29页 |
2.1.1 实验材料 | 第28页 |
2.1.2 实验试剂 | 第28-29页 |
2.1.3 实验仪器 | 第29页 |
2.2 实验方法 | 第29-30页 |
2.2.1 细胞总RNA的提取 | 第29页 |
2.2.2 RNA质量检测 | 第29-30页 |
2.3 circRNA文库的构建 | 第30-31页 |
2.3.1 建库测序流程 | 第30页 |
2.3.2 circRNA的鉴定 | 第30-31页 |
2.4 结果与分析 | 第31-36页 |
2.4.1 奶牛乳腺上皮细胞RNA质量检验 | 第31-32页 |
2.4.2 高通量测序质量检测 | 第32-33页 |
2.4.3 数据过滤及统计 | 第33页 |
2.4.4 circRNA的长度来源分布 | 第33-34页 |
2.4.5 circRNA的差异表达分析 | 第34-36页 |
2.5 讨论 | 第36-38页 |
3 奶牛乳腺上皮细胞中circRNA的鉴定与分析 | 第38-52页 |
3.1 奶牛乳腺上皮细胞中circRNA的克隆与验证 | 第38-45页 |
3.1.1 实验材料 | 第38页 |
3.1.2 实验试剂与实验仪器 | 第38-39页 |
3.1.3 实验方法 | 第39-44页 |
3.1.4 结果与分析 | 第44-45页 |
3.2 circHIPK3的鉴定 | 第45-49页 |
3.2.1 实验材料 | 第45页 |
3.2.2 实验试剂与仪器 | 第45页 |
3.2.3 实验方法 | 第45-48页 |
3.2.4 结果与分析 | 第48-49页 |
3.3 circHIPK3的差异分析 | 第49-51页 |
3.3.1 实验材料 | 第49页 |
3.3.2 实验试剂与仪器 | 第49页 |
3.3.3 实验方法 | 第49-50页 |
3.3.4 结果与分析 | 第50-51页 |
3.4 讨论 | 第51-52页 |
4 circHIPK3对乳腺细胞增殖分化的影响 | 第52-66页 |
4.1 circHIPK3在奶牛和小鼠不同组织中的表达谱分析 | 第52-55页 |
4.1.1 实验材料 | 第52页 |
4.1.2 实验试剂及仪器 | 第52页 |
4.1.3 实验方法 | 第52-53页 |
4.1.4 结果与分析 | 第53-55页 |
4.2 circHIPK3对乳腺细胞增殖的影响 | 第55-62页 |
4.2.1 实验材料 | 第55页 |
4.2.2 实验试剂及仪器 | 第55页 |
4.2.3 实验方法 | 第55-58页 |
4.2.4 结果与分析 | 第58-62页 |
4.3 circHIPK3对乳腺细胞分化的影响 | 第62-65页 |
4.3.1 实验材料 | 第62-63页 |
4.3.2 实验试剂及仪器 | 第63页 |
4.3.3 实验方法 | 第63-64页 |
4.3.4 结果与分析 | 第64-65页 |
4.4 讨论 | 第65-66页 |
5 催乳素对circHIPK3表达量调控的机制探讨 | 第66-74页 |
5.1 STAT5inhibitor处理对乳腺上皮细胞中circHIPK3的相对表达量的影响 | 第66-68页 |
5.1.1 实验材料与试剂 | 第66页 |
5.1.2 实验试剂及仪器 | 第66页 |
5.1.3 实验方法 | 第66-67页 |
5.1.4 结果与分析 | 第67-68页 |
5.2 STAT5inhibitor处理对乳腺上皮细胞增殖的影响 | 第68-70页 |
5.2.1 实验材料 | 第68页 |
5.2.2 实验试剂及仪器 | 第68页 |
5.2.3 实验方法 | 第68-69页 |
5.2.4 结果与分析 | 第69-70页 |
5.3 SRPKs、ADAR、ILF3对乳腺上皮细胞中circHIPK3形成的影响 | 第70-72页 |
5.3.1 实验材料 | 第71页 |
5.3.2 实验试剂及仪器 | 第71页 |
5.3.3 实验方法 | 第71页 |
5.3.4 结果与分析 | 第71-72页 |
5.4 讨论 | 第72-74页 |
6 结论与创新点 | 第74-76页 |
6.1 结论 | 第74页 |
6.2 创新点 | 第74-76页 |
参考文献 | 第76-86页 |
附录 | 第86-94页 |
附录1 实验试剂和仪器 | 第86-88页 |
附录2 实验所用引物 | 第88-89页 |
附录3 WesternBlot相关试剂的制备 | 第89-90页 |
附录4 WesternBlot实验步骤 | 第90-94页 |
致谢 | 第94-96页 |
作者简历 | 第96-98页 |
学位论文数据集 | 第98页 |