中文摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
中文文摘 | 第6-10页 |
绪论 | 第10-18页 |
一、牙齿早期发育过程及特点 | 第10-11页 |
二、干细胞在牙再生医学领域中的应用 | 第11-14页 |
三、iPSc技术发展 | 第14-15页 |
四、拉曼光谱的原理及其在口腔医学中的应用 | 第15-17页 |
五、研究意义 | 第17-18页 |
第一章 材料和方法 | 第18-32页 |
1.1 材料 | 第18-20页 |
1.1.1 人早期胚胎与取材 | 第18页 |
1.1.2 实验动物 | 第18页 |
1.1.3 实验主要仪器 | 第18-20页 |
1.2 实验主要试剂 | 第20-21页 |
1.2.1 主要试剂 | 第20-21页 |
1.2.2 iPSc培养相关试剂 | 第21页 |
1.2.3 分离小鼠间充质细胞相关试剂 | 第21页 |
1.3 实验方法 | 第21-32页 |
1.3.1 试剂的配制 | 第21-22页 |
1.3.2 人iPSc的培养、传代、冻存及复苏 | 第22-24页 |
1.3.3 牙胚重组及肾囊膜移植 | 第24-25页 |
1.3.4 组织材料处理 | 第25-26页 |
1.3.5 组织块的形态学检测 | 第26-27页 |
1.3.6 细胞免疫荧光 | 第27页 |
1.3.7 免疫组化/荧光 | 第27-28页 |
1.3.8 人牙胚上皮的分离 | 第28-29页 |
1.3.9 Trizol提取RNA及反转录 | 第29-30页 |
1.3.10 嵌合体牙齿釉质的拉曼光谱分析 | 第30-32页 |
第二章 结果 | 第32-44页 |
2.1 建立高效诱导人iPSc牙向分化体系 | 第32-37页 |
2.1.1 不同来源人iPSc的形态学观察 | 第32-33页 |
2.1.2 人iPSc干细胞标志物的检测 | 第33-35页 |
2.1.3 小鼠牙胚间充质细胞的分离与嵌合体组织来源的鉴定 | 第35-36页 |
2.1.4 高效诱导人iPSc成釉分化体系的建立 | 第36-37页 |
2.2 嵌合体的牙向分化过程 | 第37-42页 |
2.2.1 嵌合体牙胚早期重聚发育模式 | 第37-39页 |
2.2.2 人iPSc向成釉细胞分化的过程 | 第39-40页 |
2.2.3 iPSc被诱导成牙早期相关基因的表达情况 | 第40-42页 |
2.3 拉曼光谱分析嵌合体牙齿的釉质成分 | 第42-44页 |
第三章 分析与讨论 | 第44-50页 |
3.1 高效诱导人iPSc成釉分化体系的建立 | 第44-46页 |
3.1.1 人iPSc的培养与鉴定以及嵌合体牙胚组织来源的鉴定 | 第44-45页 |
3.1.2 高效诱导人iPSc牙向分化体系的建立 | 第45-46页 |
3.2 嵌合体的牙向分化过程及基因表达情况 | 第46-48页 |
3.3 嵌合体牙釉质成分的拉曼光谱分析 | 第48-50页 |
第四章 结论 | 第50-52页 |
附录1 引物序列 | 第52-54页 |
附录2 | 第54-56页 |
附录3 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-66页 |
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第66-68页 |
致谢 | 第68-70页 |
个人简历 | 第70-72页 |