| 摘要 | 第4-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 英文缩略语 | 第13-17页 |
| 1 引言 | 第17-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要仪器与设备 | 第24-25页 |
| 2.1.4 主要溶液的配置 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-35页 |
| 2.2.1 细胞复苏、培养与冻存 | 第26页 |
| 2.2.2 含目的基因的选择复制型腺病毒的构建及验证 | 第26-31页 |
| 2.2.3 致细胞病变效应（cytopathic effect,CPE）的评估及细胞复制 | 第31-32页 |
| 2.2.4 MTT实验 | 第32页 |
| 2.2.5 酶活性实验 | 第32页 |
| 2.2.6 流式细胞检测技术 | 第32-33页 |
| 2.2.7 旁观者效应实验 | 第33页 |
| 2.2.8 裸鼠成瘤 | 第33页 |
| 2.2.9 统计分析方法 | 第33-35页 |
| 3 结果 | 第35-50页 |
| 3.1 成功构建携带目的基因的选择复制型腺病毒 | 第35-36页 |
| 3.2 目的基因的表达及酶活性的检测 | 第36-39页 |
| 3.2.1 RNA水平检测重组腺病毒中目的基因表达。 | 第36-37页 |
| 3.2.2 蛋白水平验证目的基因的表达 | 第37-39页 |
| 3.2.3 P74-dNK和P74-dNK-CD40L酶活性鉴定 | 第39页 |
| 3.3 溶瘤腺病毒在乳腺癌细胞系中的瘤裂解作用 | 第39-42页 |
| 3.3.1 乳腺癌细胞系感染选择复制型腺病毒后瘤裂解效应及病毒复制 | 第39-41页 |
| 3.3.2 MTT定量分析瘤裂解作用 | 第41-42页 |
| 3.4 Dm-dNK联合BVDU对乳腺癌细胞杀伤作用,CD40L对CD40阳性乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞杀伤作用 | 第42-44页 |
| 3.4.1 多重杀伤体系中自杀基因杀伤系统 | 第42-43页 |
| 3.4.2 多重杀伤体系中CD40L-CD40交互作用的评估。 | 第43-44页 |
| 3.5 共表达Dm-dNK和CD40L基因的溶瘤腺病毒联合BVDU对乳腺癌细胞的杀伤作用,其通过诱导凋亡和旁观者效应发挥作用 | 第44-47页 |
| 3.6 BVDU抑制携带目的基因的溶瘤腺病毒复制 | 第47-48页 |
| 3.7 携带自杀基因Dm-dNK和CD40L的溶瘤腺病毒联合核苷酸类似物BVDU对裸鼠移植瘤的抑制作用 | 第48-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 综述 | 第63-82页 |
| 参考文献 | 第74-82页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 个人简历 | 第84页 |
