摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩写表 | 第8-13页 |
1 文献综述 | 第13-21页 |
1.1 淀粉的分类 | 第13页 |
1.2 淀粉的生物合成 | 第13-14页 |
1.3 淀粉生物合成关键酶 | 第14-18页 |
1.3.1 腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase) | 第15页 |
1.3.2 淀粉合成酶(SS) | 第15-16页 |
1.3.3 淀粉分支酶(SBE) | 第16-17页 |
1.3.4 淀粉去分支酶(DBE) | 第17页 |
1.3.5 淀粉磷酸化酶(PHO) | 第17-18页 |
1.4 淀粉合成相关基因的转录调控研究进展 | 第18-19页 |
1.4.1 转录因子研究背景 | 第18页 |
1.4.2 转录因子调控淀粉合成相关基因的研究进展 | 第18-19页 |
1.5 GRAS和AP2/EREBP转录因子家族在植物中的研究现状 | 第19-20页 |
1.6 本研究的意义 | 第20-21页 |
2 实验材料与方法 | 第21-37页 |
2.1 实验材料 | 第21-22页 |
2.1.1 植物材料 | 第21-22页 |
2.1.2 菌株及载体 | 第22页 |
2.1.3 酶及试剂 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-37页 |
2.2.1 GRAS和AP2/EREBP转录因子进化分析 | 第22-23页 |
2.2.2 目的基因的克隆 | 第23-27页 |
2.2.3 半定量RT-PCR | 第27-28页 |
2.2.4 实时荧光定量PCR (Real-Time PCR) | 第28-29页 |
2.2.5 亚细胞定位 | 第29-30页 |
2.2.6 转录激活活性分析 | 第30-31页 |
2.2.7 启动子克隆及活性验证 | 第31-34页 |
2.2.8 瞬时表达实验 | 第34页 |
2.2.9 酵母单杂交实验 | 第34-35页 |
2.2.10 过表达玉米植株的获得 | 第35-37页 |
3 实验结果与分析 | 第37-56页 |
3.1 GRAS和AP2/EREBP转录因子进化分析 | 第37-39页 |
3.1.1 玉米GRAS基因家族进化分析 | 第37-39页 |
3.1.2 不同物种间的AP2/EREBP基因进化分析 | 第39页 |
3.2 转录因子ZmGRAS20和ZmEREB26的克隆及序列特征分析 | 第39-44页 |
3.2.1 ZmGRAS20和ZmEREB26基因的共相关分析 | 第39-41页 |
3.2.2 ZmGRAS20和ZmEREB26基因的克隆 | 第41页 |
3.2.3 ZmGRAS20和ZmEREB26基因的保守结构域分析 | 第41-44页 |
3.3 ZmGRAS20和ZmEREB26基因的表达模式分析 | 第44-45页 |
3.3.1 RNA提取结果检测 | 第44页 |
3.3.2 ZmGRAS20和ZmEREB26在玉米不同组织中的特异性表达分析 | 第44-45页 |
3.3.3 ZmGRAS20和ZmEREB26在玉米授粉后不同时期籽粒中的特异性表达分析 | 第45页 |
3.4 ZmGRAS20和ZmEREB26基因编码蛋白的亚细胞定位 | 第45-46页 |
3.5 ZmGRAS20和ZmEREB26基因编码蛋白的转录激活活性分析 | 第46-47页 |
3.6 转录因子ZmGRAS20和ZmEREB26与玉米淀粉合成关键酶基因启动子间的作用模式 | 第47-54页 |
3.6.1 淀粉合成关键酶基因ISA1、ISA2启动子的克隆及活性验证 | 第47-49页 |
3.6.2 转录因子ZmGRAS20和ZmEREB26与玉米淀粉合成关键酶基因启动子的活性分析 | 第49-50页 |
3.6.3 转录因子ZmGRAS20和ZmEREB26与玉米淀粉合成关键酶基因启动子的结合作用 | 第50-54页 |
3.7 ZmEREB26过表达玉米植株的获得 | 第54-56页 |
3.7.1 载体构建 | 第54页 |
3.7.2 侵染及转化苗的获得 | 第54-55页 |
3.7.3 ZmEREB26过表达玉米植株的鉴定 | 第55-56页 |
4 讨论 | 第56-61页 |
4.1 GRAS和AP2/EREBP转录因子家族成员可调控植物生理代谢活动 | 第56-57页 |
4.2 转录因子ZmGRAS20和ZmEREB26可能参与玉米淀粉生物合成的分子调控 | 第57-60页 |
4.3 后续实验研究思路 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-70页 |
附录 | 第70-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第72页 |