符号说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-23页 |
1.1 马铃薯产业与现状 | 第12-13页 |
1.1.1 马铃薯的来源和特性 | 第12页 |
1.1.2 马铃薯的发展现状 | 第12-13页 |
1.1.3 马铃薯产业面临的病害问题 | 第13页 |
1.2 马铃薯晚疫病病害 | 第13-17页 |
1.2.1 致病疫霉的研究进展 | 第13-14页 |
1.2.2 马铃薯晚疫病病原的基本形态 | 第14页 |
1.2.3 马铃薯晚疫病病原菌的传播途径 | 第14-15页 |
1.2.4 马铃薯晚疫病的病害症状 | 第15页 |
1.2.5 马铃薯晚疫病流行的原因 | 第15页 |
1.2.6 马铃薯晚疫病的防治措施 | 第15-17页 |
1.2.6.1 农业防治 | 第15-16页 |
1.2.6.2 化学防治 | 第16页 |
1.2.6.3 生物防治 | 第16-17页 |
1.3 植物与病原互作模型 | 第17-19页 |
1.3.1 基因对基因假说 | 第17页 |
1.3.2 警戒假说 | 第17页 |
1.3.3 “诱饵”假说 | 第17-18页 |
1.3.4 Zigzag理论 | 第18页 |
1.3.5 R基因和Avr基因的识别 | 第18-19页 |
1.4 马铃薯晚疫病菌RxLR效应分子的研究进展 | 第19-21页 |
1.4.1 马铃薯晚疫病菌RxLR效应分子的毒性靶标 | 第19-20页 |
1.4.2 马铃薯晚疫病菌RxLR效应分子作为无毒因子与抗病基因的识别 | 第20页 |
1.4.3 马铃薯晚疫病菌RxLR效应分子对植物免疫机制的调控 | 第20-21页 |
1.5 非寄主抗性 | 第21-23页 |
1.5.1 植物非寄主抗性 | 第21-22页 |
1.5.2 植物非寄主抗性产生的机理 | 第22页 |
1.5.3 龙葵与晚疫病菌的非寄主互作 | 第22-23页 |
1.6 PITG_15718.2的研究进展 | 第23页 |
1.7 本研究的目的与意义 | 第23页 |
2 材料与方法 | 第23-31页 |
2.1 实验材料 | 第23-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-31页 |
2.2.1 DNA的提取 | 第24-25页 |
2.2.2 基因的克隆及载体的构建 | 第25-28页 |
2.2.2.1 设计引物 | 第25页 |
2.2.2.2 PCR扩增目的片段 | 第25页 |
2.2.2.3 DNA凝胶回收 | 第25-26页 |
2.2.2.4 酶切和连接 | 第26页 |
2.2.2.5 热激转化大肠杆菌DH5α | 第26页 |
2.2.2.6 菌落PCR | 第26-27页 |
2.2.2.7 质粒PCR | 第27页 |
2.2.2.8 农杆菌电击转化 | 第27页 |
2.2.2.9 Gateway载体构建的原理及步骤 | 第27-28页 |
2.2.3 本氏烟和龙葵上的瞬时表达及检测 | 第28页 |
2.2.4 黑麦培养基的制备 | 第28页 |
2.2.5 马铃薯晚疫病菌株的培养和孢子悬浮液的制备 | 第28页 |
2.2.6 马铃薯晚疫病菌接种供试植株 | 第28-29页 |
2.2.7 植物总RNA的提取 | 第29页 |
2.2.8 反转录PCR | 第29页 |
2.2.9 Real-timePCR | 第29-30页 |
2.2.10 茎段转化法培育转基因马铃薯 | 第30页 |
2.2.11 亚细胞定位 | 第30-31页 |
2.2.12 Western-blot | 第31页 |
2.2.12.1 植物蛋白的提取 | 第31页 |
2.2.12.2 蛋白杂交 | 第31页 |
3 结果与分析 | 第31-43页 |
3.1 PITG_15718.2~(88069)N-端特异性抑制在龙葵上诱发的抗性 | 第31-33页 |
3.2 PITG_15718.2~(88069)N-端在本氏烟上不能抑制某些效应分子触发的PTI和ETI | 第33-34页 |
3.3 PITG_15718.2超量表达载体的构建 | 第34-35页 |
3.4 PITG_15718.2促进马铃薯晚疫病在本氏烟中的定殖 | 第35-36页 |
3.5 PITG_15718.2在马铃薯内的致病性验证 | 第36-42页 |
3.5.1 马铃薯遗传转化 | 第36-37页 |
3.5.2 马铃薯转基因植株不同水平检测 | 第37-38页 |
3.5.3 转基因马铃薯对晚疫病菌更加感病 | 第38-39页 |
3.5.4 转基因植株SA、JA、ET信号相关路径的分析 | 第39-41页 |
3.5.5 转基因植株与Desiree株高的分析 | 第41-42页 |
3.6 PITG_15718.2定位在细胞质膜上 | 第42-43页 |
4 讨论 | 第43-46页 |
4.1 效应分子PITG_15718.2的功能 | 第43-44页 |
4.2 PITG_15718.2~(88069)N-端对植物PTI和ETI的研究 | 第44-45页 |
4.3 PITG_15718.2~(HLJ)参与植物防御信号路径的探究 | 第45-46页 |
4.4 下一步研究的问题 | 第46页 |
5 结论 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-55页 |
附录Ⅰ | 第55-58页 |
附录Ⅱ | 第58-59页 |
附录Ⅲ | 第59-60页 |
附录Ⅳ | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |