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PITG15718.2在转基因马铃薯中的功能分析

符号说明第4-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-23页
    1.1 马铃薯产业与现状第12-13页
        1.1.1 马铃薯的来源和特性第12页
        1.1.2 马铃薯的发展现状第12-13页
        1.1.3 马铃薯产业面临的病害问题第13页
    1.2 马铃薯晚疫病病害第13-17页
        1.2.1 致病疫霉的研究进展第13-14页
        1.2.2 马铃薯晚疫病病原的基本形态第14页
        1.2.3 马铃薯晚疫病病原菌的传播途径第14-15页
        1.2.4 马铃薯晚疫病的病害症状第15页
        1.2.5 马铃薯晚疫病流行的原因第15页
        1.2.6 马铃薯晚疫病的防治措施第15-17页
            1.2.6.1 农业防治第15-16页
            1.2.6.2 化学防治第16页
            1.2.6.3 生物防治第16-17页
    1.3 植物与病原互作模型第17-19页
        1.3.1 基因对基因假说第17页
        1.3.2 警戒假说第17页
        1.3.3 “诱饵”假说第17-18页
        1.3.4 Zigzag理论第18页
        1.3.5 R基因和Avr基因的识别第18-19页
    1.4 马铃薯晚疫病菌RxLR效应分子的研究进展第19-21页
        1.4.1 马铃薯晚疫病菌RxLR效应分子的毒性靶标第19-20页
        1.4.2 马铃薯晚疫病菌RxLR效应分子作为无毒因子与抗病基因的识别第20页
        1.4.3 马铃薯晚疫病菌RxLR效应分子对植物免疫机制的调控第20-21页
    1.5 非寄主抗性第21-23页
        1.5.1 植物非寄主抗性第21-22页
        1.5.2 植物非寄主抗性产生的机理第22页
        1.5.3 龙葵与晚疫病菌的非寄主互作第22-23页
    1.6 PITG_15718.2的研究进展第23页
    1.7 本研究的目的与意义第23页
2 材料与方法第23-31页
    2.1 实验材料第23-24页
    2.2 实验方法第24-31页
        2.2.1 DNA的提取第24-25页
        2.2.2 基因的克隆及载体的构建第25-28页
            2.2.2.1 设计引物第25页
            2.2.2.2 PCR扩增目的片段第25页
            2.2.2.3 DNA凝胶回收第25-26页
            2.2.2.4 酶切和连接第26页
            2.2.2.5 热激转化大肠杆菌DH5α第26页
            2.2.2.6 菌落PCR第26-27页
            2.2.2.7 质粒PCR第27页
            2.2.2.8 农杆菌电击转化第27页
            2.2.2.9 Gateway载体构建的原理及步骤第27-28页
        2.2.3 本氏烟和龙葵上的瞬时表达及检测第28页
        2.2.4 黑麦培养基的制备第28页
        2.2.5 马铃薯晚疫病菌株的培养和孢子悬浮液的制备第28页
        2.2.6 马铃薯晚疫病菌接种供试植株第28-29页
        2.2.7 植物总RNA的提取第29页
        2.2.8 反转录PCR第29页
        2.2.9 Real-timePCR第29-30页
        2.2.10 茎段转化法培育转基因马铃薯第30页
        2.2.11 亚细胞定位第30-31页
        2.2.12 Western-blot第31页
            2.2.12.1 植物蛋白的提取第31页
            2.2.12.2 蛋白杂交第31页
3 结果与分析第31-43页
    3.1 PITG_15718.2~(88069)N-端特异性抑制在龙葵上诱发的抗性第31-33页
    3.2 PITG_15718.2~(88069)N-端在本氏烟上不能抑制某些效应分子触发的PTI和ETI第33-34页
    3.3 PITG_15718.2超量表达载体的构建第34-35页
    3.4 PITG_15718.2促进马铃薯晚疫病在本氏烟中的定殖第35-36页
    3.5 PITG_15718.2在马铃薯内的致病性验证第36-42页
        3.5.1 马铃薯遗传转化第36-37页
        3.5.2 马铃薯转基因植株不同水平检测第37-38页
        3.5.3 转基因马铃薯对晚疫病菌更加感病第38-39页
        3.5.4 转基因植株SA、JA、ET信号相关路径的分析第39-41页
        3.5.5 转基因植株与Desiree株高的分析第41-42页
    3.6 PITG_15718.2定位在细胞质膜上第42-43页
4 讨论第43-46页
    4.1 效应分子PITG_15718.2的功能第43-44页
    4.2 PITG_15718.2~(88069)N-端对植物PTI和ETI的研究第44-45页
    4.3 PITG_15718.2~(HLJ)参与植物防御信号路径的探究第45-46页
    4.4 下一步研究的问题第46页
5 结论第46-48页
参考文献第48-55页
附录Ⅰ第55-58页
附录Ⅱ第58-59页
附录Ⅲ第59-60页
附录Ⅳ第60-61页
致谢第61页

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