摘要 | 第5-9页 |
Abstract | 第9-13页 |
第一章 绪论 | 第17-29页 |
1. 对虾原代细胞培养的研究概况 | 第17-23页 |
1.1. 对虾和组织来源 | 第18-19页 |
1.2. 原代培养方式 | 第19-20页 |
1.3. 对虾培养基 | 第20-23页 |
1.4. 对虾细胞培养条件 | 第23页 |
2. 对虾细胞的传代培养研究进展 | 第23-25页 |
3. 对虾原代细胞永生性转化的研究进展 | 第25-27页 |
4. 立题依据、研究内容及意义 | 第27-29页 |
第二章 对虾淋巴组织原代细胞的培养 | 第29-45页 |
1. 前言 | 第29-30页 |
2. 材料与方法 | 第30-34页 |
2.1. 实验材料 | 第30-31页 |
2.1.1. 实验动物 | 第30页 |
2.1.2. 实验仪器 | 第30-31页 |
2.1.3. 实验药品 | 第31页 |
2.2. 实验方法 | 第31-34页 |
2.2.1. PBS 溶液的配制 | 第31-32页 |
2.2.2. 虾肌提取液的制备 | 第32页 |
2.2.3. 培养基的配制 | 第32页 |
2.2.4. 对虾原代细胞培养 | 第32-33页 |
2.2.5. 对虾淋巴组织块重复贴壁培养 | 第33页 |
2.2.6. 对虾淋巴组织原代培养细胞对对虾白斑病毒(WSSV)的敏感性 | 第33-34页 |
3. 结果 | 第34-41页 |
3.1. 对虾不同来源组织的原代培养的结果 | 第34页 |
3.2. 利用对虾培养基 Ⅰ、Ⅱ 和 Ⅲ 培养对虾淋巴组织的原代细胞培养结果 | 第34-39页 |
3.3. 对虾原代培养淋巴组织块可被重复利用 | 第39-40页 |
3.4. 对虾淋巴组织原代培养细胞对对虾白斑病毒具有敏感性 | 第40-41页 |
4. 讨论 | 第41-44页 |
5. 本章小结 | 第44-45页 |
第三章 对虾原代培养细胞的传代培养 | 第45-58页 |
1. 前言 | 第45-46页 |
2. 材料与方法 | 第46-48页 |
2.1. 实验材料 | 第46-47页 |
2.1.1. 细胞 | 第46页 |
2.1.2. 实验仪器 | 第46页 |
2.1.3. 实验药品 | 第46-47页 |
2.2. 实验方法 | 第47-48页 |
2.2.1. 消化液的配制 | 第47-48页 |
2.2.2. 对虾淋巴组织原代培养细胞的传代 | 第48页 |
3. 结果 | 第48-55页 |
4. 讨论 | 第55-57页 |
5. 本章小结 | 第57-58页 |
第四章 对虾细胞永生性转化的初步研究 | 第58-77页 |
1. 前言 | 第58-59页 |
2. 材料和方法 | 第59-66页 |
2.1. 实验材料 | 第59-61页 |
2.1.1. 细胞 | 第59页 |
2.1.2. 质粒 | 第59页 |
2.1.3. 试剂 | 第59-60页 |
2.1.4. 引物及测序 | 第60页 |
2.1.5. 实验仪器 | 第60-61页 |
2.2. 实验方法 | 第61-66页 |
2.2.1. 脂质体转染法将 pMXs-c-Myc 和 pMCs-GFP 质粒导入对虾淋巴组织原代细胞 | 第61页 |
2.2.2. 逆转录病毒法介导法将 pMXs-c-Myc 和 pMCs-GFP 质粒导入对虾淋巴组织原代细胞 | 第61-63页 |
2.2.2.1. 逆转录病毒的包装与收集 | 第61-62页 |
2.2.2.2. 逆转录病毒滴度的测定 | 第62-63页 |
2.2.2.3. 逆转录病毒感染对虾淋巴原代培养细胞 | 第63页 |
2.2.3. 目的基因的检测 | 第63-66页 |
2.2.3.1. 对虾淋巴组织原代培养细胞的荧光显微镜观察 | 第63页 |
2.2.3.2. 基因组 DNA 的提取 | 第63-64页 |
2.2.3.3. 总 RNA 的提取以及反转录 | 第64-66页 |
2.2.3.4. PCR 扩增 c-Myc 基因目的片段 | 第66页 |
3. 结果 | 第66-75页 |
3.1. 脂质体转染法将 pMXs-c-Myc 导入对虾淋巴组织原代培养细胞的实验结果 | 第66-70页 |
3.2. 逆转录病毒法将 pMXs-c-Myc 导入对虾淋巴组织原代培养细胞的结果 | 第70-71页 |
3.3. 脂质体转染法和逆转录病毒法介导法将 pMCs-GFP 质粒导入对虾淋巴组织原代培养细胞的结果 | 第71-75页 |
3.3.1. 逆转录病毒的包装和滴度测定的结果 | 第71-73页 |
3.3.2. pMCs-GFP 质粒转染和含 GFP 基因的逆转录病毒接种对虾淋巴组织原代培养细胞的结果 | 第73-75页 |
4. 讨论 | 第75-76页 |
5. 本章小结 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
个人简介 | 第85-86页 |
硕士期间文章 | 第86-87页 |