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环介导等温扩增(LAMP)技术检测旋毛虫DNA的研究

摘要第4-10页
Abstract第10-18页
英文缩略词第22-23页
1前言第23-44页
    1.1 旋毛虫病的研究背景第23-31页
        1.1.1 旋毛虫病的流行及危害第23-25页
        1.1.2 旋毛虫的生活史第25-26页
        1.1.3 旋毛虫分类鉴定方法第26-28页
        1.1.4 旋毛虫病常用的分子检测技术第28-31页
    1.2 LAMP技术背景第31-36页
        1.2.1 LAMP技术原理第31页
        1.2.2 LAMP引物设计第31-32页
        1.2.3 LAMP反应过程第32-33页
        1.2.4 LAMP结果判定第33-34页
        1.2.5 LAMP技术在病原生物检测中的应用第34-36页
    1.3 LAMP技术检测旋毛虫DNA的实验流程第36-38页
        1.3.1 寻找靶基因第36-37页
        1.3.2 分析靶序列第37页
        1.3.3 设计LAMP引物第37页
        1.3.4 筛选最佳引物第37页
        1.3.5 评价最佳引物的特异性第37页
        1.3.6 评价最佳引物的敏感性第37-38页
        1.3.7 利用模拟样本评价引物敏感性第38页
        1.3.8 选择样本核酸提取方法第38页
        1.3.9 引入封闭剂防止污染第38页
        1.3.10 组装旋毛虫检测试剂盒第38页
    1.4 参考文献第38-44页
2 旋毛虫LAMP检测试剂盒的研制第44-66页
    2.1 材料和方法第44-55页
        2.1.1 旋毛虫虫种、寄生虫标本、实验动物来源第44-45页
        2.1.2 主要试剂和仪器第45-46页
        2.1.3 主要试剂的组成和配置第46-47页
        2.1.4 旋毛虫小鼠动物模型的建立第47页
        2.1.5 旋毛虫肌肉幼虫的收集和计数第47页
        2.1.6 核酸定量的方法步骤第47页
        2.1.7 靶基因的选择第47-49页
        2.1.8 LAMP引物设计第49-54页
        2.1.9 LAMP反应体系及条件第54页
        2.1.10 LAMP反应检测方法第54页
        2.1.11 PCR反应体系及引物选择第54-55页
        2.1.12 封闭剂制作及使用方法第55页
    2.2 结果第55-61页
        2.2.1 最佳引物筛选第55-56页
        2.2.2 评价引物特异性第56-57页
        2.2.3 引物敏感性评价及与PCR法的比较第57-60页
        2.2.4 两种核酸提取方法的比较第60页
        2.2.5 评价封闭剂对LAMP反应和钙黄绿素(FD)显色效果的影响第60-61页
    2.3 讨论第61-64页
    2.4 小结第64页
    2.5 参考文献第64-66页
3 LAMP试剂盒检测小鼠肌肉旋毛虫DNA第66-74页
    3.1 材料和方法第66-67页
        3.1.1 旋毛虫及小鼠第66页
        3.1.2 旋毛虫感染动物模型的建立及样本制备第66-67页
        3.1.3 主要试剂及仪器第67页
    3.2 结果第67-70页
        3.2.1 模拟肌肉样本的敏感性实验及与PCR的比较第67-68页
        3.2.2 不同感染剂量小鼠肌肉样本敏感性实验第68-70页
    3.3 讨论第70-72页
    3.4 小结第72页
    3.5 参考文献第72-74页
4 LAMP检测小鼠血液中旋毛虫DNA第74-87页
    4.1 材料和方法第74-75页
        4.1.1 旋毛虫及小鼠第74页
        4.1.2 旋毛虫感染动物分组及样本制备第74页
        4.1.3 主要试剂及仪器第74-75页
    4.2 结果第75-83页
        4.2.1 小鼠轻度感染组 1d~20dpi血液样本检测第75-77页
        4.2.2 小鼠中度感染组 1d~20dpi血液样本检测第77-79页
        4.2.3 小鼠重度感染组 1d~20dpi血液样本检测第79-81页
        4.2.4 LAMP检测血液样本结果的统计分析第81-83页
    4.3 讨论第83-85页
    4.4 小结第85-86页
    4.5 参考文献第86-87页
5 LAMP检测小鼠粪便中旋毛虫DNA第87-99页
    5.1 材料和方法第87-88页
        5.1.1 旋毛虫及小鼠第87页
        5.1.2 旋毛虫感染动物分组及样本制备第87页
        5.1.3 主要试剂及仪器第87-88页
    5.2 结果第88-96页
        5.2.1 小鼠轻度感染组 1d~20dpi粪便样本检测第88-90页
        5.2.2 小鼠中度感染组 1d~20dpi粪便样本检测第90-92页
        5.2.3 小鼠重度感染组 1d~20dpi粪便样本检测第92-94页
        5.2.4 LAMP检测粪便样本结果的统计分析第94-96页
    5.3 讨论第96-98页
    5.4 小结第98页
    5.5 参考文献第98-99页
全文结论第99-100页
综述:LAMP技术在病原生物检测中的研究与应用第100-111页
    参考文献第108-111页

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