| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 1 前言 | 第10-15页 |
| 1.1 PEDV的根源 | 第10页 |
| 1.2 PED流行病学 | 第10页 |
| 1.3 PEDV基因结构 | 第10-11页 |
| 1.4 PEDV主要结构蛋白功能 | 第11-12页 |
| 1.5 PEDV非结构蛋白功能 | 第12页 |
| 1.6 PEDV细胞表面受体研究进展 | 第12页 |
| 1.7 PEDV繁殖与装配 | 第12-13页 |
| 1.8 假病毒研究进展 | 第13-14页 |
| 1.9 研究目的及意义 | 第14-15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-28页 |
| 2.1 材料 | 第15-17页 |
| 2.1.1 毒株、细胞、工程菌以及质粒 | 第15页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第15页 |
| 2.1.3 实验主要试剂 | 第15页 |
| 2.1.4 试剂配制 | 第15-17页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第17页 |
| 2.2 试验方法 | 第17-28页 |
| 2.2.1 PEDV全病毒多克隆抗体的制备 | 第17-18页 |
| 2.2.2 PEDV全病毒多抗的生物活性及效价检测 | 第18-19页 |
| 2.2.3 PEDV感染靶细胞猪小肠上皮细胞(IEC) | 第19-21页 |
| 2.2.4 PEDV S1真核表达载体的构建 | 第21-23页 |
| 2.2.5 PEDV伪型病毒VSVAG*PEDV S1的构建 | 第23-26页 |
| 2.2.6 利用PEDV伪型病毒对被感染IEC细胞中S1蛋白的定位研究 | 第26-28页 |
| 3 实验结果 | 第28-39页 |
| 3.1 PEDV多克隆抗体制备 | 第28页 |
| 3.1.1 PEDV繁殖培养 | 第28页 |
| 3.1.2 PEDV梯度密度离心 | 第28页 |
| 3.2 PEDV全病毒多抗的生物活性及效价检测 | 第28-30页 |
| 3.2.1 间接ELISA检测 | 第28-29页 |
| 3.2.2 间接免疫荧光检测 | 第29-30页 |
| 3.3 PEDV感染靶细胞IEC | 第30-32页 |
| 3.3.1 反转录PCR检测 | 第30页 |
| 3.3.2 间接免疫荧光检测 | 第30-31页 |
| 3.3.3 电镜检测 | 第31-32页 |
| 3.4 PEDV S1真核表达载体的构建 | 第32-33页 |
| 3.4.1 酶切获取PEDV S1片段 | 第32页 |
| 3.4.2 鉴定pcDNA3.1-PEDV S1 | 第32-33页 |
| 3.5 PEDV伪型病毒VSVΔG~*PEDV S1的构建 | 第33-37页 |
| 3.5.1 稳定表达S1细胞系的建立 | 第33-36页 |
| 3.5.2 PEDV伪型病毒VSVΔG~*S1的鉴定 | 第36-37页 |
| 3.6 利用PEDV伪型病毒对被感染IEC细胞中S1蛋白的定位研究 | 第37-39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| 4.1 PEDV全病毒多克隆抗体的制备 | 第39页 |
| 4.2 PEDV感染IEC细胞的研究 | 第39-40页 |
| 4.3 PEDV S1蛋白指导PEDV伪型病毒进入细胞 | 第40-41页 |
| 5 结论 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第47页 |
