中文摘要 | 第10-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
1 引言 | 第13-30页 |
1.1 多粘类芽孢杆菌的研究概况 | 第13-16页 |
1.1.1 多粘类芽孢杆菌的生物学特性 | 第13页 |
1.1.2 多粘类芽孢杆菌的研究进展 | 第13-16页 |
1.1.2.1 多粘类芽孢杆菌在农业中的应用 | 第13-15页 |
1.1.2.3 多粘类芽孢杆菌在医药上中的应用 | 第15-16页 |
1.2 多粘类芽孢杆菌产抗菌物质的研究进展和应用现状 | 第16-22页 |
1.2.1 多肽类 | 第16-21页 |
1.2.1.1 多粘菌素 | 第16-18页 |
1.2.1.2 环杆菌素 | 第18-19页 |
1.2.1.3 paenibacillin | 第19页 |
1.2.1.4 乔利肽菌素 | 第19页 |
1.2.1.5 Gavaserin和Salta vidin | 第19页 |
1.2.1.6 多肽菌素 | 第19页 |
1.2.1.7 杀镰孢菌素 | 第19-21页 |
1.2.2 蛋白质类 | 第21页 |
1.2.3 核苷类 | 第21页 |
1.2.4 其它 | 第21-22页 |
1.3 多粘类芽孢杆菌抗菌物质的作用机制 | 第22页 |
1.3.1 作用于细菌细胞膜 | 第22页 |
1.3.2 作用于真菌细胞壁 | 第22页 |
1.4 抗菌物质的分离纯化与结构鉴定 | 第22-26页 |
1.4.1 抗菌物质结构的分离纯化 | 第22-24页 |
1.4.1.1 沉淀和结晶 | 第22-23页 |
1.4.1.2 溶媒萃取法 | 第23页 |
1.4.1.3 高效液相色谱 | 第23-24页 |
1.4.2 抗菌物质结构鉴定研究 | 第24-26页 |
1.4.2.1 紫外光谱 | 第24页 |
1.4.2.2 红外光谱 | 第24页 |
1.4.2.3 质谱分析 | 第24-25页 |
1.4.2.4 MALDI-TOF-MS | 第25页 |
1.4.2.5 核磁共振 | 第25-26页 |
1.5 多粘类芽孢杆菌的培养基优化 | 第26-28页 |
1.5.1 单因素试验法 | 第26页 |
1.5.2 正交设计试验法 | 第26-27页 |
1.5.3 部分因子试验 | 第27页 |
1.5.4 均匀设计 | 第27页 |
1.5.5 最速上升法 | 第27-28页 |
1.5.6 响应面设计 | 第28页 |
1.6 本研究的立项依据、研究内容、技术路线 | 第28-30页 |
1.6.1 立项依据 | 第28页 |
1.6.2 研究内容 | 第28-29页 |
1.6.3 技术路线 | 第29-30页 |
2 材料与方法 | 第30-42页 |
2.1 材料 | 第30-32页 |
2.1.1 菌株 | 第30页 |
2.1.2 培养基 | 第30-32页 |
2.2 方法 | 第32-42页 |
2.2.1 菌株纯化 | 第32页 |
2.2.2 培养基的配制 | 第32-33页 |
2.2.3 菌种发酵 | 第33页 |
2.2.4 发酵上清液的制备 | 第33页 |
2.2.5 抗菌物质效价的测定 | 第33-35页 |
2.2.6 多粘类芽孢杆菌SC2胞外抗细菌物质的测定方法 | 第35页 |
2.2.7 碳源种类的优化 | 第35页 |
2.2.8 氮源种类的优化 | 第35-36页 |
2.2.8.1 无机氮对抗菌物质产量的影响 | 第35页 |
2.2.8.2 有机氮对抗菌物质产量的影响 | 第35-36页 |
2.2.8.3 氨基酸优化 | 第36页 |
2.2.9 碳酸钙浓度的优化 | 第36页 |
2.2.10 不同金属离子对抗菌物质产量的影响 | 第36-37页 |
2.2.10.1 锰离子对抗菌物质产量的影响 | 第36页 |
2.2.10.2 锌离子对抗菌物质产量的影响 | 第36页 |
2.2.10.3 镁离子抗菌物质产量的影响 | 第36-37页 |
2.2.11 正交设计 | 第37页 |
2.2.12 响应面法设计 | 第37-38页 |
2.2.13 温度优化 | 第38页 |
2.2.14 优化培养基与初始培养基抑菌物质产量的比较 | 第38-39页 |
2.2.15 粗脂肽物质的提取 | 第39页 |
2.2.16 薄层层析法(TLC) | 第39页 |
2.2.17 利用MALDI-TOF-MS质谱鉴定 | 第39页 |
2.2.18 分析型液相(HPLC) | 第39-40页 |
2.2.19 制备型液相 | 第40-41页 |
2.2.20 MS(质谱)分析脂肽 | 第41-42页 |
3 结果与分析 | 第42-86页 |
3.1 多粘类芽孢杆菌SC2菌株纯化 | 第42页 |
3.2 不同碳源对抗菌物质产量的影响 | 第42-43页 |
3.3 不同氮源对抗菌物质产量的影响 | 第43-48页 |
3.3.1 不同无机氮源对抗菌物质产量的影响 | 第43-44页 |
3.3.2 不同有机氮源对抗菌物质产量的影响 | 第44-46页 |
3.3.3 添加氨基酸对抗菌物质产量的影响 | 第46-48页 |
3.4 不同浓度碳酸钙对抗菌物质产量的影响 | 第48-49页 |
3.5 不同金属离子对抗菌物质产量的影响 | 第49-52页 |
3.5.1 锌离子对抗菌物质产量的影响 | 第49页 |
3.5.2 锰离子对抗菌物质产量的影响 | 第49-51页 |
3.5.3 镁离子对抗菌物质产量的影响 | 第51-52页 |
3.6 正交实验对发酵培养基优化 | 第52-55页 |
3.7 抗菌物质产量的响应面分析 | 第55-60页 |
3.7.1 BBD实验分析 | 第55-57页 |
3.7.2 抗菌物质产量的单因子响应分析 | 第57-58页 |
3.7.3 抗菌物质产量模型的响应面交互作用分析 | 第58-60页 |
3.8 温度对抗菌物质产量的影响 | 第60页 |
3.9 培养基优化验证试验 | 第60-61页 |
3.10 抗菌物质的分离纯化及鉴定 | 第61-86页 |
3.10.1 粗发酵液的制备 | 第61-62页 |
3.10.2 薄层层析 | 第62页 |
3.10.3 多粘类芽孢杆菌抗菌物质MALDI-TOF-MS分析 | 第62-63页 |
3.10.4 分析型液相 | 第63-65页 |
3.10.5 抗菌物质的质谱分析 | 第65-77页 |
3.10.5.1 抗菌物质分子量测定 | 第65-69页 |
3.10.5.2 抗菌物质分子结构分析 | 第69-77页 |
3.10.6 制备型液相 | 第77-86页 |
3.10.6.1 抗菌粗提物的液相收集 | 第77-78页 |
3.10.6.2 活性峰的液相分离 | 第78-80页 |
3.10.6.3 抗菌活性物质的相对分子质量分析 | 第80-83页 |
3.10.6.4 抗菌活性物质的分子结构鉴定 | 第83-85页 |
3.10.6.5 抗菌活性物质的抑菌谱检测 | 第85-86页 |
4 讨论 | 第86-88页 |
5 结论 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-93页 |
致谢 | 第93-94页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第94页 |