| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一部分 C8orf4调控肝癌干细胞分子机制研究 | 第14-42页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| 1.1 C8orf4结构和功能概述 | 第14-15页 |
| 1.2 肝癌及肝癌干细胞 | 第15-19页 |
| 1.2.1 肝癌概述 | 第15页 |
| 1.2.2 肝癌发生过程 | 第15-17页 |
| 1.2.3 肝癌干细胞概述 | 第17-18页 |
| 1.2.4 肝癌干细胞研究前沿 | 第18-19页 |
| 1.3 Notch信号 | 第19-24页 |
| 1.3.1 Notch信号概述 | 第19-22页 |
| 1.3.2 Notch信号与肿瘤干细胞 | 第22-23页 |
| 1.3.3 Notch信号,肝癌和肝癌干细胞 | 第23-24页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第24-34页 |
| 2.1 细胞系及其培养条件 | 第24页 |
| 2.2 抗体及试剂 | 第24页 |
| 2.3 C8orf4 KO细胞系的制备 | 第24-25页 |
| 2.4 C8orf4敲低和高表细胞系及原代细胞的制备 | 第25-26页 |
| 2.5 RNA抽提、RT-PCR和Realtime PCR | 第26页 |
| 2.6 酵母双杂交 | 第26-29页 |
| 2.7 Western blot | 第29-30页 |
| 2.8 免疫荧光 | 第30页 |
| 2.9 免疫组化 | 第30-31页 |
| 2.10 核质分离 | 第31-32页 |
| 2.11 小球形成 | 第32页 |
| 2.12 Side population分选 | 第32页 |
| 2.13 流式细胞术 | 第32-33页 |
| 2.14 IP和co-IP | 第33页 |
| 2.15 肿瘤生长和梯度稀释成瘤 | 第33页 |
| 2.16 组学分析和数据挖掘 | 第33-34页 |
| 第三章 实验结果及讨论 | 第34-40页 |
| 3.1 C8orf4在肝癌中低表达 | 第34-35页 |
| 3.2 C8orf4在肝癌干细胞中低表达 | 第35-36页 |
| 3.3 C8orf4负调控肝癌干细胞 | 第36页 |
| 3.4 C8orf4负调控Notch信号 | 第36-37页 |
| 3.5 C8orf4与Notch2相互作用,并影响其入核 | 第37-38页 |
| 3.6 Notch2及其下游信号在肝癌干细胞中发挥重要作用 | 第38-39页 |
| 3.7 Notch信号与肝癌临床有密切关系 | 第39-40页 |
| 第四章 讨论与小结 | 第40-42页 |
| 第二部分 Zic2调节肝癌干细胞分子机制研究 | 第42-57页 |
| 第一章 文献综述 | 第42-43页 |
| 1.1 Zic2结构和功能概述 | 第42页 |
| 1.2 NURF复合物 | 第42-43页 |
| 1.3 Oct4 | 第43页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第43-47页 |
| 2.1 细胞系及其培养条件 | 第43页 |
| 2.2 抗体及试剂 | 第43-44页 |
| 2.3 KO和KD细胞系的制备 | 第44页 |
| 2.4 Luciferase | 第44-45页 |
| 2.5 ChIP实验 | 第45-46页 |
| 2.6 EMSA | 第46-47页 |
| 2.7 DNase Ⅰ敏感性实验 | 第47页 |
| 第三章 实验结果及讨论 | 第47-55页 |
| 3.1 Zic2在肝癌中高表达 | 第48页 |
| 3.2 Zic2在肝癌干细胞中高表达 | 第48-49页 |
| 3.3 Zic2对肝癌干细胞的自我更新至关重要 | 第49-50页 |
| 3.4 Zic2影响OCT4信号 | 第50-51页 |
| 3.5 Zic2结合到OCT4的promoter上 | 第51-52页 |
| 3.6 Zic2招募NURF复合物 | 第52-53页 |
| 3.7 NURF复合物对肝癌干细胞的干性维持不可或缺 | 第53-54页 |
| 3.8 NURF复合物与肝癌的临床严重性和预后有关 | 第54-55页 |
| 第四章 讨论和小结 | 第55-57页 |
| 第三部分 Lnc-β-Catm影响肝癌干细胞的分子机制研究 | 第57-82页 |
