| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 绪论 | 第9-16页 |
| 1.1 课题的意义及研究背景 | 第9页 |
| 1.2 微生物重金属抗性机制的研究 | 第9-12页 |
| 1.2.1 微生物对重金属的吸附及沉淀作用 | 第10页 |
| 1.2.2 微生物对重金属的络合解毒机制 | 第10-11页 |
| 1.2.3 微生物的重金属抗性基因 | 第11-12页 |
| 1.3 高通量测序技术 | 第12-14页 |
| 1.3.1 高通量测序的简介 | 第12-13页 |
| 1.3.2 高通量测序技术在微生物转录组学中的应用 | 第13-14页 |
| 1.4 本研究的目的和主要内容 | 第14-16页 |
| 1.4.1 本研究的目的 | 第14页 |
| 1.4.2 本研究的主要内容 | 第14-16页 |
| 第2章 Cu~(2+)胁迫下南极酵母AN5 转录组学研究 | 第16-32页 |
| 2.1 引言 | 第16页 |
| 2.2 实验材料 | 第16-17页 |
| 2.2.1 菌种 | 第16页 |
| 2.2.2 试剂 | 第16页 |
| 2.2.3 主要仪器设备 | 第16-17页 |
| 2.3 实验方法 | 第17-19页 |
| 2.3.1 样品处理 | 第17页 |
| 2.3.2 RNA的提取和检测 | 第17-18页 |
| 2.3.3 高通量转录组测序 | 第18页 |
| 2.3.4 荧光定量PCR | 第18-19页 |
| 2.4 结果与分析 | 第19-30页 |
| 2.4.1 cDNA文库的制备 | 第19-20页 |
| 2.4.2 原始数据产出统计 | 第20页 |
| 2.4.3 转录本组装 | 第20-22页 |
| 2.4.4 Unigene表达水平分析 | 第22-24页 |
| 2.4.5 基因序列的功能注释 | 第24-28页 |
| 2.4.6 荧光定量PCR结果分析 | 第28-30页 |
| 2.5 讨论 | 第30页 |
| 2.6 本章小结 | 第30-32页 |
| 第3章 WD重复蛋白基因的克隆表达及纯化 | 第32-49页 |
| 3.1 引言 | 第32页 |
| 3.2 实验材料 | 第32-33页 |
| 3.2.1 菌株与质粒 | 第32页 |
| 3.2.2 药品和试剂 | 第32-33页 |
| 3.2.3 培养基的配制 | 第33页 |
| 3.2.4 主要仪器与设备 | 第33页 |
| 3.3 实验方法 | 第33-40页 |
| 3.3.1 目的基因的克隆 | 第33-35页 |
| 3.3.2 目的基因的生物信息学分析 | 第35页 |
| 3.3.3 目的蛋白的表达 | 第35-38页 |
| 3.3.4 目的蛋白的纯化 | 第38-40页 |
| 3.4 结果与分析 | 第40-47页 |
| 3.4.1 南极酵母RNA的提取 | 第40页 |
| 3.4.2 目的基因的PCR扩增 | 第40-41页 |
| 3.4.3 目的基因的克隆 | 第41页 |
| 3.4.4 重组表达载体双酶切鉴定 | 第41页 |
| 3.4.5 目的基因的生物信息学分析 | 第41-45页 |
| 3.4.6 目的蛋白的表达和表达条件的优化 | 第45-47页 |
| 3.4.7 目的蛋白的纯化 | 第47页 |
| 3.5 讨论 | 第47-48页 |
| 3.6 本章小结 | 第48-49页 |
| 第4章 GST基因克隆与生物信息学分析 | 第49-55页 |
| 4.1 引言 | 第49页 |
| 4.2 实验材料 | 第49页 |
| 4.3 实验方法 | 第49页 |
| 4.3.1 GST基因的克隆 | 第49页 |
| 4.3.2 生物信息学分析 | 第49页 |
| 4.4 结果与分析 | 第49-54页 |
| 4.4.1 GST基因的PCR扩增 | 第49-50页 |
| 4.4.2 菌落PCR验证 | 第50页 |
| 4.4.3 GST基因的生物信息学分析 | 第50-54页 |
| 4.5 讨论 | 第54页 |
| 4.6 本章小结 | 第54-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63页 |