| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-33页 |
| 1.1 研究背景 | 第14-15页 |
| 1.2 成肌细胞分化研究进展 | 第15-17页 |
| 1.2.1 成肌细胞分化的起源 | 第15-16页 |
| 1.2.2 成肌细胞分化的分子调控机制 | 第16-17页 |
| 1.3 脂肪细胞分化研究进展 | 第17-19页 |
| 1.3.1 脂肪细胞分化的起源 | 第17页 |
| 1.3.2 脂肪细胞分化的分子调控机制 | 第17-19页 |
| 1.4 Smads家族 | 第19-24页 |
| 1.4.1 Smads家族蛋白的发现和命名 | 第19-20页 |
| 1.4.2 Smads家族蛋白的分类 | 第20页 |
| 1.4.3 Smads家族蛋白的结构 | 第20-21页 |
| 1.4.4 Smads家族蛋白的作用 | 第21页 |
| 1.4.5 Smad2和Smad3之间的比较 | 第21-24页 |
| 1.5 转化生长因子β信号通路 | 第24-28页 |
| 1.5.1 TGF-β信号通路的组成 | 第24-26页 |
| 1.5.2 TGF-β信号通路的调控机制 | 第26-27页 |
| 1.5.3 TGF-β信号通路对骨骼肌和脂肪作用的研究进展 | 第27-28页 |
| 1.6 腺病毒载体系统 | 第28-30页 |
| 1.6.1 腺病毒载体的结构 | 第28页 |
| 1.6.2 腺病毒载体的分类 | 第28-29页 |
| 1.6.3 腺病毒载体的优点 | 第29页 |
| 1.6.4 腺病毒载体构建常用的方法 | 第29-30页 |
| 1.7 RNAi | 第30-31页 |
| 1.8 本研究的目标、意义和内容 | 第31-33页 |
| 1.8.1 研究的目的和意义 | 第31页 |
| 1.8.2 研究内容 | 第31-33页 |
| 第二章 腺病毒介导Smad3基因在秦川牛成肌细胞和前体脂肪细胞的表达 | 第33-58页 |
| 2.1 材料与方法 | 第34-43页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第34页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第34-43页 |
| 2.2 结果 | 第43-53页 |
| 2.2.1 Smad3基因组织表达谱分析 | 第43-45页 |
| 2.2.2 秦川牛Smad3基因CDS区的克隆及鉴定 | 第45页 |
| 2.2.3 牛Smad3基因过表达腺病毒载体的构建与鉴定 | 第45-46页 |
| 2.2.4 牛Smad3基因干扰腺病毒载体的构建与鉴定 | 第46-48页 |
| 2.2.5 重组腺病毒的包装、扩增及滴度测定 | 第48-50页 |
| 2.2.6 腺病毒感染细胞最佳MOI值测定 | 第50-51页 |
| 2.2.7 超表达效率和干扰效率检测 | 第51-52页 |
| 2.2.8 Smad3基因抑制秦川牛成肌细胞和前体脂肪细胞分化 | 第52-53页 |
| 2.3 讨论 | 第53-56页 |
| 2.4 小结 | 第56-58页 |
| 第三章 Smad3基因的转录调控研究 | 第58-75页 |
| 3.1 材料与方法 | 第58-66页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第58页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第58-66页 |
| 3.2 结果 | 第66-71页 |
| 3.2.1 秦川牛不同月龄肌肉和脂肪组织中Smad3基因的组织表达谱分析 | 第66-67页 |
| 3.2.2 Smad3基因的启动子区序列扩增 | 第67页 |
| 3.2.3 Smad3基因启动子逐段缺失报告载体构建 | 第67-68页 |
| 3.2.4 Smad3基因缺失片段启动子荧光素酶活性检测 | 第68-69页 |
| 3.2.5 Smad3基因核心启动子结合的转录因子预测结果 | 第69页 |
| 3.2.6 KLF6-KLF15、KLF7和MZF1转录因子调控Smad3基因的表达 | 第69-71页 |
| 3.3 讨论 | 第71-73页 |
| 3.4 小结 | 第73-75页 |
| 第四章 Smad2与Smad3之间调控关系的研究 | 第75-95页 |
| 4.1 材料与方法 | 第75-80页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第75页 |
| 4.1.2 实验方法 | 第75-80页 |
| 4.2 结果 | 第80-90页 |
| 4.2.1 Smad2基因和Smad3基因序列生物学分析 | 第80-81页 |
| 4.2.2 Smad2和Smad3基因在成肌细胞分化过程中mRNA相对表达量.. | 第81页 |
| 4.2.3 过表达和干扰Smad3基因影响Smad2基因的表达 | 第81-82页 |
| 4.2.4 Smad2基因转录起始位点的确定 | 第82-83页 |
| 4.2.5 Smad2基因的启动子序列PCR扩增 | 第83页 |
| 4.2.6 Smad2基因启动子逐段缺失报告载体构建 | 第83-84页 |
| 4.2.7 Smad3转录因子不能直接调控Smad2基因启动子转录活性 | 第84页 |
| 4.2.8 Smad2基因启动子缺失片段荧光素酶活性检测 | 第84-85页 |
| 4.2.9 Smad2基因核心启动子区结合的关键转录因子预测 | 第85页 |
| 4.2.10 C/EBPα和C/EBPβ转录因子调控Smad2基因启动子转录活性 | 第85-87页 |
| 4.2.11 C/EBPα和C/EBPβ转录因子调控Smad2基因表达 | 第87-88页 |
| 4.2.12 Smad3基因调控C/EBPα和C/EBPβ转录因子的表达 | 第88-89页 |
| 4.2.13 Smad3基因调控Smad2基因的表达通过转录因子C/EBPα和C/EBPβ | 第89-90页 |
| 4.3 讨论 | 第90-93页 |
| 4.4 小结 | 第93-95页 |
| 第五章 结论 | 第95-96页 |
| 5.1 实验结论 | 第95页 |
| 5.2 创新点 | 第95-96页 |
| 附录 | 第96-116页 |
| 参考文献 | 第116-131页 |
| 致谢 | 第131-132页 |
| 作者简介 | 第132-133页 |