| 第一章 文献综述 | 第57-64页 |
| 1.1 Long noncoding RNA | 第57-59页 |
| 1.1.1 LncRNA概述 | 第57页 |
| 1.1.2 LncRNA发挥作用的机制 | 第57-58页 |
| 1.1.3 LncRNA与肿瘤的关系 | 第58-59页 |
| 1.2 Wnt/β-catenin | 第59-60页 |
| 1.2.1 概述 | 第59-60页 |
| 1.2.2 Wnt/β-catenin与肿瘤和干性的关系 | 第60页 |
| 1.3 EZH2 | 第60-61页 |
| 1.3.1 EZH2概述 | 第60-61页 |
| 1.3.2 EZH2与肿瘤和干性的关系 | 第61页 |
| 1.4 蛋白质翻译后修饰 | 第61-64页 |
| 1.4.1 翻译后修饰概述 | 第61-62页 |
| 1.4.2 甲基化修饰 | 第62-63页 |
| 1.4.3 磷酸化修饰 | 第63页 |
| 1.4.4 泛素化修饰 | 第63-64页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第64-69页 |
| 2.1 FISH | 第64-65页 |
| 2.2 RNA EMSA | 第65-66页 |
| 2.3 Northem | 第66-68页 |
| 2.4 RNA-IP | 第68页 |
| 2.5 RNA-Pull down | 第68-69页 |
| 第三章 实验结果及讨论 | 第69-80页 |
| 3.1 Lnc-β-Catm在肝癌中高表达 | 第71-72页 |
| 3.2 Lnc-β-Catm在肝癌干细胞中高表达 | 第72页 |
| 3.3 Lnc-β-Catm对肝癌干细胞的自我更新至关重要 | 第72-73页 |
| 3.4 Lnc-β-Catm与β-catenin和EZH2相互作用 | 第73-74页 |
| 3.5 Lnc-β-Catm促进β-catenin和EZH2的相互作用 | 第74-75页 |
| 3.6 EZH2能够甲基化β-catenin | 第75-76页 |
| 3.7 EZH2甲基化β-catenin的位点是K49 | 第76-77页 |
| 3.8. β-catenin甲基化抑制其磷酸化和泛素化 | 第77-78页 |
| 3.9. Lnc-β-Catm通过β-catenin促进肝癌干细胞的自我更新 | 第78-79页 |
| 3.10. Lnc-β-Catm和Wnt/β-catenin与肝癌临床相关 | 第79-80页 |
| 第四章 讨论和小结 | 第80-82页 |
| 第四部分 | 第82-98页 |
| 第一章 文献综述 | 第82-87页 |
| 1.1 SWI/SNF复合物 | 第82-85页 |
| 1.1.1 SWI/SNF复合物概述 | 第82-83页 |
| 1.1.2 SWI/SNF复合物与肿瘤 | 第83页 |
| 1.1.3 SWI/SNF复合物与肿瘤干细胞 | 第83-84页 |
| 1.1.4 Brg1和Brm | 第84-85页 |
| 1.2 Yap1信号通路 | 第85-86页 |
| 1.2.1 Yap1信号通路概述 | 第85页 |
| 1.2.2 Yap1与肿瘤及肿瘤干细胞 | 第85-86页 |
| 1.3 Klf4 | 第86-87页 |
| 1.3.1 Klf4与干性维持 | 第86-87页 |
| 1.3.2 Klf4与肿瘤发生 | 第87页 |
| 第二章 实验方法 | 第87-88页 |
| 第三章 实验结果及分析 | 第88-96页 |
| 3.1. LncBrm在肝癌中高表达 | 第88-89页 |
| 3.2. LncBrm在肝癌干细胞中高表达 | 第89-90页 |
| 3.3. LncBrm敲低抑制肝癌干细胞的自我更新 | 第90-91页 |
| 3.4. LncBrm高表达促进肝癌肝癌细胞的自我更新 | 第91-92页 |
| 3.5. LncBrm和Brm相互作用 | 第92-93页 |
| 3.6. Brm/Brg1影响Yap1的信号通路的活化 | 第93-94页 |
| 3.7. Yap1信号通路促进肝癌干细胞的自我更新 | 第94-95页 |
| 3.8. Yap信号通路的活化与肝癌临床严重程度密切相关 | 第95-96页 |
| 第四章 讨论和小结 | 第96-98页 |
| 符号说明 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-109页 |
| 博士期间发表论文 | 第109-111页 |
| 致谢 | 第111页 |
