摘要 | 第4-10页 |
Abstract | 第10-18页 |
英文缩略词 | 第22-23页 |
1前言 | 第23-44页 |
1.1 旋毛虫病的研究背景 | 第23-31页 |
1.1.1 旋毛虫病的流行及危害 | 第23-25页 |
1.1.2 旋毛虫的生活史 | 第25-26页 |
1.1.3 旋毛虫分类鉴定方法 | 第26-28页 |
1.1.4 旋毛虫病常用的分子检测技术 | 第28-31页 |
1.2 LAMP技术背景 | 第31-36页 |
1.2.1 LAMP技术原理 | 第31页 |
1.2.2 LAMP引物设计 | 第31-32页 |
1.2.3 LAMP反应过程 | 第32-33页 |
1.2.4 LAMP结果判定 | 第33-34页 |
1.2.5 LAMP技术在病原生物检测中的应用 | 第34-36页 |
1.3 LAMP技术检测旋毛虫DNA的实验流程 | 第36-38页 |
1.3.1 寻找靶基因 | 第36-37页 |
1.3.2 分析靶序列 | 第37页 |
1.3.3 设计LAMP引物 | 第37页 |
1.3.4 筛选最佳引物 | 第37页 |
1.3.5 评价最佳引物的特异性 | 第37页 |
1.3.6 评价最佳引物的敏感性 | 第37-38页 |
1.3.7 利用模拟样本评价引物敏感性 | 第38页 |
1.3.8 选择样本核酸提取方法 | 第38页 |
1.3.9 引入封闭剂防止污染 | 第38页 |
1.3.10 组装旋毛虫检测试剂盒 | 第38页 |
1.4 参考文献 | 第38-44页 |
2 旋毛虫LAMP检测试剂盒的研制 | 第44-66页 |
2.1 材料和方法 | 第44-55页 |
2.1.1 旋毛虫虫种、寄生虫标本、实验动物来源 | 第44-45页 |
2.1.2 主要试剂和仪器 | 第45-46页 |
2.1.3 主要试剂的组成和配置 | 第46-47页 |
2.1.4 旋毛虫小鼠动物模型的建立 | 第47页 |
2.1.5 旋毛虫肌肉幼虫的收集和计数 | 第47页 |
2.1.6 核酸定量的方法步骤 | 第47页 |
2.1.7 靶基因的选择 | 第47-49页 |
2.1.8 LAMP引物设计 | 第49-54页 |
2.1.9 LAMP反应体系及条件 | 第54页 |
2.1.10 LAMP反应检测方法 | 第54页 |
2.1.11 PCR反应体系及引物选择 | 第54-55页 |
2.1.12 封闭剂制作及使用方法 | 第55页 |
2.2 结果 | 第55-61页 |
2.2.1 最佳引物筛选 | 第55-56页 |
2.2.2 评价引物特异性 | 第56-57页 |
2.2.3 引物敏感性评价及与PCR法的比较 | 第57-60页 |
2.2.4 两种核酸提取方法的比较 | 第60页 |
2.2.5 评价封闭剂对LAMP反应和钙黄绿素(FD)显色效果的影响 | 第60-61页 |
2.3 讨论 | 第61-64页 |
2.4 小结 | 第64页 |
2.5 参考文献 | 第64-66页 |
3 LAMP试剂盒检测小鼠肌肉旋毛虫DNA | 第66-74页 |
3.1 材料和方法 | 第66-67页 |
3.1.1 旋毛虫及小鼠 | 第66页 |
3.1.2 旋毛虫感染动物模型的建立及样本制备 | 第66-67页 |
3.1.3 主要试剂及仪器 | 第67页 |
3.2 结果 | 第67-70页 |
3.2.1 模拟肌肉样本的敏感性实验及与PCR的比较 | 第67-68页 |
3.2.2 不同感染剂量小鼠肌肉样本敏感性实验 | 第68-70页 |
3.3 讨论 | 第70-72页 |
3.4 小结 | 第72页 |
3.5 参考文献 | 第72-74页 |
4 LAMP检测小鼠血液中旋毛虫DNA | 第74-87页 |
4.1 材料和方法 | 第74-75页 |
4.1.1 旋毛虫及小鼠 | 第74页 |
4.1.2 旋毛虫感染动物分组及样本制备 | 第74页 |
4.1.3 主要试剂及仪器 | 第74-75页 |
4.2 结果 | 第75-83页 |
4.2.1 小鼠轻度感染组 1d~20dpi血液样本检测 | 第75-77页 |
4.2.2 小鼠中度感染组 1d~20dpi血液样本检测 | 第77-79页 |
4.2.3 小鼠重度感染组 1d~20dpi血液样本检测 | 第79-81页 |
4.2.4 LAMP检测血液样本结果的统计分析 | 第81-83页 |
4.3 讨论 | 第83-85页 |
4.4 小结 | 第85-86页 |
4.5 参考文献 | 第86-87页 |
5 LAMP检测小鼠粪便中旋毛虫DNA | 第87-99页 |
5.1 材料和方法 | 第87-88页 |
5.1.1 旋毛虫及小鼠 | 第87页 |
5.1.2 旋毛虫感染动物分组及样本制备 | 第87页 |
5.1.3 主要试剂及仪器 | 第87-88页 |
5.2 结果 | 第88-96页 |
5.2.1 小鼠轻度感染组 1d~20dpi粪便样本检测 | 第88-90页 |
5.2.2 小鼠中度感染组 1d~20dpi粪便样本检测 | 第90-92页 |
5.2.3 小鼠重度感染组 1d~20dpi粪便样本检测 | 第92-94页 |
5.2.4 LAMP检测粪便样本结果的统计分析 | 第94-96页 |
5.3 讨论 | 第96-98页 |
5.4 小结 | 第98页 |
5.5 参考文献 | 第98-99页 |
全文结论 | 第99-100页 |
综述:LAMP技术在病原生物检测中的研究与应用 | 第100-111页 |
参考文献 | 第108-111页 |