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黄芪多糖三维立体培养小鼠MC-3T3-E1成骨细胞的生物学效应研究

中文摘要第4-7页
Abstract第7-10页
英文缩略词第16-17页
第1章 绪论第17-43页
    1.1 黄芪多糖第18-24页
        1.1.1 黄芪多糖的结构特点第18页
        1.1.2 黄芪多糖的生物学效应第18-24页
    1.2 动物实验替代法第24-27页
        1.2.1 3R原则第24页
        1.2.2 替代法(Alternatives)第24-25页
        1.2.3 国外动物实验替代法研究的现状与发展第25-27页
    1.3 体外细胞学实验替代动物实验第27-28页
        1.3.1 正常体细胞体外培养第27-28页
        1.3.2 肿瘤细胞体外培养第28页
    1.4 三维细胞培养(Three-dimensional cell culture, 3D cell culture)第28-41页
        1.4.1 三维细胞培养技术第30-33页
        1.4.2 微载体立体培养技术第33-39页
        1.4.3 明胶材料在三维立体培养中的应用第39页
        1.4.4 海藻酸盐水凝胶第39-41页
    1.5 本论文选题内容、目标、意义及创新第41-43页
        1.5.1 本课题的研究内容第41-42页
        1.5.2 本课题的研究目标第42页
        1.5.3 本课题的研究特色及创新之处第42-43页
第2章 黄芪多糖在二维平面细胞培养中的生物学效应第43-63页
    2.1 材料与方法第43-50页
        2.1.1 主要试剂与仪器第43-45页
        2.1.2 MC-3T3-E1成骨细胞系培养及传代第45-46页
        2.1.3 黄芪多糖细胞毒性测定及实验剂量选择第46页
        2.1.4 黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞增殖影响的检测第46-47页
        2.1.5 黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞ALP活性影响的检测第47页
        2.1.6 黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞钙沉积影响的检测第47-48页
        2.1.7 黄芪多糖对MC-3T3-E1细胞成骨相关基因影响的检测第48-49页
        2.1.8 MC-3T3-E1成骨细胞激光免疫荧光共聚焦观察第49-50页
        2.1.9 统计学分析第50页
    2.2 结果第50-58页
        2.2.1 黄芪多糖对MC-3T3-E1细胞毒性剂量-反应关系第50-51页
        2.2.2 黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞增殖的影响第51-52页
        2.2.3 黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞ALP活性的影响第52-53页
        2.2.4 黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞钙沉积的影响第53-54页
        2.2.5 黄芪多糖对MC-3T3-E1细胞成骨相关基因的影响第54-56页
        2.2.6 MC-3T3-E1成骨细胞激光免疫荧光共聚焦观察第56-58页
    2.3 讨论第58-61页
    2.4 小结第61-63页
第3章 明胶/海藻酸微载体的制备第63-75页
    3.1 材料与方法第63-66页
        3.1.1 主要试剂与仪器第63页
        3.1.2 明胶/海藻酸微载体的制备第63-64页
        3.1.3 不同明胶和海藻酸钠比例制备微载体第64页
        3.1.4 不同浓度CaCl_2溶液作为接收液制备微载体第64-65页
        3.1.5 不同明胶和海藻酸钠总固体浓度制备微载体第65页
        3.1.6 不同电压制备微载体第65页
        3.1.7 不同距离制备微载体第65页
        3.1.8 不同注射器针头内径制备微载体第65页
        3.1.9 光学倒置显微镜观察第65-66页
        3.1.10 统计学分析第66页
    3.2 结果第66-71页
        3.2.1 不同明胶和海藻酸钠比例对微载体的影响第66页
        3.2.2 不同浓度CaCl_2溶液作为接收液对微载体的影响第66-67页
        3.2.3 不同明胶和海藻酸钠总固体浓度对微载体的影响第67-69页
        3.2.4 不同电压对微载体的影响第69页
        3.2.5 不同距离对微载体的影响第69-70页
        3.2.6 不同注射器针头内径对微载体的影响第70-71页
    3.3 讨论第71-73页
    3.4 小结第73-75页
第4章 黄芪多糖在细胞/明胶/海藻酸微载体三维立体培养中的生物学效应第75-87页
    4.1 材料与方法第75-78页
        4.1.1 主要试剂与仪器第75-76页
        4.1.2 MC-3T3-E1细胞的接种和培养第76-77页
        4.1.3 黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞增殖影响的检测第77页
        4.1.4 MC-3T3-E1 成骨细胞活-死(Live-Dead)细胞染色第77-78页
        4.1.5 黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞ALP活性影响的检测第78页
        4.1.6 黄芪多糖对MC-3T3-E1细胞成骨相关基因影响的检测第78页
        4.1.7 统计学分析第78页
    4.2 结果第78-84页
        4.2.1 黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞增殖的影响第78-79页
        4.2.2 MC-3T3-E1成骨细胞形态和活-死细胞染色观察第79-81页
        4.2.3 黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞ALP活性的影响第81-82页
        4.2.4 黄芪多糖对MC-3T3-E1细胞成骨相关基因的影响第82-84页
    4.3 讨论第84-86页
    4.4 小结第86-87页
第5章 黄芪多糖在细胞@明胶/海藻酸微载体三维立体培养中的生物学效应第87-99页
    5.1 材料与方法第87-90页
        5.1.1 主要试剂与仪器第87-88页
        5.1.2 MC-3T3-E1细胞的包被和培养第88-89页
        5.1.3 黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞增殖影响的检测第89页
        5.1.4 MC-3T3-E1成骨细胞活-死细胞染色第89页
        5.1.5 黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞ALP活性影响的检测第89页
        5.1.6 黄芪多糖对MC-3T3-E1细胞成骨相关基因影响的检测第89-90页
        5.1.7 统计学分析第90页
    5.2 结果第90-95页
        5.2.1 黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞增殖的影响第90-91页
        5.2.2 MC-3T3-E1成骨细胞形态和活-死细胞染色观察第91-93页
        5.2.3 黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞ALP活性的影响第93-94页
        5.2.4 黄芪多糖对MC-3T3-E1细胞成骨相关基因的影响第94-95页
    5.3 讨论第95-97页
    5.4 小结第97-99页
第6章 二维平面培养和三维立体培养的比较第99-111页
    6.1 材料与方法第99-102页
        6.1.1 主要试剂与仪器第99-100页
        6.1.2 二维平面培养和三维立体培养对MC-3T3-E1细胞增殖影响的比较第100-101页
        6.1.3 二维平面培养和三维立体培养对MC-3T3-E1细胞ALP活性影响的比较第101页
        6.1.4 二维平面培养和三维立体培养对MC-3T3-E1细胞成骨相关基因影响的比较第101-102页
        6.1.5 统计学分析第102页
    6.2 结果第102-107页
        6.2.1 二维平面培养和三维立体培养对MC-3T3-E1细胞增殖的影响第102-104页
        6.2.2 二维平面培养和三维培养对MC-3T3-E1细胞ALP活性的影响第104-105页
        6.2.3 二维平面培养和三维培养对MC-3T3-E1细胞成骨相关基因的影响第105-107页
    6.3 讨论第107-109页
    6.4 小结第109-111页
结论第111-113页
研究中的不足之处第113-115页
展望第115-117页
参考文献第117-137页
作者简介及在读期间成果第137-139页
致谢第139-140页

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