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猪流感病毒荧光定量检测方法的建立及临床应用

符号说明第5-9页
中文摘要第9-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-21页
    1.1 病毒的理化特性与结构第12-13页
        1.1.1 病毒的理化特性第12页
        1.1.2 病毒的形态结构第12-13页
    1.2 病毒的生物学特性第13页
        1.2.1 血凝性第13页
        1.2.2 抗原性第13页
        1.2.3 增值特性第13页
    1.3 病毒的基因组结构及编码蛋白第13-17页
        1.3.1 RNA聚合酶(Polymerase)第14页
        1.3.2 核蛋白(Nucleoprotein,NP)第14-15页
        1.3.3 血凝素蛋白(Hemagglutinin,HA)第15页
        1.3.4 神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)第15-16页
        1.3.5 基质蛋白(Matrix,M)第16页
        1.3.6 非结构蛋白(Nonstructuralprotein,NS)第16-17页
    1.4 猪流感的变异第17-18页
        1.4.1 抗原漂移第17页
        1.4.2 抗原转变第17-18页
    1.5 猪流感的世界流行情况第18-19页
    1.6 流感的公共卫生意义第19-20页
        1.6.1 猪流感的兽医公共卫生意义第19-20页
        1.6.2 猪流感的人类公共卫生意义第20页
    1.7 本研究的目的和意义第20-21页
    1.8 本研究的的特点和创新之处第21页
2 材料和方法第21-35页
    2.1 材料第21-23页
        2.1.1 实验地点第21页
        2.1.2 毒株和病料第21页
        2.1.3 菌种、质粒与鸡胚第21页
        2.1.4 主要试剂第21-22页
        2.1.5 主要仪器第22页
        2.1.6 实验中配置的试剂第22-23页
    2.2 方法第23-35页
        2.2.1 标准品的制备第23-28页
        2.2.2 荧光定量PCR标准曲线的建立第28-30页
        2.2.3 SIV荧光定量PCR检测方法的初步应用第30-32页
        2.2.4 一株分离病毒全基因克隆及鉴定第32-35页
3 结果与分析第35-47页
    3.1 荧光定定量PCR检测方法的建立结果第35-41页
        3.1.1 NP基因片段PCR扩增第35页
        3.1.2 重组质粒的鉴定第35-36页
        3.1.3 标准品的制备及拷贝数测定第36页
        3.1.4 荧光定量PCR反应最佳条件第36页
        3.1.5 荧光定量PCR标准曲线的建立第36-37页
        3.1.6 特异性试验第37-38页
        3.1.7 敏感性第38-40页
        3.1.8 重复性和稳定性第40页
        3.1.9 荧光定量PCR方法检测临床病料第40-41页
    3.2 一株分离病毒全基因克隆及鉴定第41-47页
        3.2.1 RT-PCR结果第41页
        3.2.2 全基因组的测序及序列分析第41-44页
        3.2.3 病毒分子特性分析第44-47页
4 讨论第47-49页
    4.1 猪流感的感染现状第47页
    4.2 SIV荧光定量PCR检测方法的建立第47-48页
    4.3 分离株全基因克隆及鉴定第48-49页
5 结论第49-50页
参考文献第50-55页
致谢第55页

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