| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 英文缩略语 | 第11-15页 |
| 第一部分 ：比较蛋白质组学DIGE和SILAC明确PGAM1在高侵袭胰腺癌细胞系中表达上调 | 第15-32页 |
| 1 前言 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-24页 |
| 2.1 主要试剂和仪器 | 第16-18页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第16-18页 |
| 2.1.2 主要仪器与设备 | 第18页 |
| 2.2 研究对象和分组 | 第18-19页 |
| 2.3 研究方法 | 第19-24页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第19页 |
| 2.3.2 荧光差异双向电泳技术(DIGE) | 第19-20页 |
| 2.3.3 细胞培养稳定同位素标记技术(SILAC) | 第20-22页 |
| 2.3.4 生物信息学分析 | 第22页 |
| 2.3.5 Western-blot | 第22-23页 |
| 2.3.6 统计分析 | 第23-24页 |
| 3 结果 | 第24-29页 |
| 3.1 DIGE和SILAC鉴定和定量差异表达的蛋白质 | 第24页 |
| 3.2 GeneOntology分析、KEGG分析和PPI分析 | 第24-29页 |
| 3.3 Western-blot验证差异表达的蛋白质在不同侵袭转移能力的胰腺癌细胞系中的表达 | 第29页 |
| 4 讨论 | 第29-31页 |
| 5 结论 | 第31-32页 |
| 第二部分 ：PGAM1在胰腺癌组织中的表达和临床意义以及siRNA沉默PGAM1对胰腺癌细胞生物学功能的影响 | 第32-53页 |
| 6 前言 | 第32-33页 |
| 7 材料和方法 | 第33-41页 |
| 7.1 主要试剂和仪器 | 第33-36页 |
| 7.1.1 研究对象 | 第33页 |
| 7.1.2 主要试剂 | 第33-35页 |
| 7.1.3 主要仪器与设备 | 第35-36页 |
| 7.1.4 实验细胞 | 第36页 |
| 7.2 方法 | 第36-41页 |
| 7.2.1 免疫组化二步法染色 | 第36页 |
| 7.2.2 结果判定 | 第36-37页 |
| 7.2.3 细胞培养方法 | 第37-38页 |
| 7.2.4 siRNA瞬时转染 | 第38页 |
| 7.2.5 蛋白提取 | 第38页 |
| 7.2.6 Western-blot | 第38-40页 |
| 7.2.7 CCK-8分析 | 第40页 |
| 7.2.8 细胞凋亡检测 | 第40页 |
| 7.2.9 细胞周期检测 | 第40-41页 |
| 7.2.10 Transwell分析 | 第41页 |
| 7.2.11 统计学处理 | 第41页 |
| 8 结果 | 第41-46页 |
| 8.1 免疫组化检测PGAM1在胰腺癌及癌旁组织中的表达差异 | 第41-42页 |
| 8.2 免疫组化检测PGAM1在不同分化程度胰腺癌组织中的表达差异 | 第42-43页 |
| 8.3 免疫组化检测PGAM1在胰腺癌原位组织及转移灶组织中的表达差异 | 第43-44页 |
| 8.4 siRNA沉默Aspc-1和Panc-1细胞中PGAM1的表达。 | 第44页 |
| 8.5 PGAM1对胰腺癌细胞增殖的影响 | 第44-45页 |
| 8.6 PGAM1对胰腺癌细胞周期和凋亡的作用 | 第45-46页 |
| 8.7 PGAM1对胰腺癌细胞迁移和侵袭的影响 | 第46页 |
| 9 讨论 | 第46-52页 |
| 10 结论 | 第52-53页 |
| 第三部分 ：PGAM1作为PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α通路和Wnt/β-catenin通路的关键节点调控胰腺癌恶性行为 | 第53-69页 |
| 11 前言 | 第53页 |
| 12 材料和方法 | 第53-59页 |
| 12.1 主要试剂和仪器 | 第53-56页 |
| 12.1.1 主要试剂 | 第53-55页 |
| 12.1.2 主要仪器与设备 | 第55页 |
| 12.1.3 细胞系 | 第55-56页 |
| 12.2 研究方法 | 第56-59页 |
| 12.2.1 细胞瞬时转染 | 第56页 |
| 12.2.2 抑制剂干预 | 第56页 |
| 12.2.3 蛋白提取 | 第56-57页 |
| 12.2.4 Western-blot | 第57-58页 |
| 12.2.5 免疫荧光 | 第58页 |
| 12.2.6 统计学处理 | 第58-59页 |
| 13 结果 | 第59-61页 |
| 13.1 Western-blot验证PGAM1受到PI3K/Akt信号转导通路调控 | 第59页 |
| 13.2 Western-blot验证PGAM1受到mTOR信号转导通路调控 | 第59-60页 |
| 13.3 PGAM1与HIF-1α之间存在正向相互调控作用 | 第60页 |
| 13.4 免疫荧光验证PGAM1与HIF-1α有相互正向调节关系 | 第60页 |
| 13.5 PGAM1可以促进胰腺癌细胞株的上皮间质转化(EMT) | 第60-61页 |
| 13.6 PGAM1与Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路之间的相互作用 | 第61页 |
| 14 讨论 | 第61-68页 |
| 15 结论 | 第68-69页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-81页 |
| 综述 | 第81-93页 |
| 参考文献 | 第89-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
| 个人简历 | 第94-95页 |
| 在学期间科研成绩 | 第95页 |
