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对虾淋巴组织的原代和传代细胞培养及其永生性转化研究

摘要第5-9页
Abstract第9-13页
第一章 绪论第17-29页
    1. 对虾原代细胞培养的研究概况第17-23页
        1.1. 对虾和组织来源第18-19页
        1.2. 原代培养方式第19-20页
        1.3. 对虾培养基第20-23页
        1.4. 对虾细胞培养条件第23页
    2. 对虾细胞的传代培养研究进展第23-25页
    3. 对虾原代细胞永生性转化的研究进展第25-27页
    4. 立题依据、研究内容及意义第27-29页
第二章 对虾淋巴组织原代细胞的培养第29-45页
    1. 前言第29-30页
    2. 材料与方法第30-34页
        2.1. 实验材料第30-31页
            2.1.1. 实验动物第30页
            2.1.2. 实验仪器第30-31页
            2.1.3. 实验药品第31页
        2.2. 实验方法第31-34页
            2.2.1. PBS 溶液的配制第31-32页
            2.2.2. 虾肌提取液的制备第32页
            2.2.3. 培养基的配制第32页
            2.2.4. 对虾原代细胞培养第32-33页
            2.2.5. 对虾淋巴组织块重复贴壁培养第33页
            2.2.6. 对虾淋巴组织原代培养细胞对对虾白斑病毒(WSSV)的敏感性第33-34页
    3. 结果第34-41页
        3.1. 对虾不同来源组织的原代培养的结果第34页
        3.2. 利用对虾培养基 Ⅰ、Ⅱ 和 Ⅲ 培养对虾淋巴组织的原代细胞培养结果第34-39页
        3.3. 对虾原代培养淋巴组织块可被重复利用第39-40页
        3.4. 对虾淋巴组织原代培养细胞对对虾白斑病毒具有敏感性第40-41页
    4. 讨论第41-44页
    5. 本章小结第44-45页
第三章 对虾原代培养细胞的传代培养第45-58页
    1. 前言第45-46页
    2. 材料与方法第46-48页
        2.1. 实验材料第46-47页
            2.1.1. 细胞第46页
            2.1.2. 实验仪器第46页
            2.1.3. 实验药品第46-47页
        2.2. 实验方法第47-48页
            2.2.1. 消化液的配制第47-48页
            2.2.2. 对虾淋巴组织原代培养细胞的传代第48页
    3. 结果第48-55页
    4. 讨论第55-57页
    5. 本章小结第57-58页
第四章 对虾细胞永生性转化的初步研究第58-77页
    1. 前言第58-59页
    2. 材料和方法第59-66页
        2.1. 实验材料第59-61页
            2.1.1. 细胞第59页
            2.1.2. 质粒第59页
            2.1.3. 试剂第59-60页
            2.1.4. 引物及测序第60页
            2.1.5. 实验仪器第60-61页
        2.2. 实验方法第61-66页
            2.2.1. 脂质体转染法将 pMXs-c-Myc 和 pMCs-GFP 质粒导入对虾淋巴组织原代细胞第61页
            2.2.2. 逆转录病毒法介导法将 pMXs-c-Myc 和 pMCs-GFP 质粒导入对虾淋巴组织原代细胞第61-63页
                2.2.2.1. 逆转录病毒的包装与收集第61-62页
                2.2.2.2. 逆转录病毒滴度的测定第62-63页
                2.2.2.3. 逆转录病毒感染对虾淋巴原代培养细胞第63页
            2.2.3. 目的基因的检测第63-66页
                2.2.3.1. 对虾淋巴组织原代培养细胞的荧光显微镜观察第63页
                2.2.3.2. 基因组 DNA 的提取第63-64页
                2.2.3.3. 总 RNA 的提取以及反转录第64-66页
                2.2.3.4. PCR 扩增 c-Myc 基因目的片段第66页
    3. 结果第66-75页
        3.1. 脂质体转染法将 pMXs-c-Myc 导入对虾淋巴组织原代培养细胞的实验结果第66-70页
        3.2. 逆转录病毒法将 pMXs-c-Myc 导入对虾淋巴组织原代培养细胞的结果第70-71页
        3.3. 脂质体转染法和逆转录病毒法介导法将 pMCs-GFP 质粒导入对虾淋巴组织原代培养细胞的结果第71-75页
            3.3.1. 逆转录病毒的包装和滴度测定的结果第71-73页
            3.3.2. pMCs-GFP 质粒转染和含 GFP 基因的逆转录病毒接种对虾淋巴组织原代培养细胞的结果第73-75页
    4. 讨论第75-76页
    5. 本章小结第76-77页
参考文献第77-84页
致谢第84-85页
个人简介第85-86页
硕士期间文章第86-87页

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