| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-22页 |
| 1.1 白介素-18(interleukin-18,IL-18)的研究进展 | 第12-15页 |
| 1.1.1 IL-18的结构特点 | 第12-13页 |
| 1.1.2 IL-18的受体及信号传导 | 第13页 |
| 1.1.3 IL-18的生物学活性 | 第13-15页 |
| 1.2 γ-干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)的研究进展 | 第15-19页 |
| 1.2.1 γ-干扰素的结构特点 | 第16页 |
| 1.2.2 γ干扰素受体及其信号传导机制 | 第16-17页 |
| 1.2.3 干扰素的生物学活性 | 第17-19页 |
| 1.2.4 γ干扰素的应用及发展前景 | 第19页 |
| 1.3 乳酸乳球菌作为宿主菌表达外源蛋白的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.3.1 乳酸乳球菌的益生作用 | 第19-20页 |
| 1.3.2 乳酸乳球菌作为表达载体宿主菌的优越性 | 第20页 |
| 1.3.3 乳酸乳球菌作为表达载体的应用 | 第20-21页 |
| 1.4 研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-36页 |
| 2.1 材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 病毒与细胞 | 第22页 |
| 2.1.2 质粒、菌种与疫苗 | 第22页 |
| 2.1.3 实验动物 | 第22页 |
| 2.1.4 引物 | 第22页 |
| 2.1.5 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.6 主要实验仪器与设备 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-36页 |
| 2.2.1 pIL-18和pIFN-γ基因的获得 | 第23-25页 |
| 2.2.2 表达pIL-18和pIFN-γ重组大肠杆菌的构建 | 第25-28页 |
| 2.2.3 多克隆抗血清的制备 | 第28-29页 |
| 2.2.4 表达pIL-18和pIFN-γ重组乳酸乳球菌的构建 | 第29-32页 |
| 2.2.5 重组乳酸乳球菌的诱导表达及鉴定 | 第32页 |
| 2.2.6 pIL-18和pIFN-γ抗病毒活性的检测 | 第32-33页 |
| 2.2.7 pIL-18和pIFN-γ作为免疫佐剂的效果分析 | 第33-36页 |
| 3 结果 | 第36-47页 |
| 3.1 目的基因pIL-18和pIFN-γ的获得 | 第36-37页 |
| 3.1.1 PCR扩增结果 | 第36页 |
| 3.1.2 pMD18-T-pIL-18、pMD18-T-pIFN-γ的质粒鉴定结果 | 第36-37页 |
| 3.2 表达pIL-18和pIFN-γ重组大肠杆菌的鉴定结果 | 第37-38页 |
| 3.3 pIL-18、pIFN-γ在大肠杆菌中的诱导表达结果 | 第38-39页 |
| 3.4 间接ELISA检测血清抗体效价结果 | 第39页 |
| 3.5 重组乳酸乳球菌表达系统的构建 | 第39-40页 |
| 3.5.1 重组乳酸乳球菌的鉴定结果 | 第39-40页 |
| 3.6 pIL-18和pIFN-γ在重组乳酸乳球菌的表达及鉴定结果 | 第40-42页 |
| 3.6.1 SDS-PAGE结果 | 第40-41页 |
| 3.6.2 Western-blot鉴定结果 | 第41-42页 |
| 3.7 生物活性检测结果 | 第42-47页 |
| 3.7.1 MTT法检测抗病毒活性结果 | 第43页 |
| 3.7.2 血清中特异性抗体IgG的检测 | 第43-44页 |
| 3.7.3 脾淋巴细胞增殖试验结果 | 第44页 |
| 3.7.4 细胞中和试验结果 | 第44-45页 |
| 3.7.5 攻毒保护试验结果 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| 4.1 乳酸乳球菌分泌表达系统作为递呈载体的优势 | 第47页 |
| 4.2 猪白介素-18和猪γ-干扰素抗病毒活性的分析 | 第47-48页 |
| 4.3 猪白介素18和猪γ干扰素对疫苗的免疫增强效应分析 | 第48-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 附录 | 第58-62页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第62页 |
